GP73与肝癌关系的研究进展PPT课件.pptVIP

GP73与肝癌关系的研究进展,1,肝癌现状,原发性肝癌（hepatocellularcarcinoma，HCC是世界范围最常见的恶性肿瘤之一。我国是全球肝癌发病率最高的国家，每年发病患者数占全球约55%。肝癌患者早期无明显症状一旦出现症状就诊，往往已属于中晚期，失去了有效的治疗时机，因此其早期诊断就显得尤为重要。中华人民共和国卫生部.原发性肝癌诊疗规范(2011年版)J.临床肝胆病杂志,2011,27(11):1141-1159.,2,肝癌现状,2012中国肿瘤登记年报,肝癌的发病率仅次于肺癌和胃癌，居第三位。其死亡率仅次于肺癌。,3,4,超声检查放射性核素肝扫描CT检查选择性腹腔动脉或肝动脉造影检查X线检查磁共振成像（MRI）肝穿刺行针吸细胞学检查剖腹探查,B,4,肝癌肿瘤标志物,甲胎蛋白（AFP）高尔基体糖蛋白73（golgiprotein-73，GP73），磷脂酰基醇蛋白聚糖-3（glypican-3，GPC3），鳞状细胞癌抗原免疫球蛋白复合物（Squamouscellcarcinomaantigen，SCCA），-L岩藻糖苷酶（alphalfucosidase，AFU）等。LiX,WuK,FanD.Serumgolgiphosphoprotein2level:abettermarkerthanalpha-fetoproteinfordiagnosingearlyhepatocellularcarcinomaJ.Hepatology,2009,50(5):1682.,5,甲胎蛋白（AFP）概述,1956年发现，60年代末应用于临床，是目前全世界应用最广泛的肝癌肿瘤标志物。正常情况下，来自胚胎的肝细胞和卵黄囊，胎儿出生约两周后甲胎蛋白从血液中消失。正常人血清中甲胎蛋白的含量尚不到20ug/L。当肝细胞癌变时，低甲基化作用会使AFP的基因表达开放，AFP表现为表达增加。原发性肝癌诊疗规范（2011版）：对于AFP400g/L超过1个月，或200g/L持续2个月，排除妊娠、生殖腺胚胎癌和活动性肝病，应该高度怀疑肝癌DebruyneEN,DelangheJR.Diagnosingandmonitoringhepatocellularcarcinomawithalpha-fetoprotein:newaspectsandapplicationsJ.ClinChinActa,2008,395(1-2),19-26.,6,甲胎蛋白（AFP）,2个问题假阴性，当AFP基因表达调控停止在转录后翻译前时，AFP的表达量会降低，就会出现假阴性，并且当肝癌较小时，AFP的表达量低于检测的最低限，易出现假阴性；而当肝癌过大时,AFP表达延迟或者表达量超过检测的最高限，HCC患者也可呈现AFP阴性。假阳性，AFP不仅在HCC患者中会升高，在慢性肝炎、肝硬化、胃癌、胚胎癌及其他肿瘤患者中都常有一过性AFP增高。,7,甲胎蛋白（AFP）,近年来有报道指出,诊断原发性肝癌,敏感性为39-64%,特异性为76-91%,对早期肝癌具有9-32%阳性预测值。有近1/3的HCC患者AFP为阴性（敏感性不足），同时20-50%的慢性肝炎、肝硬化也合成AFP（特异性不足）,这给HCC的诊断带来了困难。,特异性不足,20-50%的慢性肝炎、肝硬化也合成AFP,2010版美国肝病研究学会(AASLD)指南已不再将AFP作为筛查指标。但我国的HCC大多与HBV感染相关，与西方国家HCC致病因素不同（多为HCV、酒精和代谢性因素），结合国内随机研究(RCT)结果和实际情况，目前对HCC的常规监测筛查指标中继续保留AFP。,8,GP73的概述,又称高尔基体II型跨膜蛋白，分子量73KD，恒定表达于正常肝脏的胆管上皮细胞，肝实质细胞很少或不表达从GP73的结构来看，GP73是一个岩藻糖基化蛋白，而已经有大量的报道显示岩藻糖基化与HCC的发生密切相关。