气质联用法测定食品中N_二甲基亚硝胺含量.docx

气质联用法测定食品中 N - 二甲基亚硝胺含量翁其香(国家加工食品质量监督检验中心 ,福州350002 )摘 要 :用二氯甲烷对各类食品中的 N - 二甲基亚硝胺进行提取 ,利用气质联用仪采用选择离子法 ( S IM )进行定性定量检测 。本检测方法前处理简单快捷 ,易于操作 ,线性相关系数可达 0. 9999; 线性范围宽 ,可达 0 - 500ug /m l; 方 法重现性良好 ,其 R SD 仅 0. 92% ;回收率可达 70 %以上 ,其 R SD 为 0. 43% ; 灵敏度高 ,检测限小于 1 ng /m l,满足食 品中 N - 二甲基亚硝胺的残留含量的测定要求 。关键词 : N - 二甲基亚硝胺 ;气质联用 ;选择离子法中图分类号 : O657. 63 文献标识码 : A 文章编号 : 1009 - 8143 ( 2007 ) 04 - 0018 - 02D e term ina t ion of the con ten t of N - D im e thy l n itro sam in eby Ga s C hrom a togra phy - m a ss Spec trom e tryW en g Q ix ian g( Ch ina N a tiona l Q ua lity Sup e rvision and Te sting Cen te r fo r P roce ssed Food , fuzhou, 350002, Ch ina)A b stra c t:N - d im e thyl n itro sam ine in food wa s extrac ted by D ich lo rom e thane and de te rm ined by S IM w ith ga s ch rom a togra2p hy - m a ss sp ec trom e try. Samp le p rep a ra tion is simp le, rap id and ea sy to op e ra te. The line r range wa s be tween 0 - 500g /m l, the rep roduc ib ility wa s good and the R SD on ly 0. 92% . The ave rage recove rie s we re above 70% and the ir R SD wa s0. 43 %. The de tec tion lim it of the in strum en t wa s 0. 8 ng /m l and the de tec tion lim it of the mo thod wa s 0. 04 ng / g.Key word s:N - D im e thyl n itro sam ine ; ga s ch rom a tograp hy - m a ss sp ec trom e try; S IM啤酒 、肉制品及鱼类腌制品等食品中均含有 N- 二甲基亚硝胺 ,它有一定的急性毒性 ,主要引起肝 坏死出血 ,其致癌性更为人们所关注 。在食品中天 然存在的 N - 亚硝基化合物的含量极微 ,但其前体物亚硝盐及仲胺等广泛存在于自然界 ,在适宜条件下 ,可形成亚硝胺或亚硝酰胺 。我国已对啤酒 、肉制 品提出 N - 亚 硝 基 限 量 标 准 , 在 GB / T 5009. 26 -2003中也给出了食品中 N - 亚硝胺类的测定方法 ,但是该方法 1中采用气相色谱 - 热能分析仪检测 ,虽然检测灵敏度高 ,但是仪器检测面窄 ,不适合推广 检测 ;方法 2中采用蒸馏法前处理复杂 ,耗时长 。目前还见有报道用 GC /N PD ,以及 SPM E - GC /M S等 方法检测的 ,但是一般都前处理复杂或成本高 。试 验证明 ,采用本法前处理简单 ,耗时少 ,溶剂可以回收重复利用 ,成本低 ,检测限能满足定量要求 。我国从 2006年开始取消了对发酵酒中 N - 二甲基亚硝 胺的限量要求 ,但是增加对咸鱼制品中 N - 二甲基 亚硝胺的限量要求 , 而且限量很低 , 不得超过 4 ug /kg。所以建立高灵敏度 ,低检测限的快速检测方法是很有必要的 。1 试验部分1. 1 试剂 无水乙醇 (AR ) 、二氯甲烷 (AR ) 、氯化钠 (AR ) 、无水硫酸钠 (AR ) ; 标准品 : N - 二甲基亚硝 胺标准品 (日本东京化成 )1. 2 仪器设备 GC /M S气相色谱 - 质谱联用仪 , 美 国安捷伦 agilen t GC6890N /M SD5973N; 色谱 柱 : H P- INNOWAX, 30m 0. 32mm 0. 25m ( mode lnum be r: agilen t 19091N - 113 )1. 3 实验方法1. 3. 1 GC /M S条件GC条件 : 柱温 : 50 100 ( 12m in ) , po st temp:200 ( 3m in) ;进样口温度 :230 ; in te rface 温 度 : 250 ; 载 气 : H e; 流 速 :2m l /m in;进样模式 :分流进样 ;分流比 : 50 1; 进样 量 : 1 u lM S 条 件 : 离 子 源 温 度 : 230 ; 四 极 杆 温 度 :150 ;电离电压 : 70 ev; 发射电压 : 2000; SCAN: 质量 数扫描范围 : 2 - 150; 采样频率 : 3; 溶剂延迟 : 4m in;收稿日期 : 2006 - 7 - 10作者简介 :翁其香 ( 1972) ,男 ,助理研究员 ,从事化学分析工作 。 E - m a il: wengqx 126. com192006, 15 ( 4)翁其香 :气质联用法测定食品中 N - 二甲基亚硝胺含量阈值 : 0; S IM :特征碎片峰 : 42、43、741. 