二、叶绿体的分离与观察_第1页
二、叶绿体的分离与观察_第2页
二、叶绿体的分离与观察_第3页
二、叶绿体的分离与观察_第4页
二、叶绿体的分离与观察_第5页
已阅读5页，还剩5页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

.,实验二叶绿体的分离与观察一、实验目的与原理,原理：采用差速离心分离细胞器组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心，是分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状和密度，也同离心力以及悬浮介质的粘度有关。在一给定的离心场中，同一时间内，密度和大小不同的颗粒其沉降速率不同。依次增加离心力和离心时间，就能使非均一悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心管底部，分批收集即可获得各种亚细胞组分。沉降顺序：核线粒体溶酶体与过氧化物酶体内质网与高尔基体核蛋白体叶绿体具有荧光现象，可利用荧光显微镜观察。菠菜叶富含叶绿体，可采用徒手切片观察其形态和分布；,目的：1、通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理与方法；了解差速离心（Differentialcentrifugation）特点与用途.2、了解菠菜叶绿体的形态、分布与数量。,.,Lowspeed,Highspeed,Differentialcentrifugation,.,二、实验用品,1.材料：新鲜菠菜2.器材：离心机，研钵，漏斗，试管架，纱布，显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、50ml烧杯2个、10ml刻度离心管20支3.试剂:0.35M氯化钠溶液,.,三、实验步骤,（一）叶绿体的分离与观察1.取新嫩菠菜叶，洗净檫干、去梗，称20g，分批放入研钵。2.加入0.35mol/L氯化钠溶液，共20ml，研磨，制成匀浆；3.将匀浆用层纱布过滤于烧杯中；4.取过滤液ml，放入5ml离心管中，1000r/min离心min；5.取上清液转入另一5ml离心管中，3000r/min离心min；6.去上清，沉淀即为叶绿体（混有部分细胞核），加入0.35mol/LNaCl溶液100ul悬浮沉淀；7.取含有叶绿体悬液滴于载玻片上，加盖片，普通光镜下观察。荧光显微镜下演示（二）菠菜叶徒手切片观察用刀片将新鲜的嫩菠菜叶切削出一斜面（片）置于载玻片上，加入0.35mol/L氯化钠溶液滴，加盖片轻压，光镜下观察叶绿体在表皮细胞和保卫细胞中的分布。,.,四、实验结果普通光镜下，可看到叶绿体为绿色橄榄形，在高倍镜下可看到叶绿体内部含有较深的绿色小颗粒，即基粒。,五、实验报告1
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论