马铃薯黄萎病室内抗性鉴定规程

ICS点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号DB15内蒙古自治区地方标准DB 15/ XXXXXXXXX马铃薯黄萎病室内抗性鉴定技术规程Technical Regulation for Indoor Resistant Identification to Potato Verticillium Wilt点击此处添加与国际标准一致性程度的标识XXXX - XX - XX发布XXXX - XX - XX实施内蒙古自治区市场监督管理局发布DB15/ XXXXXXXXX前言本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准由内蒙古农业大学提出。本标准由内蒙古自治区农牧厅归口。本标准起草单位：内蒙古农业大学。本标准主要起草人：王东、周洪友、赵君、孟焕文、张笑宇、张键、马平、张力群、李社增4马铃薯黄萎病室内抗性鉴定技术规程1 范围本标准规定了室内条件下马铃薯抗黄萎病的鉴定技术规程。本标准适用于马铃薯品种（系）在室内条件下对黄萎病抗性水平的鉴定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T 2952-2016 棉花黄萎病抗性鉴定技术规程。3 材料准备3.1 培养基制备PDA培养基：马铃薯200 g、葡萄糖20 g、琼脂粉18 g，定容至1000 mL；121 高压湿热灭菌25 min，冷却至室温备用。麦麸培养基：将麦麸与水按质量比1：1搅拌均匀后，装入1000 mL三角瓶中，每瓶装入100 g；121高压湿热灭菌30 min，冷却至室温备用。3.2 供试菌株供试黄萎病菌：选用内蒙古马铃薯主栽区发病植株上分离获得的致病菌株。菌株活化及培养：将保存的黄萎病菌菌株置于PDA平板进行活化。25条件下，培养5 d7 d后，待菌丝长到培养皿的3/4 时，用打孔器在菌落边缘打取直径 5 mm的菌饼，接入灭菌的麦麸培养基中，黑暗条件下培养15 d。3.3 对照品种选择抗病对照品种选择克新1号，感病对照品种选择费乌瑞它。4 鉴定方法4.1 接种液制备向长满黄萎病菌的麦麸培养物中加入无菌水，经4层纱布过滤获得孢子悬浮液。在显微镜下通过血球计数板计数，并孢子悬浮液的浓度调至107个孢子/mL。4.2 接种方法将种薯进行育苗，当幼苗长到24片真叶时，将幼苗取出并轻微伤根，采用蘸根法将幼苗浸入接种液15 min；将幼苗移栽至装有灭菌土的花盆，放置于25、16 h光照/8 h黑暗条件下进行培养20 d。4.3 病情调查记录室内马铃薯植株的地上部黄萎病发病情况并进行分级，分级标准参见附录A，计算发病率和病情指数发病率=（发病总株数/调查总株数）100%；病情指数DI=（各级病株数该病级代表数值）/（调查总株数最高级代表数值）100。5 品种抗性水平划分依据各品种的病情指数对不同来源品种抗性级别进行划分，划分标准如下表：马铃薯对黄萎病抗性分级标准抗病型病情指数DI免疫 Immune0高抗 High Resistant0DI10.0抗病 Resistant10.0DI20.0耐病 Tolerant20.0DI35.0感病 SensitiveDI35.0AA附录A （规范性附录）马铃薯黄萎病发病程度分级标准根据马铃薯的发病程度，分为0、1、2、3、4级共5个级别，其分级标准如下：0级：健株，叶片无症状； 1级：病株叶片25%以下出现症状，叶肉变为淡黄色或呈不规则形的黄色病斑；2级：病株叶片25%50%表现症状，病斑颜色大部分变成