第六章第二节食品中重金属的检测技术_食品分析与检验技术.doc

第二节 食品中重金属的检测技术 第二节 食品中重金属的检测技术一、食品中砷的测定（引用GB/T5009.762003）元素砷在自然界环境中极少，因其不溶于水，故无毒，但极易被氧化为剧毒的三氧化二砷（即砒霜）。砷的化合物在自然环境中广泛存在。食品中砷的污染常见的有含砷的农药、加工过程中使用含砷的化学物质做原料（硫酸、盐酸、食用色素）。由于原料中含砷，使食品受到不同程度的污染，同时，环境砷污染（砷矿的开采，用砷化合物做原料的企业排出的“三废”）也会污染食品。在各种食品中，发现海产品食品中砷含量高，但主要是低毒的有机砷，剧毒的无机砷含量较低。1适用范围适用于各类食品中总砷的测定。砷斑法其最低检出浓度：（测定用样品相当2g）为0.25 mg/kg2基本原理试样经消化后，以碘化钾、氯化亚锡将高价砷还原为三价砷，然后与锌粒和酸产生的新生态氢生成砷化氢气体，再与溴化汞试纸生成黄色至橙色的色斑，与标准砷斑比较定量。3试剂（1）硫酸（6+94）：量取6.0 mL硫酸，加于80 mL水中，冷却后再加水稀释至100 mL。（2）砷标准溶液：准确称取0.132 0 g在硫酸干燥器中干燥过的或在100干燥2h的三氧化二砷，加5 mL氢氧化钠溶液（200 g/L），溶解后加25 mL硫酸（6+94），移入1 000 mL容量瓶中，加新煮沸冷却的水稀释至刻度，贮存于棕色玻塞瓶中。此溶液每毫升相当于1.10 mg砷。（3）砷标准使用液：吸取 1.0 mL砷标准溶液，置于100 mL容量瓶中，加1 mL硫酸（6+94），加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1.0g砷。（4）溴化汞-乙醇溶液（50 g/L）：称取25 g溴化汞用少量乙醇溶解后，再定容至500 mL。（5）溴化汞试纸：将剪成直径2 cm的圆形滤纸片，在溴化汞乙醇溶液（50 g/L）中浸渍1h以上，保存于冰箱中，临用前取出置暗处阴干备用。 主要仪器测砷装置：见下图6-1。图6-1 测砷装置图1-锥形瓶；2-橡皮塞；3-测砷管；4-管口；5-玻璃帽 （1）100 mL锥形瓶, 橡皮塞：中间有一孔。（2）玻璃测砷管：全长18 cm，上粗下细，自管口向下至14cm一段的内径为6.5 mm，自此以下逐渐狭细，末端内径约为13 mm，近末端1 cm处有一孔，直径2 mm，狭细部分紧密插入橡皮塞中，使下部伸出至小孔恰在橡皮塞下面。上部较粗部分装放乙酸铅棉花，长56 cm，上端至管口处至少3 cm，测砷管顶端为圆形扁平的管口上面磨平，下面两侧各有一钩，为固定玻璃帽用。（3）玻璃帽：下面磨平，上面有弯月形凹槽，中央有圆孔，直径6.5mm。使用时将玻璃盖在测砷管的管口，使圆孔互相吻合，中间夹一溴化汞试纸光面向下，用橡皮圈或其他适宜的方法将玻璃帽与测砷管固定。5试样消化a.硝酸-高氯酸-硫酸法 粮食、粉丝、粉条、豆干制品、糕点、茶叶等及其他含水分少的固体食品：称取5.00g或10.00g的粉碎样品，置于250500 mL定氮瓶中，先加少许使湿润，加数粒玻璃珠、1015 mL硝酸-高氯酸混合液，放置片刻，小火缓缓加热，待做用缓和，放冷。沿瓶壁加入5 mL或10 mL硫酸，再加热，至瓶中液体开始变成棕色时，不断沿瓶壁滴加硝酸-高氯酸混合液至有机质分解完全。加大火力，至产生白烟，待瓶口白烟冒净后，瓶内液体再产生白烟为消化完全，该溶液应澄明无色或微带黄色，放冷。在操作过程中应注意防止爆沸或爆炸。 加20 mL水煮沸，除去残余的硝酸至产生白烟为止，如此处理两次，放冷。将冷后的溶液移入50 mL或100 mL容量瓶中，用水洗涤定氮瓶，洗液并入容量瓶中，放冷，加水至刻度，混匀。定容后的溶液每10 mL相当于1g样品，相当加入硫酸量1 mL。取与消化样品相同量的硝酸-高氯酸混合液和硫酸，按同一方法做试剂空白试验。 蔬菜、水果：称取25.00g或50.00g洗净打成匀浆的样品，置于250500 mL定氮瓶中，加数粒玻璃珠、1015 mL硝酸-高氯酸混合液，以下按上述自“放置片刻”起依法操作，但定容后的溶液每10 mL相当于5g样品，相当加入硫酸1 mL。 酱、酱油、醋、冷饮、豆腐、腐乳、酱腌菜等：称取10.00g或20.00g样品（或吸取10.0 mL或20.0 mL液体样品）置于250500 mL定氮瓶中，加数粒玻璃珠、515 mL硝酸-高氯酸混合液。以下按上述步骤自“放置片刻”起依法操作，但定容后的溶液每10 mL相当于2g或2 mL样品。 含乙醇饮料或含二氧化碳饮料：吸取10.00 mL或20.00 mL，置于250500 mL定氮瓶中。加数粒玻璃珠，先用小火加热除去乙醇或二氧化碳，再加510 mL硝酸-高氯酸混合液，混匀后，以下按上述自“放置片刻”起依法操作，但定容后的溶液每10 mL相当于2 mL样品。吸取510 mL水代替样品，加与消化样品相同量的硝酸-高氯酸混合液和硫酸，按相同操作方法做试剂空白试验。 含糖量高的食品：称取5.00g或10.0g样品，置于250500 mL定氮瓶中，先加少许水使湿润，加数粒玻璃珠、510 mL硝酸-高氯酸混合后，摇匀。缓缓加入5 mL或10 mL硫酸，待做用缓和停止起泡沫后，先用小火缓缓加热（糖分易炭化），不断沿瓶壁补加硝酸-高氯酸混合液，待泡沫全部消失后，再加大火力，至有机质分解完全，发生白烟，溶液应澄明无色或微带黄色，放冷。