2000年，Kladney等首次从巨细胞肝炎肝组织内克隆GP73。,9,GP73作为肝癌诊断标志物的价值,机制：在正常肝脏组织，GP73主要表达于汇管区的胆管上皮细胞，在肝细胞则无表达或表达很少。但在肝脏疾病中，其在肝细胞及血清中的含量上调，在肝炎中上调水平低，在肝癌中上调水平高。经研究，这些高表达的GP73主要来自于肝细胞，而胆管细胞表达GP73则改变不明显。HuL,LiL,XieH,etal.TheGolgilocalizationofGOLPH2(GP73/GOLM1)isdeterminedbythetransmembraneandcytoplamicsequencesJ.PLoSOne,2011,6(11):e28207.,10,GP73作为肝癌诊断标志物的价值,2005年，Block等用乙型肝炎病毒感染土拨鼠，建立土拨鼠肝癌模型，运用糖蛋白组学手段检测了GP73在肝癌组和正常组血清中的表达情况，结果发现在肝癌组血清中GP73明显增高。赵秀英等对372例样本进行研究，其中健康组43例，肝炎肝硬化组110例，肝癌组219例。健康组GP73表达量为22.1ng/mL，肝炎肝硬化组GP73表达量为81.4ng/mL，肝癌组GP73表达量为271.5ng/mL，GP73的表达在肝癌组明显高于健康组及肝炎肝硬化组。GP73可以作为肝癌早期的诊断标志物。,11,GP73作为肝癌诊断标志物的价值,近年来许多研究者都用实验证明了GP73对于肝癌的早期诊断具有较高的敏感性与特异性，GP73敏感性范围为69%83%，特异性范围为73%97%。,12,GP73作为肝癌诊断标志物的价值,研究还发现，GP73表达水平的提高可能还与肿瘤的侵犯转移密切相关。Sun等用免疫组化的方法发现，肝癌组织中GP73的表达与血管侵犯、肿瘤分化等密切相关，提示GP73能增强肿瘤的浸润和转移。研究还发现GP73对于肝癌的术后预测预后也有一定的价值。据资料显示，GP73在HCC患者术后一周内维持在一定水平，但术后1.52年下降明显，低于肝癌组，略高于正常组。,13,GP73与AFP相比较,从总体水平来看，AFP和GP73对于肝癌诊断的特异性相差不多，但AFP的敏感性显著低于GP73，AUROC值则是GP73略高于AFP。总体上来看，GP73略优于AFP。而单看敏感性，GP73则显著优于AFP。,14,GP73与AFP相比较,AFP。,在诊断早期HCC时，与AFP的敏感度（25%）相比，GP73水平的敏感度明显更高（62%）（P0.0001）。而且，血清AFP浓度低于20ng/ml的HCC患者中，有57%（32/56）的患者血清GP73阳性。,J.Marrero,P.Romano,JournalofHepatology,2005Volume43,Issue6,Pages1007-1012,15,GP73与AFP相比较,GPC-3,GP73和AFP诊断HCC的ROC曲线,GP73和AFP鉴别HCC与肝硬化的ROC曲线,GP73,AFP,GPC-3,GP73,AFP,JournalofGastroenterologyandHepatology29(2014)597602,ROC曲线显示：GP73诊断肝癌及肝癌的鉴别诊断方面的价值优于AFP。,北京协和医院毛一雷,16,GP73与AFP相比较,赵秀英等在大样本试验中也发现，对于149例AFP100ng/mL。张亚松等也发现45例HCC患者血清AFP13.3g/L，GP73检出阳性25例（55.6%）；33例AFP7g/L，其GP73检出阳性17例（52%）。研究都证实，GP73对于AFP阴性患者具有较高的检出率，能在一定程度上弥补AFP的不足。赵秀英,李宁,丁惠国,等.血清高尔基体糖蛋白73在肝细胞癌诊断中的作用J.中华肿瘤杂志,2010,32(12):943-946.中，可以检测出高水平的GP73。