农产品检验课程设计--milk有限责任公司

农产品质量与安全专业农产品检验课程设计班级10农产品质量与安全时间2013年5月25日一序此课程设计报告书由第4组第（2）小组5名成员共同撰写，详情如下1指导老师陈志宏；2组长张孟；3各人负责具体内容成员负责任务张孟（组长）企业、产品简介，加工工艺，营养成分水分、蛋白质、脂肪的检测，日常人事安排张祥龙序的编写；添加剂检测，微生物检测张柳检测对象的内容，营养成分测定徐恒利企业质检规章制度的编写,微生物检验张兴食品检测实验室设备配置4交流情况除参加老师组织的讨论外，成员定期会面，分配任务，交流经验，并运用网络、移动设备等相互帮助、解决难题，分阶段的顺利完成了各项任务，具体情况如下DAY具体交流情况动员大会，老师具体讲解，分组，队员查阅资料初步了解1会议次数1次2小组成员交流、分配任务、着手准备资料，公司的初步建立3明确分工，对酸奶中的总酸进行测定，记录流程，收集实验结果4准备资料，明确仪器，开始测定酸奶中蛋白质的含量，记录流程，收集实验结果5最后一项指标，对酸奶中的水分进行测定过，记录流程，收集实验结果，材料汇总，编辑修改期间，成员之间讨论的内容涉及面广泛，包括A对生产对象的认识；B任务的分配，生产流程，加工工艺的确定；C撰写报告过程中遇到的问题（资料查阅的途径、网站，检测对象的决定，多种检测方法的选择，采用何种标准）；D课程设计报告的改进途径；E活动过程中的心得体；。F）检测过程中各种实验仪器的掌握，熟练地运用在5位成员与指导老师的共同努力下，农产品检验课程设计内容基本完成。在参与过程中，我们对专业知识、企业生产过程、实验室设置、各项指标的检测，有效的合作方式等内容有了进一步的了解和体会。二、企业总则1、企业概况11公司名称及含义名称MILK有限责任公司含义创造、创新、创利为企业任务，做到让顾客满意，放心为企业目标。12公司简介MILK有限责任公司是一家以乳制品的生产、经营、科研为一体的企业。主要产品有酸奶（公司主产品），奶粉（主打婴幼儿），纯牛奶，炼奶等。公司成立于2013年5月。坐落于全国闻名风景秀丽的琅琊山麓，醉翁亭旁，总占地2000多亩，地理位置优越，交通便利。拥有大型奶牛养殖基地，生产设备齐全，检验实验室完全标准化。公司在今后的发展中，会由小到大，由弱到强，并且始终坚持科学技术为第一生产力的经营理念，把提高产品质量和保证食品安全放在公司各项工作的首位。公司坚定的以质量第一，品质第一，做到让消费者放心，口碑好的社会影响。公司严把质量关，从奶牛选种，到产品流入市场都严格把好每一步质量关，并做到很好的售后服务。13市场我国人口众多，乳制品消费日益增长，我国乳制品行业在多年来生产量和消费量同步高速增长的同时，品种已发展到包括酸奶，纯牛奶，炼奶等品种，一些新型乳制品的产量正在迅速增长。我国乳制品消费和发达国家还有一定差我国乳制品消费和发达国家还有一定差距，并且安全系数低，随着居民收入水平提高，使乳制品生产量和消费量的持续增长成为可能，消费者对天然，安全，健康型乳制品的需求，促进了新品种的崛起。我国居民对新型乳制品的消费量还很低，对具有功能性的新型乳制品认识不足，这导致新型乳制品仍有较大的发展空间。不仅如此，随着人们健康意识的提高，在享受乳制品的同时，更多的是关注乳制品所带给我们的健康性。在这样的前景下，本公司本着质量第一，品质第一的原则而成立，将会引领新型乳制品市场，成为中国乳制品市场的一支独秀14质检部管理制度工作原则以质取胜，绿色健康，持续改进，顾客满意。规章制度本制度旨在加强部门管理，规范职员的行为，确定工作标准，提高员工的工作积极性和敬业精神，倡导员工进行精细化操作，使质检员工的个人素质得以提高，有利于团队建设，树立部门的良好形象。