以下按上述步骤自“加20 mL水煮沸”起依法操作。 水产品：取可食部分样品捣成匀浆，称取5.00g或10.0g（海产藻类、贝类可适当减少取样量），置250500 mL定氮瓶中，加数粒玻璃珠，510 mL硝酸-高氯酸混合液，混匀后，以下按上述步骤自“沿瓶壁加入5 mL或10 mL硫酸”起依法操作。b. 硝酸-硫酸法以硝酸代替硝酸-高氯酸混合液进行操作。c.灰化法 粮食、茶叶及其他含水分少的食品：称取5.00g磨碎样品，置于运动坩埚中，加1g氧化镁及10 mL硝酸镁溶液，混匀，浸泡4h。于低温或置水浴锅上蒸干，用小火炭化至无烟后移入马弗炉中加热至550，灼热34h，冷却后取出。加5 mL水湿润后，用细玻棒搅拌，再用少量水洗下玻棒上附着的灰分至坩埚内。放水浴上蒸干后移入马弗炉550灰化2h，冷却后取出。加5 mL水湿润灰分，再慢慢加入10 mL盐酸（1+1），然后将溶液移入50 mL容量瓶中，坩埚用盐酸（1+1）洗涤3次，每次5 mL，再用水洗涤3次，每次5 mL，洗液均并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀。定容后的溶液每10 mL相当于1g样品，其加入盐酸量不少于（中和需要量除外）1.5 mL。全量供银盐法测定时，不必再加盐酸。按同一操作方法做试剂空白试验。 植物油：称取5.00g样品，置于50 mL瓷坩埚中，加10g硝酸镁，再在上面覆盖2g氧化镁，将坩埚置小火上加热，至刚冒烟，立即将坩埚取下，以防内容物溢出，待烟小后，再加热至炭化完全。将坩埚移至马弗炉中，550以下灼烧至灰分完全，冷后取出。加5 mL水湿润灰分，再缓缓加入15 mL盐酸（1+1），然后将溶液移入50 mL容量瓶中，坩埚用盐酸（1+1）洗涤5次，每次5 mL，洗液均并入容量瓶中，加盐酸（1+1）至刻度，混匀。定容后的溶液每10 mL相当于1g样品，相当于加入盐酸量（中和需要量除外）1.5 mL。按同一操作方法做试剂空白试验。 水产品：取可食部分样品捣成匀浆，称取5.00g置于坩埚中，加1g氧化镁及10 mL硝酸镁溶液，混匀，浸泡4h。以下按上述步骤自“于低温或置水浴锅上蒸干”起依法操作。6分析步骤吸取一定量同银盐法中试样消化后定容的溶液（相当于2g粮食，4g蔬菜、水果，4mL冷饮，5g植物油，其他试样参照此量）及同量的试剂空白液分别置于测砷瓶中，加5 mL碘化钾溶液（150 g/L）、5滴酸性氯化亚锡溶液及5 mL盐酸（样品如用硝酸-高氯酸-硫酸或硝酸-硫酸消化液，则要减去试样中硫酸毫升数；如用灰化法消化液，则要减去试样中盐酸毫升数），再加适量水至35 mL（植物油不再加水）。吸取0.0，0.5，1.0，2.0 mL砷标准使用液（相当0.0，0.5，1.0，2.0g砷），分别置于测砷瓶中，各加5 mL碘化钾溶液（150 g/L），5滴酸性氯化亚锡溶液及5 mL盐酸，各加水至35 mL（测定植物油时加水至60 mL）。于盛试样消化液，试剂空白液及砷标准溶液的测砷瓶中各加3g锌粒，立即塞上预先装有乙酸铅棉花及溴化汞试纸的测砷管，于25放置1h，取出试样及试剂空白的溴化汞试剂纸与标准砷斑比较。7结果计算式中X试样中砷的含量，mg/kg或mg/L；A1测定用试样消化液中砷的质量，g；A2试剂空白液中砷的质量，g；m试样质量（体积），g（mL）；V1试样消化液的总体积，mL；V2测定用试样消化液的体积，mL。计算结果保留两位有效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。8注意事项（1）H2S对本法有干扰，遇溴化汞试纸亦会产生色斑。乙酸铅棉花就松紧合适，能顺利透过气体又能除尽H2S。（2）锑、磷等都能使溴化汞试纸显色，鉴别方法是采用氨蒸黄色斑，如果先变黑再褪去为砷，不变时为磷，变黑时为锑。（3）同一批测定用的溴化汞试纸的纸质必须一致，否则因疏密不同而影响色斑深度。制做时应避免手接触到纸，晾干后贮于棕色试剂瓶内。二、食品中铅的测定（引用GB/T5009.122003）铅是一种有代表性的重金属和环境化学污染物，是一种具有蓄积性、多亲和性的毒物，对各器官、组织有毒性作用，主要损害神经系统、造血系统、消化系统和肾脏等免疫系统，降低免疫力。目前食品中铅的测定方法有石墨炉原子吸收光谱法、火焰原子吸收光谱法、双硫腙比色法、氢化物原子荧光光谱法、示波极谱法、电感耦合等离子体质谱法等。石墨炉原子吸收光谱法检出限为5 g/kg；氢化物原子荧光光谱法，固体试样检出限为5g/kg，液体试样检出限为1g /kg；火焰原子吸收光谱法检出限为0.1 mg/kg；比色法检出限为0.25 mgkg；单扫描极谱法检出限为0.085mg/kg。(一) 石墨炉原子吸收光谱法1适用范围食品中铅的测定2.基本原理试样经灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中，电热原子化后吸收283.3 nm共振线，在一定浓度范围，其吸收值与铅含量成正比，与标准系列比较定量。3. 试剂（1）硝酸，过硫酸铵，过氧化氢（30），高氯酸。皆为AR。（2）硝酸（1+1）：取50 mL硝酸慢慢加入50 mL水中。（3）硝酸（0.5 mol/L）：取3.2 mL硝酸加入50 mL水中，稀释至100 mL。