周围血涂片形态和临床意义PPT课件

-,1,周围血涂片细胞形态学与临床意义,-,2,目前自动化仪器的应用不但提高了结果的精确度也提供新的参数。但由于对仪器的功能缺乏全面的了解，忽视了形态学检查，影响了医疗质量。,-,3,例子1、小孩发热，看了很多家医院，花了3万多，最后到了省级医院，5毛钱。,例子2、一发热患者，在基层医院治疗不见效，到中心医院就诊。幼稚细胞20%。,例子3、70多岁的男性，初步诊断肝损害住院感染科。推片发现急淋！感染科不相信又做了一遍，结果相同。,-,4,-,5,血涂片细胞形态学检查的意义,一.诊断及筛选血液病。二.作为贫血鉴别诊断的依据。三.了解感染的程度。四.遗传性疾病血液依据。遗传性椭圆形红细胞增多症五.血小板疾病的依据。六.诊断血液寄生虫病。七.血液性分析仪质量的监控,-,6,将血标本均匀地涂抹在清洁干燥的载玻片上，经染色后在显微镜下检查，是血液细胞形态学检查的基本方法，临床应用广泛，特别是对于各种贫血及血液病的诊断和鉴别诊断具有重要价值。,血涂片（bloodsmear）的制备,-,7,1.新玻片上有游离碱质，须清洗后使用。,3.使用时切勿用手触及玻片表面。,载玻片的清洁,血涂片的制备,2.用过的载玻片须用肥皂水或乙醇除去染料和油污。,-,8,手工推片法,灰白层涂片法,血涂片的制备方法,血涂片的制备,薄血涂片法,厚血涂片法,自动血液涂片法,-,9,手持玻片推制血膜,推片,用推片从血滴前方接触血滴,推片角度,吸附血液成一线,推完血片，迅速干燥,手工薄血推片法,-,10,厚薄适宜，头体尾分明，细胞分布均匀，边缘整齐，两边和两端留有一定空隙。,良好血涂片的标准,血涂片的制备,-,11,血滴越大，推片角度越大，速度越快，血液粘度越高，则血膜越厚。血滴越小，推片角度越小，速度越慢，血液粘度越低，则血膜越薄。,影响血膜厚薄的因素,血涂片的制备,-,12,1.灰白层涂片法,抗凝血离心，取灰白层涂片。,用于白细胞减少者的白细胞分类和红斑狼疮细胞(LEC)检查。,其他方法,血涂片的制备,2.厚血涂片法,用于疟原虫、微丝蚴的检查,-,13,血涂片的染色,染色的目的是使细胞膜、细胞浆、胞浆中颗粒及细胞核等主要结构染上特定的颜色，以便于显微镜下观察与识别。,-,14,一、瑞氏染色法（Wrightsstain）,二、吉姆萨染色法（Giemsasstain）,三、瑞氏-吉姆萨复合染色法,血涂片的常用染色方法,对胞浆和中性颗粒染色较好，对胞核稍差。,对胞浆和中性颗粒染色较差，对胞核和寄生虫着色较好。,取二者之长，染色效果好。,-,15,1.用玻璃笔在血膜两端划线。,2.瑞氏染液覆盖血膜，染0.51min。,3.加等量或稍多的缓冲液，混匀，染510min。,4.流水冲去染液，干燥后镜检。,染色步骤,瑞氏染色法,-,16,正常血膜外观为淡紫红色。,镜下RBC和嗜酸性颗粒染粉红色，嗜碱性颗粒染紫黑色，中性颗粒染淡紫红色，细胞核染紫红色。,染色结果,瑞氏染色法,-,17,5.若有染料残渣，可用少量甲醇溶解，并立即用流水冲洗。,1.血膜正面朝上，干透后再染色。,2.染色时间与染液浓度、室温和细胞多少有关。,3.染色过程中防止蒸发沉淀。,4.冲洗时应以流水冲洗，冲洗时间不能太久。,注意事项,瑞氏染色法,6.复染时应先加缓冲液再加染液，或加染液与缓冲液的混合液。,-,18,质量控制,瑞氏染色法,1载玻片要清洁。2制备良好的血涂片。3选择抗凝剂。4处理白细胞浓度较低的标本。5血细胞比容与涂片关系。6新配置染液的处理。7染色过深、过浅的处理。,-,19,红细胞形态检查,在贫血或其他血液系统疾病时红细胞除有数量变化外，往往伴有形态改变，表现在红细胞大小、形状、染色性质和内涵物的异常。因此，红细胞形态检查对贫血的诊断和鉴别诊断有重要的临床价值。