第一条本部门具备产品质量安全生产的生产设备、工艺设备和相关辅助设备，具有与确保产品质量合格相适应的原料处理、加工、贮存等厂房或者场所。具备产品质量安全的环境条件。第二条化验人员要树立“质量第一，顾客至上”的理念，严格遵守国家有关技术操作规范。第三条遵纪守法，严格执行产品质量检验的各项规章制度，严格遵守公司的各项规章制度。不断完善质量管理体系和质量保证体系。确保公正、科学、准确地进行检测工作。第四条质检部应负责检查产品的是否合格，切实保证产品的质量，并按“采样的检验制度”进行日常抽样检查。保证卖出的产品符合客户的要求。力争做到客户的投诉率为零。第五条食品加工工艺流程科学、合理，生产加工过程严格、规范，对生产关键点进行严格控制。并具有质量检验和计量检测手段。第六条化验仪器要做到定期检查，定期校验，以保证仪器的准确性和灵敏性。第七条所有员工工作期间必须穿工作服，时刻保持实验室的干净卫生。第八条采样化验人员要有高度的责任感，要严格按照采样粉碎、浓缩，烘干，制样，实验等操作流程操作第九条计量人员（包括司磅员、采制化人员）要树立“计量准确，服务一流”的意识，为公司提供及时准确的计量服务。做到“公平、公正、公开”，不得受外来因素的干扰作虚假计量凭证，损害公司和客户的利益。第十条对计量票据要细心核查、做到准确无误，凡手续不全和不符合公司规定的票据一律不予办理。第十一条要严把数量关，尽职尽责，坚守工作岗位。第十二条做好原始记录，保管好票据，并按公司规定及时上报。第十三条爱护计量器具，注意日常维护，保持计量器具经常处于良好的运行状态。化验人员称量要准确，操作要到位，误差只能在规定的范围以内，不能马马虎虎，为实验而实验。第十四条化验员要及时把结果汇报给领导，要对化验结果负责。若发现因个人原因造成不良后果要追究相关人员的责任。第十五条做好每次检验的原始记录，检验样品要按规定时间进行保存，不得随便丢弃，检验单要有相关人员的签名。第十六条化验员要及时把结果汇报本部门主管和生产部洗煤司机，要对化验结果负责任。若发现由于个人原因造成的不良后果，要追究相关人员的责任，问题严重的要报回公司处理。第十七条所有进厂原料必须天天按批次采样化验，从进厂开始就紧密跟踪质量，及至成品出厂。若发现产品不达标要分析查找原因，进一步采样化验，提出解决问题的方法。第十八条每个月定期注意推广新技术，新方法、新工艺、对本部的工作质量负责。第十九条注意操作安全，防止出现触电，碰伤，中毒等事故的发生。第二十条按时完成上级下达的命令，质检部工作人员都不许向公司谎报，瞒报检验结果，报告结果必须实事求是。第二十一条每天清扫好工作区域，保持环境清洁，仪器摆放整齐。2、质检部成员组成及具体分工21组织结构质检部主任张孟。副主任张柳。成员张祥龙，张兴，徐恒力。22质检部人员分工张孟负责主持日常工作及检验工序分析张柳负责收集样品的来源、特性、产地等资料张祥龙负责样品的分类及前处理张兴，徐恒力负责样品的理化检验及数据记录张兴，张祥龙负责数据分析处理，文档建立及填写检查报告张兴，徐恒力负责各种仪器的定期检查校验及维护23作息时间安排实行八小时工作制第一班8001600；第二班16000000；第三班0000800。3检测对象31原料检测原料乳的理化指标，感官指标，各种病原菌检验其结果是否符合国家标准。32配料检测配料白糖，香精，增稠剂，果料，防腐剂，益生菌。检测内容注意配料用量是否超标、是否使用了禁用的添加剂。33包装前质量检测感官检验乳品颜色纯正，风味优良，口感纯正，酸甜可口，无不良异味，和颜色明显发生变化。理化检验食品添加剂在规定的范围内、无违规的添加剂，无病原菌等。