（4）硝酸（l mo1L）：取6.4 mL硝酸加入50 mL水中，稀释至100 mL。（5）磷酸铵溶液（20 g/L）：称取2.0g磷酸铵，以水溶解稀释至100 mL。（6）混合酸：硝酸+高氯酸（4+1）。取4份硝酸与1份高氯酸混合。（7）铅标准储备液：准确称取1.000 g金属铅（99.99），分次加少量硝酸（1+1），加热溶解，总量不超过37 mL，移入1000 mL容量瓶，加水至刻度，混匀。此溶液每毫升含1.0 mg铅。（8）铅标准使用液：每次吸取铅标准储备液1.0 mL于100 mL容量瓶中，加硝酸（0.5 molL）或硝酸（l mo1L）至刻度。如此经多次稀释成每毫升含10.0，20.0，40.0，60.0，80.0 ng铅的标准使用液。4. 主要仪器所用玻璃仪器均需以硝酸（15）浸泡过夜, 用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗干净。 原子吸收分光光度计（附石墨炉及铅空心阴极灯）。 瓷坩埚，马弗炉，干燥恒温箱，可调式电热板、可调式电炉。（3）压力消解器、压力消解罐或压力溶弹。5. 分析步骤（1）试样预处理a. 在采样和制备过程中，应注意不使试样污染。b. 粮食、豆类去杂物后，磨碎，过20目筛，储于塑料瓶中，保存备用。c. 蔬菜、水果、鱼类、肉类及蛋类等水分含量高的鲜样，用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。(2）试样消解（可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解）a. 压力消解罐消解法：称取1.002.00 g试样（干样、含脂肪高的试样1.00 g, 鲜样2.0 g或按压力消解罐使用说明书称取试样）于聚四氟乙烯内罐，加硝酸24 mL浸泡过夜。再加过氧化氢（30）23 mL（总量不能超过罐容积的1/3）。盖好内盖，旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，120140保持34 h，在箱内自然冷却至室温，用滴管将消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）1025 mL容量瓶中，用水少量多次洗涤罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时做试剂空白。b.干法灰化：称取1.005.00 g（根据铅含量而定）试样于瓷坩埚中，先小火在可调式电热板上炭化至无烟，移入马弗炉500灰化68 h，冷却。若个别试样灰化不彻底，则加1 mL混合酸在可调式电炉上小火加热，反复多次直到消化完全，放冷，用硝酸（0.5 molL）将灰分溶解，用滴管将试样消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）1025 mL容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时做试剂空白。c. 过硫酸铵灰化法：称取1.005.00 g试样于瓷坩埚中，加24 mL硝酸浸泡1 h以上，先小火炭化，冷却后加2.003.00g过硫酸铵盖于上面，继续炭化至不冒烟，转入马弗炉，500恒温2 h, 再升至800，保持20 min，冷却，加23 mL硝酸（1.0mol/L），用滴管将试样消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）1025 mL容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时做试剂空白。d. 湿式消解法：称取试样1.005.00 g于锥形瓶或高脚烧杯中，放数粒玻璃珠，加10 mL混合酸，加盖浸泡过夜，加一小漏斗电炉上消解，若变棕黑色，再加混合酸，直至冒白烟，消化液呈无色透明或略带黄色，放冷用滴管将试样消化液洗入或过滤入（视消化后试样的盐分而定）1025 mL容量瓶中，用水少量多次洗涤锥形瓶或高脚烧杯，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时做试剂空白。(3）仪器条件：根据各自仪器性能调至最佳状态。引用条件为波长283.3 nm，狭缝0.2 1.0 nm，灯电流5 7 mA，干燥温度120，20 s；灰化温度450，持续1520 s，原子化温度：1 002 300，持续4 5 s，背景校正为氘灯或塞曼效应。（4）标准曲线绘制：吸取上面配制的铅标准使用液10.0、20.0、40.0、60.0、80.0 ng/mL（或gL）各10 L，注入石墨炉，测得其吸光值并求得吸光值与浓度关系的一元线性回归方程。（5）试样测定：分别吸取样液和试剂空白液各10 L，注入石墨炉，测得其吸光值，代入标准系列的一元线性回归方程中求得样液中铅含量。（6）基体改进剂的使用：对有干扰试样，则注入适量的基体改进剂磷酸二氢铵溶液（20 g/L）一般为5 L或与试样同量消除干扰。绘制铅标准曲线时也要加入与试样测定时等量的基体改进剂磷酸二氢铵溶液。6结果计算式中X-试样中铅含量，g/kg（gL）；c1-测定样液中铅含量，ngmL；c0-空白液中铅含量，ngmLV-试样消化液定量总体积，mL；m-试样质量或体积，g或mL。