一般血液学检验

1,第二章一般血液学检验TheGeneralExaminationOfHematology,2,1.Themethodofdeterminationandclinicalsignificanceofredbloodcell,whitebloodcellandhemoglobin.2.Redbloodcellandwhitebloodcellmorphologyevaluationandclinicalsignificance.3.Diagnosisandclassificationofanemia.4.Bloodcelldifferentialcountanditsclinicalsignificance.5.Qualitycontrolandestimateofredbloodcellexaminationandwhitebloodcellexamination.,KEYPOINTS,3,主要内容,第一节外周血液血细胞形态学检验第二节红细胞检验第三节白细胞检验,4,第一节外周血液血细胞形态学检验,一、血细胞涂片的制作和染色,1、血涂片的制作,手工涂片法,自动涂片法,5,2、血涂片的染色,主要成分：碱性美兰与酸性伊红血细胞是由蛋白质组成的，带有氨基端和羧基端。各种血细胞的化学性质不同，对染料的亲和力也不同。物理吸附、化学亲和与电荷作用的共同结果。如血红蛋白是碱性蛋白，就和酸性伊红结合；细胞核蛋白是酸性蛋白，就和碱性美兰结合；还有一种颗粒两种染料都结合，为中性颗粒。,瑞氏染色,6,显微镜检查法,计算机图象分析,二、红细胞形态检查,方法,7,形态:表面积/体积比值大；增加气体透过面积；作为呼吸载体,结合、运输氧和CO2。,1、正常红细胞形态,8,大小异常染色异常形态异常结构异常,2、异常红细胞形态,9,大小异常,小红细胞,大红细胞,还包括巨红细胞和红细胞大小不等。,10,11,染色异常,低色素性：中央淡染区扩大，甚至中间不着色。,高色素性：红细胞内生理性中央浅染区缩小甚至消失，整个红细胞均染成红色，系红细胞内血红蛋白含量增高所致。嗜多色性：红细胞呈灰蓝色或灰红色，胞体较大，属于尚未完全成熟的红细胞，提示骨髓造红细胞能力活跃。,12,形态异常,水滴型红细胞,刺毛红细胞,椭圆型红细胞,类型很多，原因复杂常见有：,13,口形红细胞,球型红细胞,靶形红细胞,还包括新月形、缗钱状、裂片形等。,14,结构异常嗜碱性点彩红细胞染色质小体卡-波环有核红细胞,15,16,17,18,卡-波环,胞质中出现的紫红色细线圈状结构，环行或8字形，常与染色质小体同时存在，可见于白血病、增生性贫血等。,19,三、白细胞形态检查,20,1、中性粒细胞核象变化,成熟,幼稚,21,（1）核象左移外周血中杆状核超过5%和/或出现杆状核以前的细胞，为核左移。见于急性感染、急性中毒、急性溶血。,22,（2）核象右移,一般外周血中的中性粒细胞以3叶为主，如果5叶以上超过3%，为核右移。大多数由于缺乏造血物质，如恶性贫血、巨幼细胞性贫血。,23,空泡变性棒状小体中毒颗粒杜勒小体,2、中性粒细胞其它异常,24,25,26,27,在传染性单核细胞增多征、病毒性肺炎、病毒性肝炎等病毒感染时或过敏原的刺激下，可使得淋巴细胞增生，并出现形态学的变化。分为空泡型、不规则型和幼稚型,3、异常淋巴细胞,28,29,1、方法显微镜计数法血细胞分析仪法,一、红细胞计数,第二节红细胞检验,30,成年男性：(4.05.5)1012/L成年女性：(3.55.0)1012/L新生儿：(6.07.0)1012/L,2、参考值,31,3、临床意义,A、生理性增多新生儿、高原生活、剧烈运动、精神因素等,（1）增多,32,（B）绝对性增多：,继发性心、肺疾病异常血红蛋白病某些肿瘤等原发性真性红细胞增多症,病理性增多,（A）相对性增多：血浆水分丢失，有形成分相对增加，绝对值没有发生变化,33,生理性减少儿童、孕妇、老年人病理性减少A、骨髓造血功能低下如再障B、造血原料缺乏如缺铁贫、巨幼贫C、红细胞破坏增加如溶贫D、红细胞丢失过多,（2）减少,34,二、血红蛋白测定（hemoglobinHb）,35,血红蛋白是由四条多肽链组成的,二条链(每条含141个氨基酸残基)和二条链(每条含146个氨基酸残基)。每条多肽链的螺旋结构形成一个疏水性的空间，可保护血红素分子不与水接触，Fe2+不被氧化。Fe2+位于血红素卟啉环的中央，与卟啉环的4个吡咯基以及多肽链上的组氨酸形成六配位体。每个血红蛋白分子可逆结合4个氧分子，每克血红蛋白可结合1.34mL氧气。