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文档简介
.,1,课标领航通过本节的学习,我能够1了解有关培养基的基础知识。2知道消毒与灭菌的区别。3了解培养基的配制过程及培养基的配制原则。,.,2,情景导引在江河湖海、土壤大气、动植物的体内体表,微生物无处不在。它们的分离、培养都必须使用无菌的培养基。什么是培养基?如何配制培养基?,.,3,三星学科,教师助手,学生帮手,家长朋友!,.,4,微生物培养基的配制1培养基(1)概念:为人工培养微生物而制备的,提供适合微生物生长、_或积累_的营养基质。,基础自主梳理,繁殖,代谢产物,.,5,(2)种类按化学成分可分为_、合成培养基和半合成培养基。按物理状态可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。按功能可分为基础培养基、_和鉴别培养基。,天然培养基,选择培养基,.,6,(3)营养成分:各种培养基的配方不同,但一般都含有水、_、_和_等最基本的生命物质。,碳源,氮源,无机盐,.,7,思考感悟1为什么各种培养基的具体配方不同,但一般都有水、无机盐、碳源、氮源和生长因子?【提示】这是因为微生物的化学组成与其他生物大体相同,也是主要由C、H、O、N、P、S等大量元素和Fe、Mn、Cu、Zn、Mo、Co等微量元素组成,这些元素最终来自于外界环境中各种有机物和无机物,可归纳为碳源(主要提供C元素)、氮源(主要提供N元素)、水(提供H、O)、无机盐(提供大量元素和微量元素)、生长因子(提供生物生长必不可少的微量有机物)五大类营养。,.,8,2消毒与灭菌,温和,病毒微生物,营养细胞,强烈,.,9,巴氏,干热,湿热,.,10,思考感悟2高温灭菌是利用高温的致死作用,使微生物的蛋白质和核酸等重要的生物大分子发生不可逆转的变性,你知道高温破坏的是蛋白质的哪一结构吗?【提示】高温使蛋白质内部的氢键断裂,从而破坏其空间结构,但并不破坏肽键。,.,11,3培养基的配制过程(1)配制过程配制培养液_分装包扎_。,调节pH,灭菌,搁置斜面,.,12,(2)几种天然有机营养物质的主要成分,水溶性糖类,有机氮化合物,维生素B类,.,13,核心要点突破,1营养要素微生物的化学组成与其他生物大体相同,也是由C、H、O、N、P、S等元素组成,其中C、H、O、N占细胞干重的90%以上,这些元素主要来自外界环境中的各种无机化合物和有机化合物。这些化合物归纳成碳源、氮源、生长因子、无机盐和水这五大类营养要素。,培养基中各营养要素的作用及配制原则,.,14,.,15,.,16,特别提醒对异养微生物来说,含C、N的化合物既是碳源,也是氮源,即有些化合物作为营养要素成分时并不是单一方面的作用。有些微生物需添加特殊营养物质,原因是它们自身缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。,.,17,2配制原则(1)目的要明确(根据微生物的种类、培养目的等),如培养基可由简单的无机物组成,生产用培养基内可加入化学成分不明确的天然物质,而分类、鉴定用培养基内必须加入已知化学成分的物质。(2)营养要协调:注意各种营养物质的浓度和比例。(3)pH要适宜:各种微生物适宜生长的pH范围不同,如细菌、放线菌和真菌的最适pH分别为:6.57.5、7.58.5和5.06.0。,.,18,(2011年淮安高二检测)分析有关微生物的资料,回答问题。(1)1982年澳大利亚学者从胃活检组织中分离出幽门螺杆菌。幽门螺杆菌的遗传物质集中分布的区域称为_。(2)如图4支试管分别代表4种微生物在半固体培养基(琼脂含量3.5/L)中的生长状态,其中号试管代表幽门螺杆菌的生长状态,由图判断,该菌在_条件下不能生长。,.,19,(3)下表是某培养基的配方。,.,20,将幽门螺杆菌接种到pH适宜的该培养基中,置于37下培养一段时间后,在该培养基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时_,主要原因是_。,.,21,(4)幽门螺杆菌形态如图所示,该菌在人体中可引起胃溃疡等胃部疾病。幽门螺杆菌生长的最适pH为67,人体胃腔内pH在12之间,但胃黏膜的黏液层靠近上皮细胞侧pH为7.4左右。若幽门螺杆菌随食物进入胃腔,结合其结构特点以及能导致胃溃疡的特性,推测该菌在胃内如何存活?_。,.,22,【思路点拨】本题主要考查微生物培养的相关知识,解答本题应明确以下几点:了解幽门螺杆菌的生活习性。了解培养基的营养成分组成。区别原核生物和真核生物。,.,23,【尝试解答】(1)拟核(核区)(2)氧气浓度过高或过低(3)少缺少氮源(缺少氮源和生长因子)(4)幽门螺杆菌进入胃腔后,首先依靠鞭毛运动至pH较高处缓冲,然后分泌蛋白中和胃酸,提高pH,以便继续生存和繁殖。,.,24,【解析】(1)幽门螺杆菌为原核生物,没有核膜包围的细胞核,遗传物质集中在拟核内。(2)幽门螺杆菌生活在半固体培养基的中部,说明它不能生活在氧气浓度过高或过低的地方。(3)培养基中缺乏氮源,幽门螺杆菌不能正常生活,数量会减少。(4)幽门螺杆菌进入胃腔后,可以先依靠鞭毛运动至pH较高处缓冲,然后分泌蛋白中和胃酸,提高pH,以便继续生存和繁殖。,.,25,跟踪训练甲、乙、丙是三种微生物,下表、是用来培养微生物的三种培养基。甲、乙、丙都能在中正常生长繁殖;甲能在中正常生长繁殖,乙和丙都不能;乙能在中正常生长繁殖,甲、丙都不能。下列说法正确的是(),.,26,.,27,A甲、乙、丙都是异养微生物B甲、乙都是自养微生物,丙是异养微生物C甲是固氮微生物,乙是自养微生物,丙是异养微生物D甲是异养微生物,乙是固氮微生物,丙是自养微生物解析:选C。培养基的特点是缺氮,能在这样的培养基上存活的只能是固氮微生物;培养基的特点是没有有机碳源,是培养自养微生物的培养基;培养基是适宜异养微生物生长的培养基。