欧盟蜂蜜标准及分析方法介绍.doc

欧盟蜂蜜标准及分析方法介绍养蜂科技2OO4年第1期欧盟蜂蜜标准及分析方法介绍欧洲蜂蜜协会欧洲就已过时的蜂蜜分析方法及标准进行了修改,1990年专门成立了一个协会来进行这项工作,1995年在劳山的埃皮莫迪召开了一个由l3个国家的28位专家参加的会议.本文所述的分析方法,除一些常规的老方法外,还增添了一些新的内容,其中大多数方法已通过了德国标准学院DIN的标准鉴定程序.一,试验方法的精确性本文所述的数据来源于以下三点:1)运用源于DIN方法的ISO5725标准2)按照英国合作研究机构的ISO标准3)采用欧洲蜂协会规定的统计方法ISO标准在数据上存在一些缺陷,最近介绍的方法对这些不足处作了改进,改进后的新方法已普遍被采纳.为了更准确地得到数据,新方法采用了三个参数:平均值,取值范围,r和R.用这三个参数来衡量数据的准确性,其中r表示同一实验进行两次以上的平行实验取得的数据的精确性.R表示同一实验分两次以上独立完成(即重复实验)取得数据的精确性.如果r和R测试在规定范围,表示测试有效,即有效性达95%以上,这就意味着每进行2o次测试,只有一次产生误差.我们把R叫做变化系数(即RSD%),它是通过统计各个实验室进行的重复实验产生的误差得来,经常用来作为评价实验方法可行性的参数.RSDR%的计算是100/x2.8.一般来说,随着测量次数的增加,RSD%的指数会下降,一般在分析主要成分含量为0.1一lOg/100g时,变化系数会在O.1一lO%之间.RSD%的值越大,此分析方法的可行性就越小.比较测试方法是否可行,就要在研究中估算出每种方法RSD%的极值.见表l:二,方法及构成标准:在现有条件下,采用的蜂蜜测试方法(见表1)除了一些显为人知的方法外,又有了一些新方法,它们都可对蜂蜜质量做出评估,除此之外还有一些方法也能用来测定蜂蜜质量,但未能人本文,如同位素测定蜜中掺的糖.我们建议修改欧盟法典中的某些标准规定的一些成分含量标准的方法很多,例如还原糖含量,蔗糖,灰分和酸度的测定.发达国家更普遍采用如个别糖分析,导电性和转化酶等的检测,从而获得更具代表性的一些特征数据.我们提出的标准,是建立在常规蜂蜜分析法上的,其中包括一些国家现行的如转化E,脯氨酸等的测定,这些方法都可用做蜂蜜质量检测.(具体见表2)l,水分含量蜂蜜的含水量是决定蜂蜜保质期的主要因素:含水量越高,蜂蜜越易变质,越不耐贮存,用CarlFischer法测定含水量比用折射仪测定更准确,但用折射仪检测具有简单易操作的优点,故到目前为止,这种方法还在采用,也没必要改动,因为其RSD%值仅为O.82%.虽然有些国家建议修改较低的水份限度(19%),但作为商品蜜,只有低水分才能更好地保证蜂蜜的货架期.2,导电率这种测定法与蜂蜜中所含的电解质有关,所含离子越多,导电性越强,这是一个快速简便的方法,也无需使用昂贵的仪器,而其RSD%值的范围在3_4%之间,人们发现这个值比用灰分法产生的值更低.导电率还是衡量蜂蜜来源(即蜂蜜是由花蜜酿制还是由甘露酿制)的一个标准,人们认为由花蜜酿制的蜂蜜比甘露蜜导电率低(表2),但由花蜜转变的蜂蜜也有例外,如杨梅,熏衣草,桉树等的蜜,其导电率表现出极大的变化(见表2)3,灰分含量这种方法可能会被更便捷的导电测量法取2OO4年第1期养蜂科技4l代(见上面),灰分含量的测定是检测蜂蜜来源的一种标准检测法,由花蜜酿制的蜂蜜比甘露蜜灰分含量低.在所做的试验中,其RSD%值变化范围在4_ll%之间.4,PH值和酸度人们建议采用终点滴定法和等点滴定法这两种方法来测定PH值和酸度,但这两种酸度滴定法有一个缺点:由于滴定时产生氢离子,其滴定终点不好测定.理论上讲,等点滴定法是测定蜂蜜酸度较好的一种方法,它适用于所有蜂蜜酸度的测定.大多数国家采用的是终点滴定法,而法国则采用配有自动滴定器的等点滴定法.