34包装后产品质量检测定期检查，排除包装不合格的产品，做到进入市场的产品全部合格。4、食品检测实验室设备41显微镜型号CG1B200用途用于微生物的观察及研究。42天平电子天平（001KG），分析天平（01MG）。型号CP224S（STARTOURIUS）。用途称重，分析取样。43酸碱滴定管型号TXHT25北京中西远大科技有限公司。用途用于酸碱滴定的测定。44台式电热鼓风干燥箱型号DHG9073BC1上海福玛实验室设备有限公司。用途干燥、烘焙熔蜡、灭菌。45台式离心机型号IECMULTI（FISHERSCIENTIFIC）。用途样品的快速分离。46凯氏定氮仪型号KDN（上海纤检仪器有限公司）。用途测定样品中蛋白质的含量。47索氏提取仪型号SCT02（北京卓川电子科技有限公司）。用途样品中粗脂肪的提取。48离子色谱仪型号CIC100（青岛德尔金环保科技有限公司）。用途样品中的阴、阳离子的分析。49原子荧光分光光度计、型号PF6（北京普析通用仪器有限责任公司）。用途用于样品中汞、砷、铅等元素的痕量分析。410可见分光光度计型号SP721E（上海光谱仪器有限公司）。用途用于蛋白质定量以及细菌生长浓度的定量。411光照培养箱型号LRH150G（韶关市泰宏医疗器械有限公司）。用途储藏菌种、生物培养。412高压灭菌器型号YXQLS505（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）。用途对在样品检测过程中要求无菌的器械和器皿进行消毒灭菌。413无菌操作台型号SWCF/FD（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）。用途在无菌环境中对样品进行传染病毒性实验。414质构仪型号CT3（美国BROOKFIELD公司）。用途测定样品的硬度、弹性、脆性、黏性等理化指标。415高效液相色谱仪型号AGLIENT1200（安捷伦科技有限公司）用途进行样品的定性和定量分析416气相色谱质谱联用仪型号GCMSQP2010PLUS（深圳市深沅恒科技有限公司）。用途快速获得样品中各组分的质谱信息及含量。417液相色谱质谱联用仪型号LCMS2020（杭州瑞析科技有限公司）。用途快速获得样品中各组分的质谱信息及含量三、酸奶加工与检验1、酸奶加工工艺11制作酸奶的原料生产酸奶需要的主料主要包括原料奶、辅料和发酵剂。生产酸奶必需无抗生素的新鲜牛奶。理化指标脂肪32，蛋白质28，干物质108，酸度1618度，72酒精试验阴性，活性状态良好，煮沸无异常。而辅料主要有甜味剂和稳定剂。最常用的甜味剂为白砂糖，添加量不应超过12为防止产品出现分层或沉淀，保持产品的外观性能而添加到食品中的添加物称为稳定剂。常用的稳定剂有果胶和羧甲基纤维素钠。生产酸奶一般采用冻干菌种，即保加利亚乳杆菌和嗜热乳链球菌混合发酵剂，嗜热链球菌产酸，保加利亚乳杆菌产酸、产香。酸奶的发酵是利用乳糖在乳酸菌的作用下转化成乳酸，随着乳酸的形成，溶液的PH值逐渐达到酪蛋白的等电点（PH值为4647），使酪蛋白聚集沉降，从而形成半固体状态的凝胶体物质。12酸奶生产流程鲜奶暂存鲜奶净乳（净乳机）鲜奶冷却鲜奶暂储原辅料混配（高速搅拌缸）料液预热（板式杀菌机）料液均质（高压均质机）巴氏杀菌（管氏杀菌机）料液保温杀菌（保温杀菌管）料液冷却（板式热交换器）菌种投入（酸奶发酵罐）保温培养（酸奶发酵罐）发酵终止（酸奶发酵罐）半成品冷却暂存无菌混料（半成品储罐）产品包装（果料）成品冷储（浅冷库房）。