计算结果保留两位有效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20 。7.注意事项所用玻璃仪器均以硝酸（10%）浸泡24h以上，用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗晾干后，方可使用。（二）氢化物原子荧光光谱法1适用范围食品中铅的测定2.基本原理试样经酸热消化后，在酸性介质中，试样中的铅与硼氢化钠(NaBH4)或硼氢化钾(KBH4)反应生成挥发性铅的氢化物(PbH4)。以氩气为载气，将氢化物导入电热石英原子化器中原子化，在特制铅空心阴极灯照射下，基态铅原子被激发至高能态；在去活化回到基态时，发射出特征波长的荧光，其荧光强度与铅含量成正比，根据标准系列进行定量。3. 试剂（1）硝酸高氯酸(41)混合酸：分别量取硝酸400mL，高氯酸100mL，混匀。（2）盐酸溶液(11)：量取250mL盐酸倒入250mL水中，混匀。（3）草酸溶液(10gL)：称取1.0g草酸，加入溶解至100mL，混匀。（4）铁氰化钾K3Fe(CN)6溶液(100gL)：称取10.0g铁氰化钾，加水溶解并稀释至100 mL，混匀。（5）氢氧化钠溶液(2 gL)：称取2.0g氢氧化钠，溶于1 L水中，混匀。（6）硼氢化钠NaBH4溶液(10gL)：称取5.0g硼氢化钠溶于500 mL氢氧化钠溶液(2g/L)中，混匀，用前现配。（7）铅标准储备液(1.0mgmL)：由国家标准物质研究中心提供。（8）铅标准应用液(1.0 g/mL)：精确吸取铅标准储备液(1.0 mgmL)，逐级稀释至1.0g/mL。4. 主要仪器双道原于荧光光度计或同类仪器计算机系统及编码，铅空心阴极灯，电热板。5. 分析步骤（1）试样消化湿消解：称取固体试样0.202.00 g，液体试样2.0010.00 g(或mL)，置于50100 mL消化容器中(锥形瓶)，然后加入硝酸高氯酸(41)混合酸510 mL摇匀浸泡，放置过夜。次日置于电热板上加热消解，至消化液呈淡黄色或无色(如消解过程色泽较深，稍冷补加少量硝酸，继续消解)，稍冷加入20 mL水再继续加热赶酸，至消解液051.0 mL止，冷却后用少量水转入25 mL容量瓶中，并加入盐酸(11)0.5 mL，草酸溶液(10 gL)0.5 mL，摇匀，再加入铁氰化钾(100 gL)1.0 mL，用水准确稀释定容至25 mL，摇匀，放置30min后测定。同时做试剂空白。（2）标准系列制备取25 mL的容量瓶7个，依次准确加入铅标准应用液(1.00gmL)0.00、0.125、0.25、0.50、0.75、1.00、1.25mL(各相当于铅浓度0.0、5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0ng/mL)，用少量水稀释后，加入盐酸(11)0.5 mL草酸(10 gL)0.5 mL摇匀，再加入铁氰化钾溶液(100 g/L)1.0 mL，用水稀释至该度，摇匀。放置30min后待测。（3）仪器引用条件负高压：323 V；铅空心阴极灯灯电流：75 mA；原子化器：炉温750800，炉高：8 mm；氩气流速:载气800 mLmin； 屏蔽气：1 000 mLmin；加还原剂时间：7.0 s；读数时间：15 s；延迟时间：0.0s；测量方式：标准曲线法；读数方式：峰面积；进样体积：2.0 mL。（4）浓度测量方式设定好仪器的最佳条件，逐步将炉温升至所需温度，稳定1020min后开始测量，连续用标准系列的零管进样，待读数稳定之后，转入标准系列的测量，绘制标准曲线，转入试样测量，分别测定试样空白和试样消化液，每测不同的试样前都应清洗进样器。（5）仪器自动计算结果测量方式设定好仪器的最佳条件，在试样参数画面，输入以下参数：试样质量(g或mL)，稀释体积(mL)，并选择结果的浓度单位，逐步将炉温升至所需温度，稳定后测量，连续用标准系列的零管进样，待读数稳定后，转入标准系列测量，绘制标准曲线，在转入试样测量之前，先进入空白值测量状态，用试样空白消化液进样，让仪器取其均值做为扣除的空白值。随后即可依次测定试样溶液，测定完毕后，选择“打印报告”即可将测定结果自动打印。6结果计算：式中X-试样中的铅的含量，mg/Kg(或mgL)；c-试样消化液测定浓度，ng/mL；c0-试剂空白液测定浓度，ng/mL；m-试样质量(体积)，g(或mL)；V-试样消化液总体积，mL。计算结果保留三位有效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 。7注意事项所用玻璃仪器均以硝酸（10%）浸泡24h以上，用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗晾干后，方可使用。（三）火焰原子吸收光谱法1适用范围食品中铅的测定2. 基本原理试样经处理后，铅离子在一定pH条件下与DDTC形成络合物，经4-甲基戊酮-2萃取分离，导入原子吸收光谱仪中，火焰原子化后，吸收283.3nm共振线，其吸收量与铅含量成正比，与标准系列比较定量。3. 试剂（1）硝酸-高氯酸（41），溴百里酚蓝水溶液（1 gL），氨水（ll），4-甲基戊酮-2（MIBK）。（2）硫酸铵溶液（300gL）：称取30.0g硫酸铵（NH4）2SO4，用水溶解并加水至100 mL。