,36,1、测定方法,氰化高铁血红蛋白法（HiCN）,十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SDS-Hb）,叠氮高铁血红蛋白法（HiN3）,37,2、参考值,成年男性：120160g/L成年女性：110150g/L新生儿：170200g/L,38,测定方法,手工温氏比积法,分析仪微量法,三、血细胞比容测定（hematocrit，Hct）,红细胞比积（Hct、PCV）：又叫红细胞体积分数。指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。,39,【参考值】男性：0.40-0.50L/L（40-50容积%）。女性：0.37-0.48L/L（37-48容积%）。【临床意义】红细胞比积增高：相对性增多（血液浓缩）。绝对性增高（真性红细胞增多症）。红细胞比积减少：见于各种贫血。,40,四、红细胞相关参数的计算,1、平均红细胞容积（meancorpuscularvolume,MCV）。,MCV=,【参考范围】8095fl,41,四、红细胞相关参数的计算,、平均红细胞血红蛋白量（meancorpuscularhemoglobin,MCH）,MCH=,【参考范围】2731pg,42,.平均红细胞血红蛋白浓度（meancopuscularhemoglobinconcentration，MCHC）,四、红细胞相关参数的计算,MCHC=,【参考范围】320360g/L（32%36%）,43,四、红细胞相关参数的计算,、红细胞体积分布宽度（RDW）定义：是反映周围血红细胞间体积差异的参数通过变异系数定量的表示红细胞体积分布的离散程度。原理：血细胞自动分析仪通过电阻的改变，产生脉冲信号的强弱。【参考范围】成人：15.0%新生儿：男15.9%女16.2%,44,【临床意义】根据上述指标可进行贫血的形态学分类。,四、红细胞相关参数的计算,45,46,47,五、网织红细胞（reticulocyte）计数,界于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞。因其胞质中残存的核糖核酸经碱性染料活体染色后，呈现点状或线网状结构，故名网织红细胞。,48,、计数方法,（1）手工方法：米勒Miller窥盘法该方法可明显提高计数的准确性和准确性.,A,3,1,B,将Miller窥盘放在显微镜目镜中,通过窥盘中大小方格间的9比1比例关系计算RBC数和网织RBC。,49,抗凝全血噻唑橙染色，用流式细胞仪分析样本中10000个细胞，报告网织红细胞%和平均荧光强度。荧光强度越强，细胞越幼稚。流式细胞仪分析简便，结果精确、灵敏，消除了取样带来的误差。,（）流式细胞仪法：,50,成人：0.0050.015（0.5%1.5%)新生儿：0.020.06绝对值：(2484)109/L,、参考值,51,（1）评价骨髓增生能力，判断贫血类型再障时，明显降低。绝对值低于5109/L可做为急性再障的辅助诊断指标。失血、多数溶血性贫血患者网织红细胞可明显高于正常。营养不良性贫血在治疗前网织红细胞可保持正常、轻度升高或降低。,、临床意义,52,（2）评价疗效网织红细胞反应：IDA或巨幼细胞贫血分别给予铁剂、维生素B12或叶酸治疗2-3d后，网织红细胞计数值开始上升，7-10d达到最高(10%左右)；两周以后逐渐降至正常水平，红细胞、血红蛋白开始升高。骨髓移植、EPO治疗后：若骨髓开始恢复造血功能，网织红细胞计数值上升。,、临床意义,53,（3）放、化疗监测机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制，早期HFR和MFR降低，然后才检测到网织红细胞的降低。而停止放、化疗，骨髓功能恢复后，又见上述指标依次上升。可指导临床医师适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。,、临床意义,54,（Reticulocyteproductionindex,RPI）病人网织红细胞/2*病人PCV/正常人PCV（男0.45，女0.40）意义：3提示溶血性贫血或急性失血性贫血；2提示为骨髓增生低下或红细胞系成熟障碍性贫血。,网织红生成指数,55,概念,红细胞在一定条件下沉降的速度而言，简称血沉。在健康人血沉数值波动于一个较狭窄范围内。在许多病理情况下血沉可明显加快。,六、血细胞沉降率（erythrocytesedimentationrate,ESR）,56,魏氏法：取静脉血1.6ml，按4:1比例与柠檬酸钠溶液（0.4ml）混匀，然后吸入清洁、干燥的标准魏氏血沉管，并调至“0”刻度处。