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G实验培训课件,市场部,主要内容,适用的科室,1,3-D葡聚糖简介,葡聚糖广泛存在于真菌细胞壁中，1,3-D-葡聚糖占真菌壁成分50%以上，是真菌细胞壁上的特有成分，或称为真菌的分子标志物。,在浅部真菌感染中，1,3-D葡聚糖未被释放出来，故其在体液中的量不增高，因此能区分定植和感染。在念珠菌和曲霉菌细胞壁中含量较多，对G试验灵敏。,真菌1,3-D葡聚糖检测原理,1,3-D葡聚糖检测试剂盒-1M,试剂盒组成反应主剂A0.2mL样品处理液B0.9mL稳定性/储存方法36个月有效期2-8贮存产品规格20人份/盒,1,3-D葡聚糖检测试剂盒-5M,试剂盒组成反应主剂A0.6mL样品处理液B0.9mL反应主剂溶解液C0.6mL稳定性/储存方法36个月有效期2-8贮存产品规格50人份/盒,实验所需要的耗材-1M,无热原吸头：规格：200ul/支数量：200支/包1000ul/支数量：100支/包存储条件：室温4-25保存无热原平底试管（玻璃）规格：9x65mm数量：50支/盒存储条件：室温4-25保存,实验所需要的耗材-5M,无热原吸头：规格：200ul/支数量：96支/盒1000ul/支数量：100支/包存储条件：室温4-25保存无热原平底试管（塑料）数量：50支/盒存储条件：室温4-25保存,实验所需要的耗材,无热原真空采血管规格：4ml/支数量：50/100支/装存储条件：室温4-25保存无热原转移管（用于转移存储标本）规格：3ml/支数量：10支/盒存储条件：室温4-25保存,标本采集和保存,检测标本血清(脑脊液、肺泡灌洗液、细胞培养液等需自设参考值）采集要求无菌操作使专用的无热原真空采血管常规病人早上用药治疗前空腹采血/取样（血透患者透析前采血），建议及时送检。标本保存样本采集后应在3000r/min进行离心10min，若不能及时检测，全血离心后可在2-8保存24h；血清转移至无热原转移管内，在-20冷冻保存，可保存一周。,特殊标本黄疸、溶血、乳糜标本会影响实验结果，建议重新采血。对一般黄疸、溶血、脂肪血标本，可稀释2倍后进行检测，结果仅供参考。单支稀释步骤为：取50l血清标本加入到样品处理液中，经过70干热并冷却后，即得稀释2倍的待测标本（如需其他稀释倍数则按相应的比例进行），然后取200l加入到反应主剂，溶解后全部转移至无热原平底试管中，插入仪器进行检测，注意需在检测软件中“稀释倍数”一栏填上稀释倍数，仪器会自动按照相应的稀释倍数计算结果。,大装量稀释步骤为：取50L血清标本加入到样品处理液中，经过70干热并冷却后，即得稀释2倍的待测标本（如需其他稀释倍数则按相应的比例进行），取稀释后的样品处理液100L，加入到平底试管中，称其为待测样品试管，取溶解好的反应主剂100L，加入待测样品试管，插入仪器进行检测，注意需在检测软件中“稀释倍数”一栏填上稀释倍数，仪器会自动按照相应的稀释倍数计算结果。,操作步骤-1M,1.打开MB-80检测系统主机、恒温仪预热30min。2.打开MB-80系统软件，录入病人信息、样品种类及检测项目等信息。3.点击采集，使系统处于采集状态。4.取血清标本100L，加入样品处理液中，摇匀，插入恒温仪加热区70干热10min。5.干热结束后，转移至冷却区冷却5min。6.取上述处理液200L加入反应主剂中，混匀，全量转移至无热原平底试管中，立即插入MB-80检测系统中检测。7.反应结束，仪器自动计算结果并保存。,检测流程图-1M,操作步骤-5M,1.打开MB-80检测系统主机、恒温仪预热30min。2.打开MB-80系统软件，录入病人信息、样品种类及检测项目等信息。3.点击采集,使系统处于采集状态。4.取血清标本100L，加入样品处理液中，摇匀，放入恒温仪加热区70干热10min。5.干热结束后，转移至冷却区冷却5min。,6.取上述前处理液100L加入无热原平底试管中，取主剂溶解液0.6mL溶解反应主剂，混匀，然后再加入0.1mL反应主剂溶液到无热原平底试管中，混匀，插入MB-80检测系统。7.反应结束后仪器自动计算结果并保存。,检测流程图-5M,注意事项-1M,1.预热采集在进行试验之前，仪器一定要提前预热30min，达到工作温度后，按要求填写表头信息，完毕后点击采集，使仪器处于采集状态后再进行试验。2.样本预处理血液标本3000r/min离心10min。离心后取血清上层样本。70加热时间严格控制在10min。样本处理液加热冷却后，不要震荡以免将处理过的下层干扰物质悬浮上来。,取处理液的上层清液。加入主剂的200L液体要全部转移至平底试管，转移过程中不能出现气泡。平底试管要一次插到底，插入后不要再碰触。,注意事项-5M,1.预热采集在进行试验之前，仪器一定要提前预热30min，达到工作温度后，按要求填写表头信息，完毕后点击采集，使仪器处于采集状态后再进行试验。2.样本预处理血液标本3000r/min离心10min。离心后取血清上层样本。70加热时间严格控制在10min。样本处理液加热冷却后，不要震荡以免将处理过的下层干扰物质悬浮上来。,取处理液的上层清液。平底试管要一次插到底，插入后不要再碰触。先将冷却后的样品加入平底试管，再溶解主剂，溶解后，加入平底试管，顺序不要颠倒。,结果判断,真菌1,3-D葡聚糖检测检测值60pg/mL,阴性。检测值介于60-100pg/mL之间，临床观察期，建议动态采血检测。检测值100pg/mL，阳性，结合临床症状综合诊断。,真菌1,3-D葡聚糖检测影响因素,假阳性因素污染（试管、枪头和蒸馏水被环境中细菌或真菌污染）应用含有葡聚糖的纤维素膜进行血液和腹膜透析患者手术中使用的纱布或其他医疗物品中含有葡聚糖静脉制剂（白蛋白、凝血因子、免疫球蛋白等）某些细菌败血病患者（尤其是链球菌败血症）抗肿瘤类药物（香菇多糖、裂殖菌多糖）磺胺类、阿莫西林/克拉维酸、头孢类药物、多粘菌素、厄他培南蘑菇类食物新生儿足