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文档简介

.,NSCLC患者EGFR基因突变检测,.,腺癌的驱动基因,KrisASCO2011PlanchardELCC2012WuJSMO2011MitsudomiJCCO2010,.,97%的基因突变互相排斥,KrisMG.etal.ASCO2011,Abstract#CRA7506.,.,4,高加索人腺癌各基因构成比图,.,5,中国人肺腺癌各基因构成比图,.,关于“驱动基因”,近50%NSCLC驱动基因已经被发现双基因同时突变罕见对已知的靶点,已有很多上市或在研的药物驱动基因突变状态与人种、性别、病理类型、吸烟状况等有关,不同类型用药不同。,.,NSCLC基因检测的意义,基因检测决定了分子靶向治疗2011年我国制定了:中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识,.,EGFR基因突变检测的临床意义,EGFR-TKI一线治疗必须进行EGFR基因突变的检测,国内外均推荐EGFR基因突变阳性的NSCLC给予EGFR-TKI一线治疗优势人群不代表个体:尽管在女性、亚裔、不吸烟或少吸烟、腺癌EGFR基因突变发生频率较高,但在鳞癌、腺鳞癌,甚至SCLC中也可检测到EGFR基因突变。,.,EGFR基因突变检测的临床意义,EGFR突变不同类型疗效也不一样,19-del较L858R疗效好,检测的必要性,.,EGFR基因突变检测的临床意义,化疗能改变EGFR突变状态264例一线化疗的bIV期NSCLC患者的血DNA标本,EGFR突变率在化疗后显著降低(23.1%对34.5%,P1毫升。如需长途运输,加入乙醇浸泡60分钟以上。为符合托运要求,可付运前可离心后倒掉试管内的乙醇,倒入所提供的标准试管,拧紧盖子,常温运输,确保3天内到达。,.,EGFR检测方法,目前公认有两种:测序法和ARMS法(等位基因特异PCR+荧光探针),.,EGFR检测方法,.,EGFR检测方法,北京协和张静报道:82例NSCLC直接测序法中24例无结果,ARMS法均有结果,且16例检测到变异中华病理学杂志,2008,37(5),.,关于胸水EGFR突变的检测,.,CancerSci.2006;97(7):642-8.IntJCancer.2006;119(10):2353-8.ChangGungMedJ.2006;29(4):373-9.BrJCancer.2006;95(10):1390-5.JCancerResClinOncol.2010;136(9):1341-7.,国内外胸水标本EGFR检测的研究,.,用胸水检测肿瘤EGFR突变需要敏感方法用胸水中细胞及无细胞液均可检测EGFR突变,且检出率基本相同目前缺少胸水与肿瘤组织直接对比(配对样本检测)数据,故对其敏感度与特异性尚无结论,.,胸膜转移和胸水的对比研究,本研究的目的:探索胸腔积液与胸膜转移灶EGFR突变检测的一致性,从而判断当存在胸膜转移灶时,胸液EGFR基因突变状态检测的价值。收集2011年4月-2012年12月间就诊于上海长海医院呼吸科符合入组条件患者的胸液标本及相应的胸膜转移病灶组织,共35对样本。,.,研究步骤,胸膜转移灶样本采集电子胸腔镜在局麻下进行胸腔镜检查术镜下见病灶后以活检4-6块组织,10%中性福尔马林固定,后包埋成蜡块每例蜡块切取10-12片5m厚连续切片,切片在37烘箱内烤片3h后常温保存,.,研究步骤,胸腔积液样本采集每例患者同时收集胸水100-200ml,常温静置30min后取上清15ml,-80保存,为待检测的胸液上清;在去除上清液后,将剩余沉淀物室温1000g转速离心10min,包裹细胞沉淀,常规固定、包埋并切片(具体同胸膜转移灶标本),为待检测的胸液沉淀;每例蜡块切取10-12片5m厚连续切片,切片在37烘箱内烤片3h后常温保存。,.,胸膜活检组织EGFR突变状况,.,胸液沉淀与相应胸膜转移灶EGFR突变的比较,符合率为73.1%,.,胸液上清与相应胸膜转移灶EGFR突变的比较,符合率为85.7%,.,胸液上清与相应沉淀EGFR突变的比较,符合率为80.8%,.,胸液EGFR突变检测率的比较,.,结论,以ARMS方法检测胸液中EGFR突变状态,与经胸腔镜取得的组织标本中的EGFR突变状态吻合率高;临床上可以通过检测胸液,尤其是结合胸液上清和沉淀EGFR突变状况,来指导EGFR

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