以上两种方法效果都不好,其RSD%值都很高,其中终点滴定法为1l一22%,等点滴定法为1-28%.这说明各实验室之间重复实验的检测差异很大,能否用这两种方法来检测蜂蜜质量,令人怀疑.欧洲蜂协提议蜂蜜酸度不高于50mg当量每公斤,将50作为最高值,其实我们清楚这意味着上述方法的精确度是很低的.5,羟甲基糠醛(HMF)决定HMF值有三种方法(即white法,眦法,winkle法),欧洲蜂协用了这三种方法检测蜂蜜,其结果见下表(表中单位为mg/kg).这三种方法差别很小,在评估蜜质上其作用相差不大,评估时几乎产生相同的结果,这三种方法从平行实验(r)及重复实验(R)的结果看,white法和HPLC法比winkle法好.经过多次重复测试,以上三种方法测定的HMF值都是可靠的.食品法典中规定蜂蜜的HMF值不高于80mg/kg,欧盟规定为40mg/kg,目前这种分歧还没有解决.样While法HPLC法Winkle法品xrRxrRxrR13.80.92.35.20.41.67.51.13.2222.31.23.922.81.24.922.51.77.6342.12.24.442.32.17.342.92.59.56,淀粉酶用分光光度计法测得的酶值和用光度计法测得的吸光率之间有着密切的关系,通过测吸光率,用相应的公式都可计算出酶值,但这两种方法的RSD值都在10%以上.这就是说酶促法比化学法精确度低得多,就分光光度计法和光度计法比较而言,光度计法更为准确,分光光度计法的RSD值几乎是光度计法的两倍.有人认为这是因为光度计法使用了规定的酶促反应的底物,而分光光度计法使用的是商业淀粉作为酶促反应的底物的缘故,商业淀粉质量不稳定影响了分光光度计法的精确性.食品法典中提出三个淀粉酶值的最小值,据说这是不同种类蜂蜜中淀粉酶活性不同的原因.欧洲蜂协提出八个淀粉酶值的极限,认为这样才能满足大多数包装商品蜜的淀粉酶值,以确保大多数种类蜂蜜中的淀粉酶在常温下的活性.7,蔗糖酶由于蔗糖酶在受热或贮存时间长的情况下易被破坏,因此许多国家如德国,意大利,瑞典等国都采用了测蔗糖酶作为确定蜂蜜是否新鲜的标志.与测淀粉酶相比,测蔗糖酶的RSD值小得多.欧洲蜂协对加工蜜和新鲜蜜提出了蔗糖酶的最低酶值.8,糖8.1一般方法还原糖和蔗糖含量是通过古老的裴林氏法来测定的,这种方法测量还原糖还可以,但在测量蔗糖时的精确度则不令人满意.因为它用总糖量减去还原糖来确定蔗糖含量,无意中把非还原糖类都包括了进来.8.2特定方法采用色谱法可测定果糖,葡萄糖,蔗糖的含量,用HPLC色谱法和用GC色谱法对四种蜂蜜进行含糖量测定的结果表明:离子色谱法和气相色谱法产生的结果是一致的.我们建议蜂蜜质量要包括:1)葡萄糖和果糖含量.2)蔗糖含量.还有一些诸如异麦芽糖等在进行特定分析时也很重要,也可采用色谱法进行分析,采用特定的标准来决定.除了测量低含量的蔗糖外,色谱法取得的RSDR值都低于10%,而用ttPLC法进行的重复42养蜂科技2OO4年第1期表l蜂蜜分析方法:精确性比较方法,项目RSDRok最小值一最大值l折射仪测水份1.一2.52导电率3.44.43灰分含量4.313.24终点滴定法滴定(至PH为8.3)酸度lO.322.O5等点滴定法滴定的酸度8.746.86用HPLC法测m值6.110.97用珊法测m值3.722.O8用rIl(1e法测m值7.915.2?.甩忿,雀摩计(1一aTI即hm科目cells)20.526.1法测淀粉酶lO光度计(pIlm0|net叮)法测淀粉酶l1.O一17.9ll表还原糖(印partreducingg)末测表蔗糖(喇Itcm自e)l2用HPIA2法测含糖量果糖1.5一1.9葡萄糖1.63.2蔗糖l1.4l3GC法测含糖量果糖3.98.6葡萄糖2.67.5蔗糖7.214HPLC法电脉冲检测含糖量果糖6.O一7.4葡萄糖7.37.8蔗糖6.8一l2.5l5不溶物26.584.4l6转化酶2.79.6l7脯氨酸2.33.4l8旋光性末测实验结果表明其差异性最小.9,不溶物测量不溶物是检测蜂蜜杂质含量的重要方法,这一项测量,重复实验的差异性很大(变化系数在26%一85%之间).lO,脯氨酸测量脯氨酸是衡量蜂蜜成熟度的一个标准.