,-,20,红细胞形态检查方法,低倍镜：油镜：,制备血涂片,染色,镜检,检查区域：体尾交界处，细胞分布均匀，红细胞紧密排列但不重叠。,估计细胞分布和染色情况，浏览全片是否存在异常细胞。,观察红细胞形态。,-,21,正常红细胞形态,双凹圆盘形，淡桔红色，中央1/3为生理性淡染区，呈正常色素性。红细胞直径为6.77.7m，平均直径7.2m左右，厚约2m。无核，胞质内无异常结构。除健康人外，还见于急性失血、再生障碍性贫血和部分白血病。,-,22,正常红细胞形态,-,23,异常红细胞形态,红细胞大小异常红细胞形状异常血红蛋白充盈度与着色异常红细胞内出现异常结构红细胞排列异常有核红细胞,-,24,红细胞大小异常,1小红细胞(microcyte)：直径10m。最常见于缺乏叶酸和维生素B12所致的巨幼细胞性贫血（MA）。也可见于溶血性贫血（HA）、骨髓增生异常综合症（MDS）。3巨红细胞(megalocyte)：直径15m。常见于巨幼细胞性贫血（MA）和骨髓增生异常综合症（MDS）。,-,27,大红细胞巨红细胞,-,28,红细胞大小异常,4红细胞大小不均(anisocytosis)：指红细胞之间直径相差一倍以上。见于严重的增生性贫血的血涂片中。巨幼细胞性贫血尤为明显，与骨髓造血紊乱有关。,-,29,红细胞大小不均,-,30,红细胞大小异常,小红细胞(microcyte)大红细胞(macrocyte)巨红细胞(megalocyte)红细胞大小不均(anisocytosis),-,31,红细胞形状异常,1球形红细胞(spherocyte)：直径小于正常，厚度增加大于2m。无中心淡染区。常见于遗传性球形红细胞增多症（HS）和伴有球形细胞增多的其他溶血性贫血如AIHA、HDN等。,-,32,球形红细胞,-,33,红细胞形状异常,2椭圆形红细胞（elliptocyte）：细胞呈卵圆形、杆状，长度可大于宽度34倍。这类红细胞成熟后在高渗、等渗、低渗及正常血清内，其椭圆形保持不变。常见于遗传性椭圆形红细胞增多症（HE），可高达25%75%（正常人为1%）。也见于巨幼细胞贫血。,-,34,椭圆形红细胞,-,35,红细胞形状异常,3靶形红细胞（targetcell）：红细胞中心部位染色较深，其周围为苍白区域，而细胞边缘又深染，形如射击之靶。常见于各种低色素贫血（主要是地中海贫血，珠蛋白生成障碍性贫血）。,-,36,靶形红细胞,-,37,红细胞形状异常,4口形红细胞（stomatocyte）：红细胞中央苍白区呈扁平状，颇似张开的嘴巴或鱼口。血涂片中口形红细胞增多，见于遗传性口形红细胞增多症（HST），常10%。也可见于酒精中毒、小儿消化系统疾病引起的贫血等。,-,38,口形红细胞,-,39,红细胞形状异常,5镰形红细胞（sicklecell）：呈狭长形，形如镰刀，两端尖锐，正常情况下少见。主要见于HbS病，是由于红细胞内存在异常HbS所致。在缺氧的情况下，异常HbS溶解度降低，形成狭长的结晶体，使红细胞变形。,-,40,镰形红细胞,-,41,红细胞形状异常,6棘形红细胞（acanthocyte）：红细胞表面有针状或指状突起，间距不规则，突起的长度和宽度可不一。在-脂蛋白缺乏症病人的血涂片中出现较多。也可见于脾切除后、酒精中毒性肝脏疾病、尿毒症、溶性性贫血及重金属中毒。应与皱缩红细胞区别。,-,42,-,43,红细胞形状异常,7皱缩红细胞：也称钝锯齿形红细胞（echinocyte），主要由于高渗、制片不当等原因造成，红细胞周边呈钝锯齿状排列紧密，大小相等，长短一致。,-,44,皱缩红细胞,-,45,红细胞形状异常,8泪滴形红细胞（teardropcell）：形如泪滴或梨状，正常人偶见。多见于骨髓纤维化。