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文档简介
.,淀粉培养基(g/L)牛肉膏5g蛋白胨10gNaCl5g淀粉2g琼脂18g水1000mlpH7.0-7.2121灭菌20min注:先用小烧杯称取淀粉,加少量水调成糊状,再加到沸水,加热溶化,再加其它成分。,明胶培养白基(g/L)牛肉膏3g蛋白胨10gNaCl5g明胶120-180g水1000mlpH7.0-7.2121灭菌20min注:先称取明胶,加适量水,加热溶化后再加其它成分,乳糖蛋胨培养液蛋白胨10g乳糖5gNaCl5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml蒸馏水1000mlpH7.2-7.4注:最后加溴甲酚紫。115灭菌20min,.,实验七微生物的接种及培养特征观察,一、目的要求:1、学习、掌握微生物的接种技术。2、了解不同微生物在固体斜面、液体和半固体培养基中的生长特征,.,二、实验原理微生物的培养特征是指微生物培养在培养基中所表现的群体形态和生长情况。不同微生物在相同培养基上培养,群体形态和生长情况不同。,.,在斜面固体培养基上:呈丝绒状、刺毛状、串珠状、舒展状、树枝状、假根状等在液体培养基内:呈均匀混浊、絮状、粘液状,液面形成菌膜,或上层清晰而底部呈沉淀状等。在半固体培养基内:可以沿接种线向四周蔓延(有鞭毛);仅沿线生长;或底部长的好、上层不长;或上层生长而底部不生长等,.,利用微生物的培养特征,可以作为种类鉴定和识别纯培养是否被污染的参考。,.,三、实验材料菌种:枯草芽孢杆菌、大肠杆菌培养基:牛肉膏蛋白胨的液体培养基、半固体培养基和固体斜面培养基器材:接种环、接种针、酒精灯等,.,四、操作步骤(一)接种技术1.斜面接种:从已长好微生物的菌种管移接到另一斜面管的方法。此法用于好氧微生物的接种。左手持菌种管和斜面管,使斜面向上,并尽量放平。用右手先将棉塞拧转松动,灼烧接种环,用右手的小指、无名指和手掌拨下棉塞并夹紧,同时将管口在火焰上灼烧一圈,接种环灼烧灭菌后插入管内,冷却、挑菌,立即转入斜面管底部,沿斜面划线曲线:用于培养菌种直线:用于观察培养特征,.,2.液体接种:由斜面菌接种到液体培养基(如试管或三角瓶等)中的方法。操作与上法基本一致,只是在将接种环送入液体培养基中时使环在液体与管壁接触的地方轻轻磨擦,使菌体分散,然后塞上棉塞,再轻轻摇动均匀,即可培养。如果菌种是在液体培养基培养时,一般用无菌移液管、移液枪或滴管接种,也可用接种环。,.,3.穿刺接种(半固体培养基):用接种针挑取菌种后,从中间插入深层培养基内,(不要刺到底部,3/4),再沿原路拔出,此法用于厌氧细菌接种、检查细菌的运动能力。4.平板接斜面:一般是将经平板分离培养得到的单菌落接种到斜面,以便作鉴定或扩大培养、保存之用。类似斜面接种。,.,(二)在培养箱中培养细菌36培养真菌和放线菌在28培养(三)结果观察(细菌2d后看结果,放线菌和真菌下周上课时观察),.,注意事项,1、接种时严格无菌操作。2、每次接种完毕要灼烧接种环(针)3、斜面接种时,不要划破培养基,菌种不要沾到管壁上。4、液体培养基接种时培养基不要流出来或沾染管口5
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