（3）柠檬酸铵溶液（250g/L）：称取25.0g柠檬酸铵，用水溶解并加水至100mL。（4）二乙基二硫代氨基甲酸钠（DDTC）溶液（50gL）：称取5 g二乙基二硫代氨基甲酸钠，用水溶解并加水至100mL。（5）铅标准应用液(1.0 g/mL)：精确吸取铅标准储备液(1.0 mgmL)，逐级稀释至1.0g/mL。4. 主要仪器原子吸收分光光度计（附：火焰原子化器）5. 分析步骤（1） 试样处理a. 饮品及酒类：取均匀试样10.020.0 g于烧杯中，酒类应先在水浴上蒸去酒精，于电热板上先蒸发至一定体积后，加入硝酸一高氯酸（4l）消化完全后，转移、定容于50 mL容量瓶中。b. 包装材料浸泡液可直接吸取测定。c. 谷类：去除其中杂物及尘土，必要时除去外壳，碾碎，过20目筛，混匀。称取5.010.0g，置于50 mL瓷坩埚中，小火炭化，然后移入马弗炉中，500以下灰化16 h后，取出坩埚，放冷后再加少量混合酸，小火加热，不使干涸，必要时再加少许混合酸，如此反复处理，直至残渣中无炭粒，待坩埚稍冷，加10 mL盐酸（111），溶解残渣并移入50 mL容量瓶中，再用水反复洗涤坩埚，洗液并入容量瓶中，并稀释至刻度，混匀备用。取与试样相同量的混合酸和盐酸（111），按同一操作方法做试剂空白试验。d. 蔬菜、瓜果及豆类：取可食部分洗净晾干，充分切碎混匀。称取10.0020.00g置于瓷坩埚中，加1mL磷酸（110），小火炭化，以下按上述步骤c自“然后移入马弗炉中”起依法操作。e. 禽、蛋、水产及乳制品：取可食部分充分混匀。称取5.0010.00g置于瓷坩埚中，小火炭化，以下按上述步骤c自“然后移入马弗炉中”起依法操作。f. 乳类经混匀后，量取50mL，置于瓷坩埚中，加磷酸（110），在水浴上蒸干，再加小火炭化，以下按上述步骤c.自“然后移入马弗炉中”起依法操作。(2）萃取分离视试样情况，吸取25.050.0 mL上述制备的样液及试剂空白液，分别置于125 mL分液漏斗中，补加水至60mL。加2mL柠檬酸铵溶液，溴百里酚蓝指示剂35滴，用氨水（11）调pH至溶液由黄变蓝，加硫酸铵溶液 10.0mL，DDTC溶液10mL，摇匀。放置5min左右，加入10.0 mL MIBK，剧烈振摇提取1 min，静且分层后，弃去水层，将MIBK层放入10 mL带塞刻度管中，备用。分别吸取铅标准使用液0.00，0.25，0.50，1.00，1.50，2.00 mL（相当0.0，2.5，5.0，100，15.0，20.0g铅）于125 mL分液漏斗中，以下操作与试样相同。(3）测定饮品、酒类及包装材料浸泡液可经萃取直接进样测定。萃取液进样，可适当减小乙炔气的流量。仪器引用条件: 空心阴极灯电流8 mA; 共振线283.3 nm; 狭缝0.4 nm；空气流量8 Lmin；燃烧器高度6mm；BCD方式。6结果计算 式中X-试样中铅的含量，mgkg或mg/L；c1-测定用试样液中铅的含量，g/mL；c2-试剂空白液中铅的含量，g/mL；m-试样质量（体积），g（mL）；V1-试样萃取液体积，mL；V2-试样处理液的总体积，mL；V3-测定用试样处理液的总体积，mL。计算结果保留两位有效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20 。7.注意事项所用玻璃仪器均以硝酸（10%）浸泡24h以上，用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗晾干后，方可使用。(四) 双硫腙比色法1. 基本原理试样经消化后，在pH 8.59.0时，铅离子与双硫腙生成红色络合物，溶于三氯甲烷，加入柠檬酸铵，氰化钾和盐酸羟胺等，防止铁、铜、锌等离子干扰，与标准系列比较定量。 2.铅标准溶液的配备 （1）铅标准溶液：精密称取0.159 8克硝酸铅，加10mL硝酸（1+99），全部溶解后，移入100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于lmg铅。（2）铅标准使用液：吸取1.0mL铅标准溶液，置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于10.0g铅。 （3）其余同食品中锌的检测。3. 分析步骤（1）试样消化同食品中锌的检测。 （2)测定 吸取0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50mL铅标准使用液(相当于0、 1、2、3、4、5mg铅)分别置于125mL分液漏斗中，各加1硝酸溶液至20mL。于试样消化液，试剂空白液和铅标准液中各加2mL20柠檬酸铵溶液，lmL20盐酸羟胺溶液和2滴酚红指示液，用1:1氨水调至红色，再各加2mL10氰化钾溶液，混匀。各加5.0mL 硫腙使用液，剧烈振摇 1min，静置分层后，三氯甲烷层经脱脂棉滤人1cm比色杯中，以零点于波长5l0 nm处测吸光度，绘制标准曲线 。4计算 式中X-试样中铅的含量，mgkg或mgL； A1-测定用试样消化液中铅的含量，mg； A2-试剂空白液中铅的含量，mg； m-试样质量(体积)，mL； V1-试样消化液的总体积，mL； V2-测定用试样消化液体积，mL。5注意事项所用玻璃仪器均用l0%20硝酸浸泡24h以上，用自来水反复冲洗，最后用水冲洗干净。