,-,46,泪滴形红细胞,-,47,红细胞形状异常,9裂片细胞（schistocyte）：为红细胞碎片或不完整的红细胞，系红细胞通过管腔狭小的微血管受牵拉、挤压所致。有各种形态如刺形、盔形、三角形及扭转形等。正常人血片中裂片红细胞3%。这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出现核象右移，提示预后不良。,-,85,中毒颗粒,严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等，中性粒细胞可出现形态变化。具体表现为：细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。中毒颗粒：细胞质中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小等，可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致,-,86,空泡粒细胞,可在细胞质或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。,-,87,红斑狼疮细胞,-,88,Auer小体,含于胞浆内的一种被罗氏染色染成红色的棍棒状小体。形态类似抗酸染色的结核杆菌。正常细胞中见不到，多见于急性白血病时原始、早幼粒细胞和幼稚单核细胞胞浆中，但决不会出现于淋巴和红细胞中，故对白血病的鉴别有一定价值。,-,89,杜勒小体,细胞质内出现嗜碱性多呈斑块、梨形或云雾状，可能为核浆发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现,-,90,May-Hegglin异常,是一种先天性白细胞异常，呈常染色体显性遗传。其特点是在粒细胞及单核细胞胞浆中，出现蓝色的类似杜尔氏体的包涵体。患者常同时伴有巨大血小板，血小板减少、以及轻度出血倾向，但绝大部分人不表现任何症状。,-,91,Alder-Reilly异常,主要的形态特点是白细胞中胞浆中含有粗大的染成深蓝色的（嗜天青）颗粒，有的压在核上，易与中毒性颗粒混淆；通常颗粒不多，但仔细观察较易发现。本病为常染色体隐性遗传，是一种粘多糖代谢障碍性疾病。异常颗粒是由于溶酶体缺乏某些水解酶，造成粘多糖和神经鞘磷脂堆集，成为可染色的颗粒。患者常同时伴有脂肪软骨营养不良或Hurler综合症。,-,92,Cheidiak-Higashi异常,Cheidiak-Higashi异常：主要形态特点是在嗜中性粒细胞（包括幼稚细胞）胞浆中，含有一种粗大的颗粒。该颗粒大小不一，直径1-4，圆、椭圆或不规则形，染成灰蓝色、蓝紫色、以至棕红色，甚为显著；有时在嗜酸性、嗜碱性和单核、淋巴细胞、浆细胞以及组织细胞中亦可见到此种大颗粒。患者称为Cheidiak-Higashi综合征(切东)（CHS），多见于幼儿，呈常染色体隐性遗传。通常伴有中度白化病，其眼球及皮肤色淡而缺乏色素。眼球震颤和畏光。目前认为这种粗大颗粒是一种巨大的溶酶体。含有这种溶酶体的细胞吞噬能力仍属正常，但游走能力及趋化性以及消化病原微生物的能力下降。故极易感染细菌和病毒，并因反复感染最终出现外周血中白细胞和血小板减少和贫血，多数在幼年即死亡，但杂合子可无任何症状。,-,93,-,94,原单核细胞,胞体：直径15-20m胞核:较大,圆或椭圆,有的略凹陷,有折叠及折痕现象.占全细胞大小2/3。居中或稍偏一旁。染色质纤细疏松，网点排列，或较模糊不清。染色较其它原始细胞淡。核膜不清楚，核仁1-2个较大，不太清楚，淡蓝色。胞浆：较其它原始细胞稍多，边缘不规则，有伪足状，灰兰色，着色不均匀，不透明，云雾状，无核周界，无颗粒。在急性单核细胞型白血病时Auers小体。