第三十六章微生物检验的质量控制..ppt

第三十六章微生物检验的质量控制,质量控制（Qualitycontrol）是临床微生物实验室为保证检验结果实事求是地反映客观存在而建立的操作程序体系。微生物检验不象其他检验专业的工作那样，随着科学技术的发展，越来越趋于自动化、精密化，质量控制工作也有规章可循。微生物检验专业发展的滞后，决定了微生物检验直到目前，定性试验、手工操作、主观判断仍是主要的工作方式，稍有不慎容易导致错误的结果，质量控制的目的就是要在操作过程中避免可变因素对结果的影响，保证结果的准确性、可靠性和重复性。微生物检验的质量控制包括室内质量控制和室间,质量评价。室内质量控制是由实验室内部制订并实施的，是保证每日工作质量的核心和基础。室间质量评价则是由实验室外部的组织或机构对实验室进行的质量评价。第一节室内质量控制室内质量控制为保证临床微生物学检验结果的准确性而在实验室内采取的一系列行之有效的措施。室内质量控制是微生物检验质量控制的核心，也是做好室间质评的基础和前提。主要包括以下几个方面的内容。一、对微生物检验人员的要求、培训与组织管理,（一）要求1.微生物实验室的负责人应由专业理论水平较高、操作熟练、经验丰富、有管理能力的微生物学专家担任。2.微生物检验人员除应具有丰富的专业知识、熟练的操作技能、敏捷的思维判断能力外，还应具有严谨的科学态度、高度的工作责任感和无私的献身精神。3.微生物检验人员应经常阅读有关技术资料，及时掌握新知识、新技术和本专业的发展现状及方向，不断进行专业技术的知识更新。4.微生物检验人员应不断接受有关技术方面的继续教育和培训。,（二）培训1.内部培训1）定期讲课2）考核鉴定能力3）盲点检测2.外部培训：走出去，请进来两种形式。二、编写微生物检验操作手册和卡片实验室内必须具有一本根据本实验室条件而编写的标准操作程序手册，间隔一段时间进行修订，删减过时需淘汰的内容，补充新的技术方法。并且赋予手册近似于法律的地位，使之成为全体工作人员操作时共同遵守的标准程序，不得随意更,改或简化。要求：内容全面，文字简练，方便使用，不断更新。操作手册一般包括以下内容：实验室管理制度；本室开展的检验项目及最低鉴定要求；标本的采集和处理指南；微生物鉴定的简易程序；试剂、染色液和培养基的制备方法；药敏试验的方法和判读标准；实验室的安全与防护；各类参考数据；室内及室间质量控制；各类细菌生化反应简表。三、培养基的质量控制目前大多数实验室都使用干粉培养基配置或使用成品培养基。对来自著名的微生物培养基生产公司的成品培养基，质量比较稳定。只要按要求储存，在有效期内使用可获得满意效果。对自制,的培养基应进行严格的质量控制。（一）原材料的挑选:制作培养基的原材料成分复杂，应选用成分稳定的试剂，化学试剂应选用分析纯制作MH琼脂的原材料，尚有对胸腺嘧啶和Ca2+、Mg2+等离子浓度的要求。使用干粉培养基配制时，应对每一批号的干粉培养基进行登记并进行以下的质控程序。（二）配制过程:按照实验室操作手册中,培养基的配制方法、配制步骤和注意事项严格进行。作好配制记录及培养基上的标签，注明培养基的名称、配制量、配方、配制者、配制日期及有效期。（三）质量控制1.培养基的外观检查：首先观察其颜色和透明有,无异常，液体培养基应清晰透明，若有混浊与沉淀，说明培养基污染或成分析出；固体培养基应光滑湿润、色泽均匀、无干裂，否则不能使用。普通琼脂平板28可储存12周，血平板至多储存1周。培养基与容器边缘分离则应弃去不用。2.无菌试验：培养基灭菌后，应对每批培养基灭菌效果进行检测。对于分装后进行灭菌的培养基一般应随机抽取5%的量，置于35孵育箱中24h,无菌生长为合格；对于无菌手续分装的培养基则应对全部培养基置于35孵育箱中24h，进行无菌试验；对选择性培养基，应取部分培养基加入1020倍的无抑制性肉汤，稀释抑制物质，,置于35孵育箱中24h,无菌生长为合格。3.培养基的量：在容器中装入太多或太少的培养基均不合适。一般而言，斜面培养基的长度不超过试管的2/3。双糖铁琼脂培养基，高层最少要有1cm。MH琼脂平板的厚度为4mm，即直径为90mm的平皿，注入25ml的培养基即可。其它平板厚度一般为3mm，在90mm直径平皿中注入1520ml的培养基。4.培养基的pH:配制的培养基pH应与规定的pH相差在0.2之内，应在室温条件下用pH测定。不宜用试纸法或目视比色法测定。5.性能试验：应根据培养基的种类不同,分别用已知阳性和阴性的标准菌株或参考菌株对每一批,新配制或新购入的培养基进行测试，符合要求方可使用。用于测定各种培养基性能的菌种如下：培养基质控菌株判断标准羊血琼脂平板金黄色葡萄球菌ATCC25923生长生长试验大肠埃希菌ATCC25922生长溶血反应肺炎链球菌ATCC19615生长，溶血化脓链球菌ATCC6305生长，溶血杆菌肽敏感化脓链球菌ATCC630510mm，敏感（纸片法）B群链球菌1