,.,28,培养基的种类和用途,.,29,.,30,.,31,.,32,根据各类微生物的形态结构特点和新陈代谢类型,利用选择培养基和鉴别培养基,结合显微镜镜检,以及菌落特征,可以把混杂在一起的大肠杆菌、硝化细菌、乳酸细菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤,请根据各个步骤的条件,填写空格中的内容:首先配制一系列不同性质的固体培养基,然后进行高温灭菌。再将上述微生物的混合液分别接种到各种培养基上培养。,.,33,(1)用无氮培养基可筛选出_。(2)用不含有机碳源的选择性培养基可筛选出_。(3)酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加入_。(4)用加了较高浓度NaCl的培养基可选择出_,或者根据菌落的颜色呈现_色,将其挑取单独培养。,.,34,(5)利用伊红美蓝培养基培养混合菌,菌落呈_色并带有金属光泽的是_,挑取该菌落单独培养。结合显微镜镜检和进一步用伊红美蓝培养基鉴别来确定。(6)在无氧环境下培养混合菌,_可以生长。加入一定浓度的乳酸,使培养基pH充分降低,可抑制_微生物的生长,利用菌落特征,结合显微镜镜检,选取生长优势的菌落,即可分离出_。,.,35,【尝试解答】(1)圆褐固氮菌(2)硝化细菌(3)青霉素(4)金黄色葡萄球菌桔红(金黄)(5)绿大肠杆菌(6)大肠杆菌、乳酸细菌、酵母菌大肠杆菌和酵母菌乳酸细菌,.,36,【解析】若培养基中无氮,则凡是不能自生固氮的微生物均不能生存,题中所列微生物中,只有圆褐固氮菌能固氮,因而无氮培养基可选出该菌;若用不含有机碳的培养基则可选出自养型微生物;真菌的筛选可在培养基中加入青霉素;高浓度NaCl可选出耐盐微生物,如金黄色葡萄球菌;用伊红美蓝培养基可鉴定大肠杆菌;在无氧环境中,厌氧型及兼性厌氧型微生物才能生长,需氧型微生物将被抑制。,.,37,【规律方法】判定培养基的类型及培养微生物的生活方式的方法:培养基中是否含有有机物:若有,则培养的微生物为异养型微生物;若无,则培养的微生物为自养型微生物。是否含有琼脂:若有,则该培养基为固体培养基。,.,38,是否含有一些特殊物质:若含有青霉素、高浓度盐等,用于抑制不需要的微生物的生长,而促进所需微生物的生长的培养基为选择培养基;若含有伊红美蓝等,用于区分不同微生物种类的培养基为鉴别培养基。,.,39,跟踪训练在培养微生物的培养基中加入某些物质能分离出所需的微生物。下列选项中,前者是在培养基中加入的物质,后者是能被分离出的微生物,其中正确的是()A氢氧化钠,酵母菌B盐酸,放线菌C适量的青霉素,霉菌D适量的伊红美蓝,大肠杆菌,.,40,解析:选C。氢氧化钠、盐酸为强碱、强酸,酵母菌和放线菌都不能生存,加入伊红美蓝的培养基是用来鉴定大肠杆菌,并不能分离大肠杆菌。适量的青霉素对原核生物有抑制作用,对真核生物的生命活动并不影响。,.,41,1概念:无菌技术不仅能防止实验室的培养物被其他外来微生物污染,保持微生物的纯培养,而且在分离、转接时亦能防止其他微生物污染。获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵,无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开,主要包括以下几个方面:,无菌技术,.,42,(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒。双手用肥皂洗净,擦干后用75%酒精消毒。(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。培养基用高压蒸气灭菌。接种环用火焰灼烧来灭菌。(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在酒精灯火焰附近进行。(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。,.,43,2灭菌与消毒(1)几种常用灭菌方法的比较,.,44,(2)消毒属于部分灭菌。常用的消毒方法有:煮沸消毒法和化学消毒法。,.,45,细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽灭菌锅、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌()A接种环、手、培养基B高压锅、手、接种环C培养基、手、接种环D接种环、手、高压锅【尝试解答】C,.,46,【解析】此题考查学生对无菌技术的掌握。高压蒸汽灭菌锅是灭菌的一个设备,通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧可以迅速彻底地灭菌,适用于微生物的接种工具,如接种环。,.,47,跟踪训练下列操作错误的是()A用酒精擦拭双手B用氯气消毒水源C实验室用紫外线进行消毒D玻璃器皿(吸管、培养皿)用酒精直接擦拭即可达到彻底灭菌的目的解析:选D。玻璃器皿、金属用具等耐高温、需要保持干燥的物品,应采用干热灭菌法进行灭菌,而用酒精直接擦拭达不到彻底灭菌的目的。,.,48,实验探究创新,细菌培养基的配制【操作与实践】,.,49,【问题与探究】1培养基灭菌后,需要冷却到50左右时,才能用来搁置斜面或倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?提示:琼脂的凝固点为40,温度太高易使培养皿破裂,低于40,培养基已凝固,倒不出,所以培养基灭菌后
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