13注意事项净乳温度6570，杀菌温度7275,均质压力100帕；杀菌温度95，保温大于10分钟；培养温度421，接种后搅拌10分钟；接将发酵剂进行充分搅拌，达到完全破坏凝乳的程度，接种量可按培养时的温度和时间，以及发酵剂的产酸能力灵活处理，一般接种量为23，制作酸奶常用的发酵剂为保加利亚杆菌和嗜热链球菌的混合菌种，其比例通常为11。接种前静止培养4243，至滴定酸度80度终止发酵；冷却至1825；包装环境符合清洁作业区要求（空气落菌数15分钟少于30个，不得检出大肠杆菌），包装机用热水及过氧乙酸杀菌。经过接种并充分搅拌的牛奶要立即连续的灌装到销售用的容器中，可根据市场需要选择容器种类，在灌装前需对容器进行蒸汽灭菌，并要保证灌装室接近无菌状态。同时要注意，杀菌过程中若发酵设备的管道中残留有化学物质、微生物或发酵设备管道中过热均会影响发酵过程的顺利进行和酸乳产品的质量。凝固型酸奶生产的前期工艺与搅拌型酸奶相同，在接种菌种并搅拌10分钟后进行灌装。灌装好的半成品在4243的无菌恒温室静止培养至滴定酸度80度终止发酵；冷却至1825。酸奶的包装可使用瓷杯、玻璃杯、塑料杯、纸杯等，包装过程中必须无菌操作，包装必须密封，防止细菌侵入。成品转入4的冷库进行24小时贮存。成品贮存和销售过程中要保持低温，防止乳酸菌继续发酵。2、检测对象21原料奶质量控制奶牛饲养奶牛饲养应符合GBL65681996奶牛场卫生及检疫规范的要求，符合NY50462001无公害食品奶牛饲养兽药使用准则，符合NY5047200L无公害食品奶牛兽医防疫准则，符合NY50482001无公害食品奶牛饲养饲料使用准则和NY/T50492001奶牛饲养管理准则的要求。通过比较50头和250头的奶牛规模的牧场达到安全标准的支出水平，得出250头甚至更多的奶牛规模不会给达到高质量安全标准增添更多负担的结论。泌乳牛在正常情况下禁止使用任何药物，必须用药时，在药物残留期间的牛奶不应作为商品牛奶出售。同时注意及时补充奶牛的营养。挤奶的控制挤奶设备、牛奶过滤器滤芯和滤网等必须每班都要清洗和彻底消毒。挤奶前要采取乳头药浴的操作，防止细菌感染。同时保证挤奶员工和挤奶时间的相对稳定，减少诱发奶牛乳腺炎和其他疾病的几率。贮藏运输运输奶罐车交奶后必须清洗消毒罐体。储奶罐内无奶后必须及时清洗消毒后才可再次储奶，并注意储奶罐各个管道死角的清洗。未能打入车罐的残留原料奶不得与新打入储奶罐原料奶混合。避免多次挤奶混和，原则上要求每次挤奶后及时运输，避免混合。防止交奶时污染，对奶泵及输奶管进行消毒后使用，可与储奶罐一并清洗消毒。使用有隔热或制冷设施的奶罐车进行运输，夏季在清晨或夜间运输牛奶，在运输中奶温不应高于10。运输原料奶必须及时装卸，防止奶温升高，避免将微生物数量级不同的原料奶混合。运输过程中须要防止强烈振荡而改变奶的组织状态所引起奶的变质。22配料检测配料酸乳、益生菌、果料、香精、砂糖、增稠剂、稳定剂，水质检测内容酸奶检测要检测的项目有，酸度、乳酸菌、总固体、脂肪、蛋白、糖、大肠菌、霉菌、酵母等23产品检测231包装是否完整包装符合食品包装材料要求。1）酸奶包装袋的阻隔性如氧气透过率、水蒸气透过率测试，用于判断所用包装材料的阻隔性是否可以满足所包装食品的需要。2）酸奶包装袋的密封性如密封与泄露、爆破压力测试，可以及时发现成品包装是否有泄露问题，确定发生泄露的位置和机械强度薄弱的部位。如热封强度测试可判断热封强度是否满足食品内容物的要求，并确定热封不良的部位。3）酸奶包装袋的物理机械性能如拉断力与断裂伸长率、抗穿刺强度、抗摆锤冲击性能、剥离强度等测试，可综合判断包装袋的韧性、耐穿刺性及耐揉搓性等物理机械性能是否符合包装与运输过程的需求。通过以上针对包装材料的性能检测，基本可以做到对于食品包材质量的控制，杜绝因包装材料不合格而导致的酸奶包装袋涨袋的问题。