血沉管在室温下（1825）严格垂直放置。避免阳光直照、振动和血液外溢。1h后，读出血浆凹液面底部至沉降红细胞柱顶部之间距离，即为血沉结果。,、测定方法,57,动态监测法：根据血沉在中间40min中线性下降的原理，采用红外线技术每隔45s动态监测线性下降过程中红细胞沉降的位置，根据线性方程换算成魏氏法1h或2h的结果。,、测定方法,58,光密度法：意大利UDINE公司专利技术。红细胞缗钱状结构的形成对红细胞沉降的整个过程发挥关键作用，因此，全血的透光性将随着时间的变化而增加。该方法利用激光为光源，对毛细管中的微量全血进行照射，动态检测红细胞聚集和沉降的变化过程，而后通过光密度的变化换算成魏氏法的相关结果。,、测定方法,59,、影响血沉的因素,（）血浆因素正电荷的大分子蛋白质：血沉加快;负电荷的蛋白质：血沉减慢;脂类：胆固醇，甘油三脂，利于红细胞聚集，血沉加快;卵磷脂使血沉减慢;分子多聚体药物：使红细胞聚集，如葡萄糖，白明胶等。,60,、影响血沉的因素,（）红细胞因素红细胞数量：数量越少，阻力越小，血沉加快;红细胞形态：直径大，厚度薄，红细胞易形成缗钱状，血沉加快。,61,、影响血沉的因素,（）技术因素血沉管的位置：倾斜，血沉加快;温度：温度越高，血沉加快;抗凝剂的使用:,62,、临床意义,（1）生理性加快妇女月经期；妊娠3月以上；老年人，特别是70岁以上的高龄者。,63,（2）病理性加快,各种炎症组织损伤及坏死恶性肿瘤,高球蛋白血症,贫血,高胆固醇血症,64,第二节白细胞检验,无色有核细胞，分为中性粒细胞，嗜酸粒细胞，嗜碱粒细胞，淋巴细胞和单核细胞五种。,65,白细胞成熟过程,祖细胞,释放入外周血液,血循环,血管壁,边缘池,循环池,原粒细胞,早幼粒,中幼粒,晚幼粒,杆状核,分叶核,成熟池(髓内),分裂池(髓内),贮备池(髓内),66,一白细胞计数,是测定单位体积（通常是每升）血液中各种白细胞的总数。,67,、参考值范围,成人（410）109/L儿童（512）109/L6月2岁(1112）109/L新生儿（1520）109/L,68,、显微镜计数法,原理用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后，在显微镜下计数一定容积中的白细胞数，经换算求得每升血液中的白细胞总数。,69,、质量考核与评价,（1）经验控制与红细胞数比较RBC:WBC=500:1,与白细胞分布密度比较,70,(2)常规考核标准(RCS)(RoutineCheckingStandard),WBC4109/L,RCS30%；WBC(4.114.9)109/L,RCS10;骨髓增生性疾病：如真性红细胞增多症;其他：如淋巴细胞瘤，脾切后和某些转移癌。,87,4、淋巴细胞（Lymphocyte，L）,光镜结构,电镜结构,88,某些传染病：如风疹、百日咳等。某些传染病恢复期和肾移植术后发生排斥反应时;急慢性淋巴细胞性白血病；某些慢性感染:如结核病(WBC总数正常)。,（1）病理性增多,89,（2）病理性减少,多见于传染病急性期，长期接触放射线，细胞免疫缺陷等。各种引起N的原因均可导致L相对减少。,90,5、单核细胞（Monocyte，M）,光镜结构,电镜结构,91,（1）病理性增多,某些感染：如结核，伤寒，亚急性感染性心内膜炎或某些感染的恢复期;某些寄生虫病：如疟疾，黑热病等;某些血液病：单核细胞性白血病，恶性组织细胞病及骨髓增生异常综合征等。,92,病例分析1,女，20岁，农民，未婚。因咽痛、高热8天入院。当地医院查WBC0.58109/L,经抗感染治疗，上述症状无好转。并出现咳嗽，咳黄，痰，右上腹疼痛，尿频，尿急而收入院。一个多月前在当地诊为“甲亢”，服用他巴唑至今。,93,体征：体温39.6,急性重病容，口腔充血、水肿、溃疡，表面有脓性分泌物，双侧扁桃度肿大，双肺散在干湿性啰音。实验室检查：RBC3.961012/L,Hb107g/L,WBC1.0109/L,分类N0.40,L0.60,Plat96109/L.骨髓象粒系减少占3.5%。咽拭子培养、尿培养阳性。思考题：1、本例可作为诊断的线索是什么?2、本例的诊断是什么？诊断依据是什么？,94,病例分析2,病例：患者，女性，34岁，已婚。因面色苍白、头晕、乏力1年余，近2个月病情加重伴心悸来就诊。主诉：近1年前无明显诱因出现面色苍白、头晕、乏力，近2个月病情加重伴心悸曾到本院门诊部检查，并给予铁剂口服治疗1周。患者进食正常，无挑食习惯。睡眠好，体重无明显变化。尿色无异常，无便血和黑便，无鼻出血和齿龈出血。既往史：身体健康，无胃病史，无药物过敏史。结婚8