RNA检测技术在生殖道病原体诊断中的应用(检验科201X0721)ppt课件

.,1,上海仁度生物科技有限公司ShanghaiRenDuBiotechnologyCo.,Ltd.,RNA检测在生殖道病原体实验室诊断中的应用,.,2,常见生殖道病原体及危害,生殖支原体(MG),沙眼衣原体(CT),解脲脲原体(UU),淋病奈瑟菌（NG）,.,3,沙眼衣原体(CT)80%的女性和50%男性感染人群无临床症状感染人群中无临床症状淋病奈瑟菌(NG)50%的女性和10%的男性无临床症状解脲脲原体(UU)75%的成人无临床症状，在孕妇中无症状比例达到80%生殖支原体（MG）50%以上感染人群无明显临床症状,ClinicalEffectivenessGuidelinefortheManagementofChlamydiatrachomatisGenitalTractInfection.2001叶顺章.性传播疾病的实验室诊断.第二版.102,沉默的杀手,European(IUSTI/WHO)GuidelineontheDiagnosisandTreatmentofGonorrhoeainAdults.2009,.,4,欧美国家指南中建议筛查CT/NG,CT/NG,所有妊娠女性在第一次产检时都要进行CT/NG检查，并需在孕晚期进行复查。,CDCGrandRounds:TheGrowingThreatofMultidrug-ResistantGonorrhea。USACDC2013GuidelinesfortheLaboratoryDiagnosisofMycoplasmagenitaliumInfectionsinEastEuropeanCountries,2010ScreeningforChlamydiaandGonorrhea:U.S.PreventiveServicesTaskForceRecommendationStatement.2014,美国2014年预防服务工作组(USPSTF),美国疾控(USCDC)2010版性病诊疗指南,CT/NG,建议所有育龄人群中进行CT/NG检查。,英国2013版国家临床最优化研究所(NICE)指南,建议所有育龄人群中进行CT检查。,CT,.,5,Preventionofinfectionafterinducedabortion.ReleasedateOctober2010.SFPGuideline20102,美国计划生育学会（SFP）人工流产后预防感染指南,人工流产手术患者应在术前接受预防性抗生素治疗，从而降低其术后生殖道感染的风险。对拟行人工流产手术患者，推荐术前进行沙眼衣原体和淋病奈瑟菌的筛查，对于检测阳性患者依照规范治疗后再施行手术。,欧美国家指南中建议筛查CT/NG,CT/NG,.,6,孕前和孕期保健指南2011.中华医学会妇产科分会产科学组,黏液脓性宫颈炎的诊断和治疗.2012.中华医学会妇产科分会感染协作组,我国指南关于CT/NG的检查建议,.,7,生殖道病原体实验室检测方法,.,8,常用CT/NG/UU/MG检测方法比较,.,9,国外诊疗指南推荐使用分子检测法诊断生殖道病原体,CT/NG,美国疾控2014版CT/NG实验室诊断指南,RecommendationsfortheLaboratory-BasedDetectionofChlamydiatrachomatisandNeisseriagonorrhoeae.USACDC.March2014.Unemoetal.Laboratorydiagnosisofsexuallytransmittedinfections,includinghumanimmunodeficiencyvirus,WHO,2013,WHO2013版性传播疾病实验室诊断方法,.,10,WHO性传播疾病实验室诊断指南,Unemoetal.Laboratorydiagnosisofsexuallytransmitted。a.infections,includinghumanimmunodeficiencyvirus,WHO,2013,WHO明确指出核酸检测法（NAAT）是诊断MG的唯一可行方法;通过RNA检测技术检测生殖支原体比PCR方法要更准确。,WHO推荐用RNA技术检测MG,.,11,RNA用于临床检验的优势,灵敏度高，不易漏检：RNA拷贝数DNA拷贝数（e.g，16srRNA104copy/cell）与临床相关性好，可以区分“死菌”“活菌”：病原体死亡，RNA很快降解，可进行疗效评估和辅助判愈，减少无效治疗，比如抗生素滥用。无创取样：尿液检测，显著降低病人的采样痛苦和检测依从性。不易误检：靶标和扩增产物都是RNA，不易污染，不易出现假阳性。,.,12,RNA检测技术,NASBA（Biomerieux）(NAsequencebasedamplification)TMA（Gen-probe）(TranscriptionMediatedAmplification)SAT（上海仁度)（SimultaneousAmplificationandTesting),.,13,SAT技术,.,14,SAT与PCR技术原理比较,.,15,中国诊疗指南推荐用SAT诊断生殖道病原体,梅毒、淋病、生殖器疱疹、生殖道沙眼衣原体感染诊疗指南。中国疾控中心、中华医学会皮肤性病学分会性病学组。2014。,中国2014版梅毒、淋病、生殖器疱疹、生殖道沙眼衣原体感染诊疗指南,.,16,CT/NG/UU/MG-SAT是国内唯一获得CFDA认证的RNA检测试剂,.,17,SAT扩增曲线图（ABI7500）,以CT-SAT为例,.,18,SAT技术可实现尿液检测,样本类型：宫颈拭子、尿液,金华中心医院,浙大医学院附属妇产科医院,临床结果显示拭子和尿液标本检测阳性率基本一致。,郑雅萍袁青陈伟,实时核酸恒温扩增技术在奈瑟菌感染检测中的应用,浙江实用医学,2015年01期,沙眼衣原体,淋病奈瑟菌,.,19,SAT技术具有高灵敏度，高特异性,.,20,男科多种样本类型检测（课题）,仁度CT/NG/UU/MGRNA检测试剂用于精液检测,采用SAT技术对438例男性精液标本进行CT/NG/UU/MG检测,结论：1、SAT技术可对精浆标本进行CT/NG/UU/MG检测。2、与医院传统检测方法相比，传统检测方法阳性标本，SAT检测均为阳性；同时SAT还比传统方法多检出阳性标本。,.,21,仁度UU/MGRNA检测试剂用于尿液和前列腺液检测（同一患者同时采集尿液和前列腺液）,表199例患者两种样本类型UU检测结果,表299例患者两种样本类型MG检测结果,结论：前列腺液检测阳性样本，尿液检测均为阳性！SAT可应用于前列腺液和尿液的检测！,.,22,操作简单-小批量样本检测,样本,磁珠法提取核酸,恒温扩增检测,结果报告,.,23,操作简单-大批量样本检测,.,24,适用范围广-多种检测机型,.,25,CT/NG/UU/MG-SAT产品特点,.,26,CT/NG/UU/MG-SAT项目开展相关参数,.,27,一般分子实验室需增加的配套设备,小批量样本操作,磁珠分离器,电动吸引器,连续加样枪,大批量样本操作,全自动核酸提取仪,0.2mL金属浴（96孔）,.,28,SAT生殖道检测产品已在多家医院使用,.,29,小结,取样方便、自动化操作、准确性高是病原体分子诊断