24产品质量检测1感官特性25营养组份分析（1）乳糖蔗糖的测定方法高效液相色谱法依据GB541352010原理试样中的乳糖、蔗糖经提取后，利用高效液相色谱柱分离，用示差折光检测器或蒸发光散射检测器检测，外标法进行定量。试剂和材料除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。乙腈色谱纯。乳糖标准贮备液（20MG/ML）称取在942烘箱中干燥2H的乳糖标样2G（精确至01MG），溶于水中，用水稀释至100ML容量瓶中。放置4冰箱中。乳糖标准工作液分别吸取乳糖标准贮备液（431）0ML，1ML，2ML，3ML，4ML，5ML于10ML容量瓶中，用乙腈（41）定容至刻度。配成乳糖标准系列工作液，浓度分别为0MG/ML，2MG/ML，4MG/ML，6MG/ML，8MG/ML，10MG/ML。蔗糖标准溶液（10MG/ML）称取在1052烘箱中干燥2H的蔗糖标样1G（精确到01MG），溶于水中，用水稀释至100ML容量瓶中。放置4冰箱中。蔗糖标准工作液分别吸取蔗糖标准溶液（433）0ML，1ML，2ML，3ML，4ML，5ML于10ML容量瓶中，用乙腈41定容至刻度。配成蔗糖标准系列工作液，浓度分别为0MG/ML，1MG/ML，2MG/ML，3MG/ML，4MG/ML，5MG/ML。仪器和设备天平感量为01MG。高效液相色谱仪，带示差折光检测器或蒸发光散射检测器。超声波振荡器。分析步骤试样处理称取固态试样1G或液态试样称取25G（精确到01MG）于50ML容量瓶中，加15ML5060水溶解，于超声波振荡器中振荡10MIN，用乙腈（41）定容至刻度，静置数分钟，过滤。取50ML过滤液于10ML容量瓶中，用乙腈（41）定容，通过045M滤膜过滤，滤液供色谱分析。可根据具体试样进行稀释。测定参考色谱条件色谱柱氨基柱46MM250MM，5M，或具有同等性能的色谱柱；流动相乙腈42水7030；流速1ML/MIN；柱温35；进样量10L；示差折光检测器条件温度3337；蒸发光散射检测器条件飘移管温度8590；气流量25L/MIN；撞击器关。标准曲线的制作将标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中，测定相应的峰面积或峰高，以峰面积或峰高为纵坐标，以标准工作液的浓度为横坐标绘制标准曲线。试样溶液的测定将试样溶液（61）注入高效液相色谱仪中，测定峰面积或峰高，从标准曲线中查得试样溶液中糖的浓度。分析结果的表述试样中糖的含量按式（1）计算X100CVN/（1000M）（1）式中X试样中糖的含量，单位为克每百克（G/100G）；C样液中糖的浓度，单位为毫克每毫升（MG/ML）；V试样定容体积，单位为毫升（ML）；N样液稀释倍数；M试样的质量，单位为克（G）。以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。精密度在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的52蛋白质含量的测定方法凯氏定氮法。依据GB500952010（食品中蛋白质的测定）。原理食品中的蛋白质在催化加热条件下被分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵。碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后以硫酸或盐酸标准滴定溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。