张亚松,石玉玲,张喜钦.GP73在肝癌早期诊断中的应用价值J.医学临床研究,2011,28(4):651-653.,17,GP73与AFP相比较,AFP与GP73的不同之处还表现在肿瘤转移，术后预后等方面。目前的研究认为GP73与肿瘤大小，结节数目，是否多发及临床分期等无密切相关性，与病理分级及合并肝硬化相关。AFP则与肿瘤大小，临床分期等有相关性。在肝癌较小、癌肿数量少甚至单发或患者肝功能较好时，AFP升高水平较低甚至不升高，而只有当肝癌发生侵袭时，如癌栓形成，包膜浸润，血管侵犯，肝内转移及肿瘤分化时，血清AFP才显著升高。GP73则在肝癌早期就显著升高，并且可能起到增强肿瘤转移的作用。YamamotoK,ImamuraH,MatsuyamaY,etal.AFP,AFP-L3,DCP,andGP73asmarkersformonitoringtreatmentresponseandrecurrenceandassurrogatemarkersofclinicopathologicalvariablesofHCCJ.JGastroenterol,2010,45(12):1272-1282.蔡云峰,甄作均,陈焕伟,等.肝癌术后肝再生状态与肝癌复发关系的初步研究J.中国普通外科杂志,2008,17(7):692-696.,18,GP73与AFP相比较,荷兰伊拉斯莫斯大学医疗中心的一项荟萃分析显示，GP73作为一种新的血清标志物，其价值优于AFP，可用于肝癌诊断和监测。研究人员通过对PubMed、Embase和WebofScience数据库进行系统性检索，确定了2005年1月2010年10月间发表的以尿液、血清或唾液中的HCC生物标志物为研究重点的文章。与AFP相比，GP73对于肝癌的检测优于AFP（P=0.006），IL-6与AFP相似（P=0.66），而SCCA弱于AFP（P=0.001）。,ThesROCwiththesensitivityand1-specificityofGP73,AFP,IL-6,andSCCA,HepatolInt2013Mar;7(1):59-64.,19,GP73与AFP联合诊断,研究发现GP73与AFP不存在相关性（Spearman相关分析，P=0.667），在所有HCC患者中，41.3%两者仅一个指标升高，54.7%两者皆升高，而仅有4%两个指标均不升高，两者联合诊断可使HCC诊断率显著提高。多中心大样本研究表明，AFP联合GP73检测后，敏感性提高到了89.2%，特异性提高到了85.2%（GP73，AFP单项检测的敏感度分别为74.6%、58.2%，特异性分别为97.4%、85.3%）。方玫玫,陈展洪,李星,等.肝癌及肝硬化患者血清中GP73的表达及临床意义J.实用医学杂志,2011,27(20):3716-3718.姚建华.高尔基体蛋白73和甲胎蛋白联检在原发性肝癌诊断中的临床应用J.放射免疫学杂志,2012,25(6):673-675.,20,GP73与AFP联合诊断,通过Meta-analysis各标志物ROC曲线下面积,Meta-Analysis共包括在19992012年间发表的40篇血清标志物检测肝癌的英文文献显示：GP73联合AFP诊断肝癌的价值最高GP73和AFP+GP73的诊断肝癌的价值均优于AFP。,InternationalJournalofMolecularSciences14（2013）23559-23580,肝癌诊断的单一标志物及组合标志物的评价：荟萃分析,21,22,数据来源：302医院1185例肝癌预警样本阳性率统计,三指标联合检测阳性率75.2%,肝癌早期多指标联检,GP73与AFP联合诊断,问题和展望,就是GP73的生物学特性，分泌机制，功能等尚未完全明确。缺乏统一的检测方法很多，大多数人使用ELISA，Westernblot，Immunoblot这三