江苏地方标准 DB 32 3762.6-2020新型冠状病毒检测技术规范 第6部分：血清IgM和IgG抗体胶体金免疫层析检测程序

ICS11.020C 62DB32江苏省地方标准DB 32/T 3762.62020 新型冠状病毒检测技术规范第6部分：血清IgM和IgG抗体胶体金免疫层析检测程序 Technical specifications for SARS-CoV-2 detection Part 6: Colloidal gold immunochromatograohic assay test procedure for serumIgM and IgG 2020 - 03 - 02发布2020 - 03 - 03实施江苏省市场监督管理局发布DB32/T 3762.62020前言DB32/T 3762新型冠状病毒检测技术规范目前分为以下部分：第1部分：生物样本采集、运输和保存；第2部分：病毒分离与鉴定； 第3部分：核酸荧光PCR检测程序；第4部分：重组酶介导等温扩增程序；第5部分：血清IgM和IgG抗体酶联免疫吸附检测程序；第6部分：血清IgM和IgG抗体胶体金免疫层析检测程序；第7部分：空气样本检测与评估；第8部分：物体表面检测与评估；第9部分：医务人员职业暴露检测与评估。本部分为DB32/T 3762 的第6部分。本部分按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本部分由江苏省卫生健康委员会提出。本部分由江苏省卫生标准化技术委员会归口。本部分主要起草单位：江苏省疾病预防控制中心、南京医科大学、苏州第五人民医院、苏州大学附二院、昆山市疾病预防控制中心。本部分主要起草人：黄超、朱宝立、温恬、吴斌、程军平、徐佳南、钱志远、罗晓明、沈欢喜。2新型冠状病毒检测技术规范 第6部分：血清IgM和IgG抗体胶体金免疫层析检测程序1 范围本部分规定了新型冠状病毒IgM和IgG抗体的胶体金免疫层析检测的环境与设施、设备与耗材、试剂与材料、血清样本采集、胶体金免疫层析检测步骤和结果判定。本部分适用于新型冠状病毒肺炎流行期间被检测者血清中的IgM和IgG抗体的胶体金免疫层析检测方法。其它呼吸道病毒血清样本中的IgM和IgG抗体检测程序可参照执行。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。Doc9284-AN/905 危险品航空安全运输技术细则 DB32/T 3762.1-2020新型冠状病毒检测技术规范 第1部分：生物样本采集、运输和保存3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件 3.1胶体金 colloidal gold nanoparticles由氯金酸（HAuCl4）在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，称为胶体金。3.2免疫层析法 immunochromatography将特异的抗原或抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带，当该干燥的硝酸纤维素一端浸入样本（如血清）后，由于毛细管作用，样本将沿着该膜向前移动，当移动至特定区域时，样本中相应的抗体或抗原即与该区域的对应抗原或抗体发生特异性结合，若用免疫胶体金或免疫酶染色可使该区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。4 环境与设施在BSL-2级实验室内进行实验。5 设备与耗材5.1 设备：生物安全柜、洗板机、酶标仪（含有450nm波长滤光片）、高压锅、生物安全运输箱、水浴锅5.2 耗材：个人防护装备：N95及以上防护口罩、护目镜、一次性防护面罩、医用无纺布帽、连体防护服、一次性手术衣、乳胶手套、 防水靴套、真空釆血管、无菌螺旋口塑料管。6 试剂与材料新型冠状病毒人IgM抗体胶体金检测试剂盒、新型冠状病毒人IgG抗体胶体金检测试剂盒。7 样本采集用真空负压采血管采集血液样本5mL，室温静置30分钟，1500rpm2000rpm离心10分钟，收集血清于无菌螺口塑料管中。8 样本运输按照DB32/T 3762.1-2020中6.1和6.2的要求。9 胶体金免疫层析检测步骤9.1 将待测样本及所需试剂从储存条件下取出，平衡至室温。融化后，在测试前将样本充分混匀。9.2 准备检测时，从撕口处打开铝箔袋，将检测卡取出，平放于生安柜台面上。9.3 在检测卡上标注样本号。9.4 用移液枪或者一次性滴管吸取待测血清样本20L于检测卡上样本孔内，立即在样本孔内滴加23滴（约70L100L）样本稀释液，并确保操作过程中没有气泡产生。9.5 10分钟后判读结果。10 结果判定10.1 阴性结果仅出现质控线C，检测线G和M都不显色，说明没有检测到新型冠状病毒抗体，结果为阴性。10.2 阳性结果10.2.1 质控线C和检测线M都出现，说明检测到新型冠状病毒IgM抗体，结果为IgM抗体阳性。10.2.2 质控线C和检测线G都出现，说明检测到新型冠状病毒IgG抗体，