三 食品中铜的测定（引用GB/T 5009.13-2003）铜化合物广泛用于医药、杀菌，铜也用于电镀、颜料、印染等工业，再加上铜的开采冶炼，均给环境带来污染，海洋生物对铜有不同程度的蓄积能力。铜进入土壤后也能在土壤和植物中蓄积，以致影响做物的生长，铜为生命所必需的微量元素之一，对细胞生长、某些酶的活性及内分泌物等有重要做用。但过量的铜对人体有害。铜的测定方法有石墨炉原子吸收光谱法，火焰原子吸收光谱法 、合二乙基二硫代氨基甲酸钠比色法。（一）原子吸收光度法1适用范围适用于食品中铜的测定。火焰原子化最低检出浓度为1.0mg/kg；石墨炉原子化法最低检出浓度为0.1mg/kg。2. 基本原理试样经处理后，导入原子吸收分光光度计中，原子化以后，吸收324.8nm共振线，其吸收值与铜含量成比，与标准系列比较定量。3试剂 （1）硝酸（AR），石油醚(AR)，硝酸（1+4）,去离子水。（2）硝酸（10%）：取10mL硝酸置于适量水中，再稀释至100mL。（3）硝酸（0.5%）：取0.5mL硝酸置于适量水中，再稀释至100mL。（4）硝酸（4+6）：量取40mL硝酸置于适量水中，再稀释至100mL。（5）铜标准溶液：准确称取1.000 0g金属铜（99.99%），分次加入硝酸（4+6）溶解，总量不超过37mL，移入1 000mL容量瓶中，用水稀释至刻度。此溶液毫升相当于1.0mg铜。（6）铜标准使用液：吸取10.0mL铜标准溶液，置于100mL容量瓶中，用0.5%硝酸溶液稀释至刻度，摇匀，如此多次稀释至每毫升相当于0.10g铜。（7）铜标准使用液：按方式，稀释至每毫升相当于0.10g铜。4. 主要仪器（1）原子吸收分光光度计。（2）捣碎机，马弗炉。5分析步骤（1）试样处理a. 谷类（除去外壳），茶叶、咖啡等磨碎，过20目筛，混匀。蔬菜、水果等试样取可食部分，切碎、捣成匀浆。称取1.005.00g试样，置于石英或瓷坩埚中，加5mL硝酸，放置0.5h，小火蒸干，继续加热炭化，移入马弗炉中，50025灰化1h，取出放冷，再加1mL硝酸浸湿灰分，小火蒸干。再移入马弗炉中，500灰分0.5h，冷却后取出，以1mL硝酸（1+4）溶解4次，移入10.0mL容量瓶中，用水稀释至刻度，备用。取与消化试样相同量的硝酸，按同一方法做试剂空白试验。b. 水产类：取可食部分捣成匀浆。称取1.005.00g，以下按上述步骤a自“置于石英或瓷坩埚中”起依法操作。c. 乳、炼乳、乳粉：称取2.00g混匀试样，按上述步骤a自“置于石英或瓷坩埚中”起依法操作。d. 油脂类：称取2.00g混匀试样，固体油脂先加热融成液体，置于100mL分液漏斗中，加10mL石油醚，用硝酸（10%）提取2次，每次5mL，振摇1min，合并硝酸液于50mL 容量瓶中，加水稀释至刻，混匀，备用。并同时试剂空白试验。e. 饮料、酒、醋、酱油等液体试样，可直接取样测定，固形物较多时或仪器灵敏度不足时，可把上述试样浓缩按上述步骤a. 操作。（2）测定a. 吸取0.0，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL铜标准使用液（1.0g/mL），分别置于10mL容量瓶中，加硝酸（0.5%）稀释至刻度，混匀。容量瓶中每毫升分别相当于0.00，0.10，0.20，0.40 ，0.60，0.80，1.00g铜.将处理后的样液、试剂空白液和各容量瓶中铜标准液分别导入调至最佳条件火焰原子化器进行测定。引用条件：灯电流 36mA，波长324.8nm，光谱通带0.5nm，空气流量9L/min，乙炔流量2L/min，灯头高度6mm，氘灯背景校正。以铜标准溶液含量和对应吸收度，绘制标准曲线或计算直线回归方程，试样吸收值与曲线比较或代入方程求得含量。b. 吸取0.0，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL铜标准使用液（0.10g/mL），分别置于10mL容量瓶中，加硝酸（0.5%）稀释至刻度，混匀。将处理后的样液、试剂空白液和各容量瓶中铜标准液1020L分别导入调至最佳条件石墨炉原子化器进行测定。引用条件：灯电流36mA，波长324.8nm，光谱通带0.5nm，保护气体1.5L/min（原子化阶段停气）。操作参数：干燥90，20s；灰化，20s；升到 800，20s；原子化2 300，4s。以铜标准溶液系列含量和对应吸收度，绘制标准曲线或计算直线回归方程，样品吸收值与曲线比较或代入方程求得含量。c. 氯化钠或其他物质干扰时，可在进样前用硝酸铵（1mg/mL）或磷酸二氢铵稀释或进样后（石墨炉）再入与试样等量上述物质做为基体改进剂。6结果计算(1） 火焰法式中X试样中铜的含量，mg/kg或mg/L；A1测定用样品中铜的含量，g/mL；A2试剂空白液中铜的含量，g/mL；V1试样处理后的总体积，mL；m1样品质量（体积），g(mL)。 石墨炉法式中X样品中铜的含量，mg/kg或mg/L；A1测定用样品消化液中铜的含量，g；A2试剂空白液中铜的含量，g；m样品质量（体积），g(mL)；V1测定用样品消化液的体积，mL；V2样品消化液的总体积，mL。