,-,95,幼单核细胞,胞体：直径15-25胞核：圆形或不规则形。有折叠之折痕，凹陷或切迹。染色质较原单核粗糙疏松些，丝网织状结构或模糊不清，淡紫红色，核膜不清楚，核仁0-3个，不太清楚，较大。胞浆：中等量，灰兰色，无核周界，可见嗜天青颗粒，密集在部分胞浆中,-,96,单核细胞,单核细胞特点：1.浆与核的形状均不规则，浆如阿米巴样。有内外浆之分，核呈不规则圆形，马蹄形，多折痕。2.染色质的结构多样化，呈细或粗网织状或较模糊排列。,-,97,幼淋巴细胞,胞体：直径10-18胞核：占细胞绝大部分，居中或稍偏位。圆形或椭圆形。淡紫红色，染色质细致，排列匀称，核膜浓厚，界限清晰，核仁1-2个，清楚淡兰色。胞浆：量少，淡兰色或深兰，核周界明显，无颗粒，无Auers小体。,-,98,异形淋巴细胞:可见于各种病毒感染，如传染性单核细胞增多症时最为常见。此外，可见于疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等。,异常淋巴细胞,-,99,淋巴细胞,-,100,原始浆细胞,原始浆细胞：直径14-20；核较大，约占细胞2/3，圆或椭圆形，常偏于一侧；染色质细致、呈颗粒状，均匀分散或呈细网状。核仁2-5个，淡蓝色，不显著。胞浆较其它原始细胞为多，深蓝而不透明，近核处着色较浅，无颗粒，偶可见到空泡。原始浆细胞在正常骨髓中极少见到，只有在多发性骨髓瘤和浆细胞白血病时才可大量存在，并有形态变异。,-,101,幼浆细胞,幼浆细胞：直径15-25；核圆或椭圆形，占细胞1/2左右，位于细胞中央或偏于一侧，染色质较原始阶段粗而密，开始有浓集现象。核仁1-2个，不清晰。胞浆深蓝色或呈多染性，近核部分常有呈半月状的淡染区，偶尔可见到有空泡。,-,102,浆细胞,浆细胞：直径10-20；核较小，占细胞的1/2以下，多偏于一侧，偶可见双核；染色质粗密、聚集成堆、常染成紫丁香色、不均匀，在近核处一边常伸出半月状淡染区；浆中偶见有空泡或有泡沫感。,-,103,Russell小体,Russell小体是浆细胞浆内的一种数目不等，大小不一染成肉红色的球形小体，它是浆细胞中分泌免疫球蛋白的一种小体。如胞浆内充满此小体，核常被挤到一旁，称为葡萄细胞(grapecell)或称mott细胞(桑椹状细胞)。Russell小体在染色中有时会溶解，以致染成淡黄色或形成空泡，成为泡沫样细胞，须与脂肪细胞区别。,-,104,Dutcher小体,Dutcher小体是一种含于核内的PAS阳性包涵体，经染色后，较核染色为淡，可在约7%的骨髓瘤患者中见到，以IgA型骨髓瘤较多见。,-,105,火焰状细胞,火焰状细胞是指浆细胞内沉集了一些无定形沉淀物，并常染成红色，故名。现已知沉集物也是免疫球蛋白，且多见于IgA型多发性骨髓瘤。,-,106,原巨核细胞,胞体：直径15-30不太规则,为所有原始细胞中胞体最大者。胞核：巨大，圆形或不规则形，核仁2-3个，淡兰色，大小不等，不太明显。胞浆：量很少，不规则，呈海绵样，深兰色无核周界，无颗粒但有叶呈泡沫状。,-,107,幼巨核细胞,胞体：直径20-50，是巨核细胞系统成熟过程中的中间细胞，其胞体较大。胞核：巨大，稍偏于一侧，通常为肾形，或不规则，可呈凹陷或切迹，染色质较粗而密，有局部浓部染现象，模膜清楚，核仁可有可无。胞浆：中等量可呈伪足状，稍兰红色，于核附近的染色较深，无核周界，于核的附近出现极细的嗜天青颗粒，但胞浆外周无颗粒。,-,108,巨核细胞,胞体：直径40-70或100。胞核：形状不规则，常呈层层叠叠或多叶扭转，分叶状等。染色质粗糙，常呈团块状。胞浆：丰富，充满较粗大的紫红色颗粒，可聚积在一起。堆集成团。细胞膜不清晰，呈伪足，胞浆外缘有血小板形成。,-,109,血小板,-,