在一些情况下,测脯氨酸含量还可确定蜂蜜是否掺糖,这也是检测掺糖的一种很好的方法.不同种类的蜜,脯氨酸含量不同.德国规表2蜂蜜质量标准质量标准欧洲标准建议标准水分含量一般2lg,100g相同石楠.三叶草23g,100g还原糖含量蜂蜜>/65g,100g相同甘露蜜或混入甘露蜜的蜂蜜60g/100g/>45g,100g果糖和葡萄糖总含量蜂蜜60g/100g甘露蜜或混入甘露蜜的蜂蜜40g/100g蔗糖含量一般5g,100g相同甘露蜜或混入甘露蜜的蜂蜜10g/100gl5g,100g洋槐,柑橘等lOg,100g相同不溶物一般O.1g/100g相同浓缩蜜O.5g,100g相同矿物质含量一般O.6g,100g相同甘露蜜lg/100g1.2g/100g有机酸含量(rIlIkg)4O5o淀粉酶值一般8相同天然低酶蜜(如柠檬)和HMF含量不超过15mg/kg的蜜3天然低酶含量的蜜(如柠檬)3HMF含量(Hkg)4olrlg,kg相同导电率(naTI)一般O.7甘露蜜和混入甘露蜜的蜂蜜及栗子蜜/>0.7椴树,石楠,杨梅,桉树等蜜O.2-一1.8新鲜蜜的标准转化酶一般5o低酶蜜20杨梅蜜,洋槐蜜,石楠蜜lO2O04年第1期养蜂科技43定脯氨酸含量少于180mg/kg的蜜为不成熟蜜或掺假蜜.ll,旋光性意大利用旋光法来区别蜂蜜和甘露蜜,这个方法很有效,但现在还未被普遍采用.l2,公式通常,使用方法的副标题是遵循ISO公式的,只在个别情况下会被省略.l3,取样蜜样是随机取的,在分析前对蜜样要用网眼直径为0.5mm的不锈钢筛过滤.13.1不合杂质的液态或结晶蜜的处理充分搅拌(至少3分钟),调匀样蜜,注意尽量不要把空气搅入蜜中,(特别是当样蜜是用来测定羟甲基糠醛时).在作这样的处理时要防止温度超过4o.l3.2含杂质的液态或结晶蜜的处理去除粗糙的可见物,然后在室温下用网眼直径为0.5mm的不锈钢筛过滤,通常结晶蜜要用一个小刮勺轻压才能过滤.在作这样的处理时也要注意温度不能高于4OcI=l4,巢蜜巢蜜要先去盖,用网眼直径为0.5mm的不锈钢筛在不加热的条件下过滤分离.(吴世宗龚薇杨建存译)作者通联:(65o212)云南农业职业技术学院第七届国际蜂疗大会暨蜂产品保健博览会(IAHBVII)延期至6月283O日举行1991年以来,国际蜂疗保健研究会(IAH.BA)先后在中国,日本,韩国和马来西亚举办了六届国际蜂疗大会暨蜂产品保健博览会.IAHBVl原订于2O04年3月810日在成都一乐山举行,各国应征论文和报名参会参展代表踊跃.为避开病毒病高发期,经组织委员会决定延期至6月28日一30日召开,原会址,议程不变.征文,征展截止日期顺延至2004年4月30日.IAHB秘书处将于5月下旬向论文作者,报名参会参展者发出邀请和报到通知.应征论文打印稿,全文一式三份和800个汉字以内的文摘,附软盘和第一作者本人2寸半身边照片2张.论文文摘将译成3种外文,收编入英,汉,日,韩四文对照的会刊中.每篇论文翻译费25美元或200元人民币.凡采用蜜蜂及其产品为主要原料的蜂疗药品,保健品,食品,美容化妆品,日常生活用品,蜂疗保健和蜂针疗法器材,设备,书刊,影片,光碟等均可申报参展和参评.博览会分项设立金奖,银奖,铜奖三种.会议注册费每位代表130美元或1066元人民币(需在2004年4月30日前汇付);5月1日后缴纳者为150美元或1230元人民币.博览会展位租金300美元或246O元人民币.本届新增国际知名保健蜂疗家评选活动,申评