计算结果保留两位有效数字 ，试样含量超过10 mg/kg时保留三位有效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的107注意事项所用玻璃仪器均以硝酸（10%）浸泡24h以上，用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗晾干后，方可使用。（二）二乙基二硫代氨基甲酸钠法1. 适用范围本方法适用于食品中铜的测定。2. 基本原理试样经消化后，在碱性溶液中铜离子与二乙基二硫代氨基甲酸钠生成棕黄色络合物，溶于四氯化碳，与标准系列比较定量。3. 试剂（1）四氯化碳，氨水（1+1）,硝酸（3+8）：量取60 mL硝酸，加水稀释至160 mL。（2）柠檬酸铵-乙二胺四乙酸二钠溶液：称取20g柠檬酸铵及5g乙二胺四乙酸二钠溶于水中，加水稀释至100 mL。（3）硫酸（1+17）：量取20 mL硫酸，倒入300 mL水中，冷后再加水稀释至360 mL。(4）酚红指示液（1 g/L）：称取0.1 g酚红，用乙醇溶解至100 mL。(5）铜试剂溶液：二乙基二硫代氨基甲酸钠（C2H5）2NOS2Na3H2O溶液（1 g/L），必要时可过滤，贮存于冰箱中。（6）铜标准溶液及铜标准使用液：同原子吸收光谱法。4. 主要仪器分光光度计。5. 分析步骤（1）试样消化 同“总砷测定分析步骤的试样消解”（2）测定吸取定容后的10.0 mL溶液和同量的试剂空白液，分别置于125 mL分液漏斗中，加水稀释至20 mL。吸取0.00、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50 mL 铜标准使用液（相当0.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0 g铜），分别置于125 mL分液漏斗中，各加硫酸（1+17）至20 mL。于试样消化液、试剂空白液和铜标准液中，各加5 mL柠檬酸铵，乙二胺四乙酸二钠溶液和3滴酚红指示液，混匀，用氨水（1+1）调至红色。各加2 mL铜试剂溶液和10.0 mL四氯化碳，剧烈振摇2 min，静置分层后，四氯化碳层经脱脂棉滤入2 cm比色杯中，以四氯化碳调节零点，于波长440 nm处测吸光度，标准点吸光值减去零管吸光值后，绘制标准曲线或计算直线回归方程，样品吸光值与曲线比较，或代入方程求得含量。6结果计算 ：同石墨炉法。计算结果保留两位有效数字 ，试样含量超过10 mg/kg时保留三位有效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10。四、食品中镉的测定（引用GB/T 5009.152003）镉及化合物在工业上应用广泛，不可避免造成对食品的污染，镉在一般环境中含量很低，但通过食物链富集后达到相当高的浓度。镉是蓄积性的毒物，即使摄入很微量的镉，都会对肾脏产生危害，导致负钙平衡，引起骨质疏松症。目前，食品中镉的测定方法很多。比较普通应用的方法有石墨炉原子吸收光谱法、火焰原子吸收光谱法、镉试剂比色法、电感耦合等离子体光谱法和电感耦合等离子体质谱法等。其中石墨炉原子吸收光谱法是目前国际上通用的方法，该方法灵敏度高，试样前处理简单方便。火焰原子吸收光谱法、镉试剂比色法繁杂，试样分析周期长。电感耦合等离子体光谱法使用方便，但仪器昂贵，灵敏度不高，电感耦合等离子体质谱法是目前最灵敏的方法，但前处理要求严格，仪器昂贵。（一）石墨炉原子吸收光谱法1 .适用范围适用于各类食品中镉的测定方法。石墨炉原子化最低检出浓度法为0.1g/kg；火焰原子化法最低检出浓度为5.0g/kg。2 .基本原理试样经灰化或酸消解后，注入原子吸收分光光度计石墨炉中，电热原子化后吸收228.8nm共振线，在一定浓度范围，其吸收值与镉含量成正比，与标准系列比较定量。3试剂分析过程中全部用水均使用去离子水（电阻率在8105以上），所使用的化学试剂均为优级纯以上。（1）硝酸，硫酸，过氧化氢（30%），高氯酸。（2）硝酸（1+1）：取50 mL硝酸，慢慢加入50 mL水中。（3）硝酸（0.5 mol/L）：取3.2 mL硝酸，加入50 mL水中，稀释至100 mL。（4）盐酸（1+1）：取50 mL盐酸，慢慢加入50 mL水中。（5）磷酸铵溶液（20g/L）：称取2.0 g磷酸铵，以水溶解稀释至100 mL。（6）混合酸：硝酸+高氯酸（4+1）。取4份硝酸与1份高氯酸混合。（7）镉标准储备液：准确称取1.000g金属镉（99.99%），分次加20 mL盐酸（1+1）溶解，加2滴硝酸，移入1 000 mL容量瓶，加水至刻度。混均。此溶液每毫升含1.0 mg镉。（8）镉标准使用液：每次吸取镉标准储备液10.0 mL于100 mL容量瓶中，加硝酸（0.5 mol/L）至刻度。如此经多次稀释成每毫升含100.0 ng镉的标准使用液。4主要仪器（1）原子吸收分光光度计（附石墨炉及铅空心阴极灯）。（2）马弗炉, 恒温干燥箱,瓷坩埚,可调式电热板、可调式电炉。（3）压力消解器、压力消解罐或压力溶弹。（4）所用玻璃仪器均需以硝酸（1+5）浸泡过夜，用水反复冲洗，最后用去离子水冲洗干净。5分析步骤（1）试样预处理在采样和制备过程中，应注意不使试样污染。a. 粮食、豆类去杂质后，磨碎，过20目筛，储于塑料瓶中，保存备用。b.蔬菜、水果、鱼类、肉类及蛋类等水分含量高的鲜样用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。