试剂与设备浓硫酸、硫酸钾、400G/L氢氧化钠溶液、40G/L硼酸吸收液、甲基红溴甲酚绿混合指示剂、01000MOL/L盐酸标准溶液。凯氏烧瓶（500ML）、消化装置、吸收装置、滴定装置。操作方法称取充分混匀的固体试样022G，移入干燥500ML定氮瓶中，加入05G硫酸铜、硫酸钾10G及20ML浓硫酸，轻摇后于瓶口放一小漏斗，轻轻摇匀后，安装消化装置，与凯氏烧瓶口放一漏斗，并将瓶口以45角斜支于有小孔的石棉网上。小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色并澄清透明后，再继续加热051H。取下放冷，小心加入200ML水，再放冷，加入玻璃珠数粒以防止蒸馏时暴沸。连好蒸馏装置，塞紧瓶口，冷凝管下插入吸收瓶液面下。放松夹子，通过漏斗加入70至80ML，400G/L氢氧化钠溶液，并摇动凯氏烧瓶，至瓶内溶液变为深蓝色，或产生黑色沉淀，再加入100ML蒸馏水，夹紧夹子，加热蒸馏，至氨全部蒸出。将冷凝管提离液面，用蒸馏水冲洗管口，继续蒸馏1MIN，用表面皿接几滴馏出液，以奈氏试剂检查，如无红棕色物质产生，表示蒸馏完毕，即可停止加热。将上述吸收液用01000MOL/L盐酸标准溶液直接滴定至蓝色变为微红色即为终点，记录盐酸溶液用量，同时做一试剂空白试验，记录空白试验消耗盐酸标准溶液的体积。结果的计算103421VMFCVX式中试样中蛋白质的含量，单位为克每百克（G/100G）；X试液消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升（ML）；1V试剂空白消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积,单位为毫升（ML）；2吸取消化液的体积，单位为毫升（ML）；3硫酸或盐酸标准滴定溶液浓度，单位为摩尔每升（MOL/L）；00140C10ML硫酸C1/2H2SO41000MOL/L或盐酸CHCL1000MOL/L标准滴定溶液相当的氮的质量，单位为克（G）；试样的质量，单位为克（G）；M氮换算为蛋白质的系数。F（3）脂肪含量的测定方法第一法依据GB541332010。原理用乙醚和石油醚抽提样品的碱水解液，通过蒸馏或蒸发去除溶剂，测定溶于溶剂中的抽提物的质量。试剂和材料除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。淀粉酶酶活力15U/MG。氨水（NH4OH）质量分数约25。注可使用比此浓度更高的氨水。乙醇（C2H5OH）体积分数至少为95。乙醚（C4H10O）不含过氧化物，不含抗氧化剂，并满足试验的要求。石油醚（CNH2N2）沸程3060。混合溶剂等体积混合乙醚（44）和石油醚（45），使用前制备。碘溶液（I2）约01MOL/L。刚果红溶液（C32H22N6NA2O6S2）将1G刚果红溶于水中，稀释至100ML。注可选择性地使用。刚果红溶液可使溶剂和水相界面清晰，也可使用其他能使水相染色而不影响测定结果的溶液。盐酸（6MOL/L）量取50ML盐酸（12MOL/L）缓慢倒入40ML水中，定容至100ML，混匀。仪器和设备分析天平感量为01MG。离心机可用于放置抽脂瓶或管，转速为500转/分钟600转/分钟，可在抽脂瓶外端产生80G90G的重力场。烘箱，水浴。抽脂瓶抽脂瓶应带有软木塞或其他不影响溶剂使用的瓶塞（如硅胶或聚四氟乙烯）。软木塞应先浸于乙醚中，后放入60或60以上的水中保持至少15MIN，冷却后使用。不用时需浸泡在水中，浸泡用水每天更换一次。注也可使用带虹吸管或洗瓶的抽脂管（或烧瓶），但操作步骤有所不同，见附录A中规定。