3. 2 标准溶液制备 :N - 二甲基亚硝胺标准使用液制备 : 准确称取 N - 二甲基亚硝胺标准品 0. 05 g (精确到 0. 0001 g) 用无水乙醇定容至 100m l, 得 N - 二甲基亚硝胺储备液 ,浓度 500g /m l。1. 3. 3 样品溶液制备 :1. 3. 3. 1 固体样品溶液制备 :准确称取已粉碎并混 匀的样品 20 g,加入适量的无水硫酸钠混匀 ,用二氯甲烷超声提取三次 , 每次 30m l。合并有机溶剂相 ,经无水硫酸钠过滤脱水后 ,在 40 水浴下抽真空浓 缩 ,定容至 1. 0m l,备用 。1. 3. 3. 2 液体样品溶液的制备 :准确称取液体样品20 g于 250m l分液漏斗中 ,加入 10 g氯化钠 ,振摇使 氯化钠溶解 , 加入二氯甲烷 30m l和无水乙醇 5m l,振摇 5m in,静置分层 , 分出有机相 。水相用二氯甲 烷 30m l再提取 2次 ,合并有机溶剂相 。有机相经无 水硫酸钠过滤脱水后 , 在 40 水浴下抽真空浓缩 ,定容至 1. 0m l,备用 。1. 3. 4 计算公式 : 样品中 N - 二甲基亚硝胺含量 X按以下公式计算 :式中 A标 为 标 样 中 N - 二 甲 基 亚 硝 胺 的 峰 面积 ; C标 为标样中 N - 二甲基亚硝胺的浓度 ,g /m l;A样 为样品测试液中 N - 二 甲基 亚 硝胺 的峰 面 积 ; M样 为样 品 的 重 量 , g V样 为 样 品 测 试 液 的 定 容 体 积 , m l;数值保留至小数点后 2 位 。2 方法验证和结果2. 1 定性和定量2. 1. 1 定性 : 采用保留时间和 M S / SCAN 方法来定 性2. 1. 2 定量 :标样和样品溶液同时上机测定 ,分别进样 1l。利用选择特征离子 m / z ( 42、43、74 ) , 采 用外标法进行定量计算 。样品中 N - 二甲基亚硝胺含量 X按以下公式计 算 : A样 C样X,g / kg (或 g / l)=M 样A1000标V样式中 A标 为 标 样 中 N - 二 甲 基 亚 硝 胺 的 峰 面积 ; C标 为标样中 N - 二甲基亚硝胺的浓度 ,g /m l; A样 为样品测试液中 N - 二 甲基 亚 硝胺 的峰 面 积 ; M样 为样 品的 重 量 , g; V样 为样 品 测试 液 的 定 容 体积 , m l;其标样和样品的总离子流 ( T IC )图如下 :A样 C样X, ug / kg (或 ug / l)=M样A标 1000V样标样的 T IC图样品的 T IC图配制 N - 二 甲 基 亚 硝 胺 0、1、5、10、50、100、500g /m l标准溶液系列 ,进样 1l,结果如下 :2. 2 方法验证2. 2. 1 线性范围浓度 (g /m l)m / z74的峰面积线性方程线性系数 r01510501000142870561427173431132916Y = 1419. 1X0. 9999 500 711119 (下转第 23页 )232006, 15 ( 4)陈信悦等 :电位滴定测定石油产品中硫醇硫DL77 ) 滴定仪进行检验 ,不仅可以检验上述馏分燃料中硫醇硫 ,还对汽油机油 、基础油中的硫醇硫检测 有所探索 ,成熟的方法储存在内存卡软件包中 ,可以一的时间就可粗略估计真实值 ,重复性好 , (详见表5 ) 为进出口石油产品的检验提供了更好的科学技 术依据 。准确快速 ,仅用相当于GB / T1792 - 88 方法四分之表 4:几种石油产品中硫醇硫的含量重量 g 硫醇硫10 - 6 (m /m )R SD % 样品n5W - 30 Mo to r O il1. 5 - 57848. 22. 02150SN 基础油5 - 50613. 91. 61航空煤油1. 2 - 501111. 18. 41无铅汽油5 - 50810. 27. 12石脑油1. 2 - 50820. 012. 25 S . 北京 :中国标准出版社 , 1988. 2 廖克俭等 . 石油化工 分析 M . 北京 : 化学 工业出版社 ,2005: 248249.参考 文 献 1 GB / T1792 - 88 ,馏分燃料中硫醇硫测定法 (电位滴定法 )(上接第 19页 )2. 2. 2 回收率 :取未检出 N - 二甲基亚硝胺的固体样品 20 g, 4份 ,分别加入 5g /m l的 N - 二甲基亚硝胺标准溶液1m l,混匀阴干后 , 进行回收实验 , 经上述方法提取 后 ,样品最后定容 1m l。结果如下 :基亚硝胺的仪器检测限为 5 n g /m l 3 = 0. 8 ng /m l17. 9以 20 g称 样 量 , 最 后 定 容 体 积 为 1m l, 进 样 量1l (同标样 )计 ,本方法的检测限为 :5 ng /m l 3 1 = 0. 04 ng / g样品峰面积回收率 %R SD %17. 9 203 结论综述采用 这 个 方 法 , 前 处 理 简 单 快 速 , 重 现 性 的R SD %小于 1 % ,回收率大于 70 % ,线性范围在 0 -500g /m l之间 ,仪器检测限为 0. 8 ng /m l,方法检测 限为 0. 04 ng / g。可以用于各类食品 (包括啤酒 、酱 油 、香肠 、鱼丸等 )中 N - 二甲基亚硝胺的测定 。1#2#3#4#5g /m l标样4150413541104144575372. 1471. 8871. 4472. 03/0. 432. 2. 3 重现性 :取 5g /m l的 N - 二甲基亚硝胺标准溶液连续 进样 4次 ,结果如下 :参 考 文 献 1 段发淼 ,陈恺玲 ,骆和东等 . 啤酒 、酱油 、香肠中 N - 亚硝 胺化合物含量的调查分析 J . 现代预防医学 , 2001, 28( 1 ) : 27 - 28. 2 GB /