（2）试样消解（可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解）a. 压力消解罐消解法：称取1.002.00g试样（干样、含脂肪高的试样少于1.00g，鲜样少于2.0 g或按压力消解罐使用说明书称取试样）于聚四氟乙烯内罐，加硝酸24mL浸泡过夜。再加过氧化氢（30%）23 mL（总量不能超过罐容积的1/3）。盖好内盖，旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，120140保持34 h，在箱内自然冷却至室温，用滴管将消化液洗入或过滤入（视消化后样品的盐分而定）1025 mL容量瓶中，用水少量多次洗涤罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时做试剂空白。b. 干法灰化：称取1.005.00g（根据铅含量而定）试样于瓷坩埚中，先小火在可调式电热板上炭化至无烟，移入马弗炉500灰化68h时。冷却.若个别试样灰化不彻底,则加1 mL混合酸在可调式电炉上小火加热,反复多次直至消化完全，放冷，用硝酸(0.5 mol/L)将灰分溶解，用滴管将样品消化液洗入或过滤入(视消化后样品的盐分而定)1025 mL容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时做试剂空白。c. 过硫酸铵灰化法：称取1.005.00g试样于瓷坩埚中，加24 mL硝酸浸泡1h以上，先小火炭化，冷却后加2.003.00g过硫酸铵盖于上面，继续炭化至不冒烟，转入马弗炉，500恒温2h，再升至800，保持20 min，冷却，加23 mL硝酸（1.0 mol/L），用滴管将样品消化液洗入或过滤入（视消化后样品的盐分而定）1025 mL容量瓶中，用水少量多次洗涤瓷坩埚, 洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时做试剂空白。d. 湿式消解法：称取1.005.00g试样于三角瓶或高脚烧杯中，放数粒玻璃珠，加10 mL混合酸（或再加12 mL硝酸），加盖浸泡过夜，加一小漏斗电炉上消解，若变棕黑色，再加混合酸，直至冒白烟，消化液呈无色透明或略带黄色，放冷用滴管将样品消化液洗入或过滤入（视消化后样品的盐分而定）1025 mL容量瓶中，用水少量多次洗涤三角瓶或高脚烧杯，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时做试剂空白。(3）测定a. 仪器条件：根据各自仪器性能调至最佳状态。引用条件为波长228.8nm，狭缝0.51.0nm，灯电流810 mA，干燥温度120，20s；灰化温度350，1520s，原子化温度1 7002 300，45s，背景校正为氘灯或塞曼效应。b. 标准曲线绘制：吸取上面配制的镉标准使用液0.0、1.0、2.0、3.0、5.0、7.0、10.0 mL于100 mL容量瓶中稀释至刻度，相当于0.0、1.0、2.0、3.0、5.0、7.0、10.0 ng/mL，各吸取10L注入石墨炉，测得其吸光值并求得吸收值与浓度关系的一元线性回归方程。c. 试样测定：分别吸取样液和试剂空白液各10L注入石墨炉，测得其吸光值，代入标准系列的一元线性回归方程中求得样液中镉含量。d. 基体改进剂的使用：对有干扰样品试样，则注入适量的基体改进剂磷酸铵溶解（20 g/L）（一般为少于5 L）消除干扰。绘制镉标准曲线时也要加入与试样测定时等量的基体改进剂磷酸铵溶液。6结果计算 式中X1试样中镉含量，g/kg(g/L)；A1测定试样消化液中镉含量，ng/mL；A2空白液中镉含量，ng/mL；V1实际进样品试样消化液体积，mL；V2进样总体积，mL；V3试样消化液总体积，mL；m1试样质量或体积，g或mL。结果的表述：报告算术平均值的两位有效数字。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20。（二）火焰原子吸收光谱法（碘化钾-4-甲基戊酮-2法 ）1. 基本原理试样经处理后，在酸性溶液中镉离子与碘离子形成络合物，并经4-甲基戊酮-2萃取分离，导入原子吸收仪中，原子化以后，吸取228.8 nm共振线，其吸收量与镉含量成正比，与标准系列比较定量。2. 试剂要求使用去离子水，优级纯或分析纯试剂。（1）4-甲基戊酮-2（MIBK，又名甲基异丁酮），磷酸（1+10），硫酸（1+1）（2）盐酸（1+11）：量取10 mL盐酸，加到适量水中，再稀释至120 mL。（3）盐酸（5+7）：量取50 mL盐酸，加到适量水中，再稀释至120 mL。（4）混合酸：硝酸与高氯酸按3+1混合，碘化钾溶液（250 g/L）。（5）镉标准溶液：准确称取1.000 0g金属镉（99.99%），溶于20 mL盐酸（5+7）中，加入2滴硝酸后，移入1 000mL容量瓶中，以水稀释至刻度，混匀。贮于聚乙烯瓶中。此溶液每毫升相当于1.0 mg镉。（6）镉标准使用液：吸取10.0 mL镉标准溶液，置于100 mL容量瓶中，以盐酸（1+11）稀释至刻度。混匀。如此多次稀释至每毫升相当于0.20 g镉。3. 仪器原子吸收分光光度计。4. 分析步骤（1）试样处理a. 谷类：去除其中杂物及尘土，必要时除去外壳，磨碎，过40目筛，混匀。称