第一章组织学绪论.ppt

组织学与胚胎学(histologyandembryology),上篇,组织学,第1章组织学绪论,目的要求1、掌握嗜酸性、嗜碱性、电子密度高、电子密度低等概念。2、熟悉组织学与胚胎学的基本研究方法。3、了解组织学与胚胎学的范围、内容和其它研究方法。4、了解组织学与胚胎学的发展。,组织学（histology）：研究正常机体微细结构及其相关功能的科学。它是以显微镜观察组织切片为基本方法，又称显微解剖学。,一、定义：,二、内容：,1、基本组织（总论）：,2、器官、系统（各论）：,细胞组织器官系统细胞外基质,上皮组织,结缔组织,肌组织,三、组织学常用计量单位,mm=1000m，m=1000nm,四、组织学研究方法,（一）一般光学显微镜术（简称光镜，LM)镜下结构称光镜结构，放大倍数1500倍，分辨率0.2m，观察时，须将组织制成薄片，以利光线通过。,石蜡切片-（最常用）制片过程：1、取材2、固定3、脱水4、透明5、浸蜡、包埋6、切片：57微米厚度7、展片8、捞片9、脱蜡10、复水11、染色12、脱水13、透明14、封片,还有冰冻切片（酶组织化学染色），涂片（血液），铺片（疏松结缔组织），磨片（牙和骨）等制作切片的方法。,染色：是用染料使无色组织切片着色，增加对比度，便于镜下观察。染色方法很多，但没有一种能使细胞全部结构同时着色。常用酸性染料（伊红、坚固绿、橙黄G），碱性染料（苏木精、亚申蓝、甲苯胺蓝、碱性品红）、硝酸银等进行染色。最常用:,H.E,HE染色,1、嗜碱性：细胞和组织的酸性物质或结构与碱性染料（如苏木精）亲合力强，称嗜碱性。2、嗜酸性：碱性物质或结构与酸性染料（如伊红）亲合力强，称嗜酸性。3、中性：若与两种染料的亲合力均不强的。4、亲银性：银染法中有些组织结构可直接使硝酸银还原而显示，称此为亲银性。5、嗜银性：有些结构无直接还原作用，需加入还原剂方能显色，称此为嗜银性。,名词：,（二）电子显微镜术（简称电镜，EM）镜下结构称超微结构，可放大几万倍至几十万倍。,1、透射电镜：观察组织、细胞内部超微结构。分辨率0.2nm。标本制备：1、固定（戊二醛等）2、包埋（环氧树脂）3、切片（50-80nm)4、染色（醋酸铀和柠檬酸铅等重金属盐）标本在荧光屏上呈黑白反差的结构影像。电子密度高、电子密度低：被重金属浸染呈黑色的结构，称电子密度高；反之，浅染的部分称电子密度低。,透射电镜图,2、扫描电镜：用于观察组织表面的立体结构。分辨率5-7nm,（三）组织化学术,为应用化学、物理、生物化学、免疫学或分子生物学的原理和技术，与组织学技术相结合而产生的技术，能在组织切片定性、定位地显示某种物质的存在与否、以及分布状态。一般组织化学术：主要显示糖类(如PAS反应)、脂类、核酸和酶类。免疫组织化学术：应用标记的特异性抗体和组织中相应的肽或蛋白质结合，然后通过显微镜观察标记物，而获知该肽或蛋白质的分布部位及相对含量。此法特异性强，敏感度高，应用广泛。原位杂交术：即核酸分子杂交组织化学术，用于检测基因(DNA片段)的有无、及在转录水平检测基因的活性(mRNA)。,小脑浦肯野氏细胞免疫组织化学染色,（四）放射自显影术,通过活细胞对放射性核素或其标记的物质的摄入，以显示该细胞的功能状态、或该物质在组织和细胞内的代谢过程。（五）图像分析术应用数学和统计学原理对组织切片提供的平面图像进行分析，从而获得立体的组织和细胞内各种有形成分的数量、体积、表面积等参数。根据连续的组织切片应用计算机进行三维重建，可以获得组织微细结构的立体模型，这部分内容称体视学。,（六）细胞培养术和组织工程,细胞培养术：是把从机体取得的细胞在体外模拟体内的条件下进行培养的技术。组织工程：是用细胞培养术在体外模拟构建机体组织或器官的技术。组织工程研究包括四个方面：生长旺盛的细胞，也称种子细胞；细胞外基质，可用生物材料(如牛胶原)和无毒、可被机体吸收的人工合成高分子材料；构建组织或器官，即把细胞置于细胞外基质中进行三维培养、并形成所需要的形状；将构建物移植入机体的方法。,神经细胞细胞培养,培养神经细胞免疫组织化学染色,五、组织学学习要点,1、平面与立体的关系2、结构与功能的联系3