接头的内部长支管下端可成勺状。分析步骤用于脂肪收集的容器（脂肪收集瓶）的准备于干燥的脂肪收集瓶中加入几粒沸石，放入烘箱中干燥1H。使脂肪收集瓶冷却至室温，称量，精确至01MG。注脂肪收集瓶可根据实际需要自行选择。空白试验空白试验与样品检验同时进行，使用相同步骤和相同试剂，但用10ML水代替试样。测定巴氏杀菌乳、灭菌乳、生乳、发酵乳、调制乳称取充分混匀试样10G（精确至00001G）于抽脂瓶中。加入20ML氨水（42），充分混合后立即将抽脂瓶放入655的水浴中，加热15MIN20MIN，不时取出振荡。取出后，冷却至室温。静止30S后可进行下一步骤。加入10ML乙醇（43），缓和但彻底地进行混合，避免液体太接近瓶颈。如果需要，可加入两滴刚果红溶液（48）。加入25ML乙醚（44），塞上瓶塞，将抽脂瓶保持在水平位置，小球的延伸部分朝上夹到摇混器上，按约100次/MIN振荡1MIN，也可采用手动振摇方式。但均应注意避免形成持久乳化液。抽脂瓶冷却后小心地打开塞子，用少量的混合溶剂冲洗塞子和瓶颈，使冲洗液流入抽脂瓶。加入25ML石油醚（45），塞上重新润湿的塞子，按6313所述，轻轻振荡30S。将加塞的抽脂瓶放入离心机中，在500转/分钟600转/分钟下离心5MIN。否则将抽脂瓶静止至少30MIN，直到上层液澄清，并明显与水相分离。小心地打开瓶塞，用少量的混合溶剂（46）冲洗塞子和瓶颈内壁，使冲洗液流入抽脂瓶。如果两相界面低于小球与瓶身相接处，则沿瓶壁边缘慢慢地加入水，使液面高于小球和瓶身相接处以便于倾倒。将上层液尽可能地倒入已准备好的加入沸石的脂肪收集瓶中，避免倒出水层。用少量混合溶剂冲洗瓶颈外部，冲洗液收集在脂肪收集瓶中。要防止溶剂溅到抽脂瓶的外面。向抽脂瓶中加入5ML乙醇，用乙醇冲洗瓶颈内壁，按6312所述进行混合。重复6313操作，再进行第二次抽提，但只用15ML乙醚和15ML石油醚。重复63126318操作，再进行第三次抽提，但只用15ML乙醚和15ML石油醚。注如果产品中脂肪的质量分数低于5，可只进行两次抽提。合并所有提取液，既可采用蒸馏的方法除去脂肪收集瓶中的溶剂，也可于沸水浴上蒸发至干来除掉溶剂。蒸馏前用少量混合溶剂冲洗瓶颈内部。将脂肪收集瓶放入1022的烘箱中加热1H，取出脂肪收集瓶，冷却至室温，称量，精确至01MG。重复63112操作，直到脂肪收集瓶两次连续称量差值不超过05MG，记录脂肪收集瓶和抽提物的最低质量。为验证抽提物是否全部溶解，向脂肪收集瓶中加入25ML石油醚，微热，振摇，直到脂肪全部溶解。如果抽提物全部溶于石油醚中，则含抽提物的脂肪收集瓶的最终质量和最初质量之差，即为脂肪含量。若抽提物未全部溶于石油醚中，或怀疑抽提物是否全部为脂肪，则用热的石油醚洗提。小心地倒出石油醚，不要倒出任何不溶物，重复此操作3次以上，再用石油醚冲洗脂肪收集瓶口的内部。最后，用混合溶剂冲洗脂肪收集瓶口的外部，避免溶液溅到瓶的外壁。将脂肪收集瓶放入1022的烘箱中，加热1H，按63112和63113所述操作。取63113中测得的质量和63115测得的质量之差作为脂肪的质量。注选择带有虹吸管或洗瓶附件的抽脂管时，步骤如附录A（标准的附录）所述。乳粉和乳基婴幼儿食品称取混匀后的试样，高脂乳粉、全脂乳粉、全脂加糖乳粉和乳基婴幼儿食品约1G（精确至00001G），脱脂乳粉、乳清粉、酪乳粉约15G（精确至00001G）。不含淀粉样品加入10ML655的水，将试样洗入抽脂瓶的小球中，充分混合，直到试样完全分散，放入流动水中冷却。含淀粉样品将试样放入抽脂瓶中，加入约01G的淀粉酶（41）和一小磁性搅拌棒，混合均匀后，加入8ML10ML45的蒸馏水，注意液面不要太高。盖上瓶塞于搅拌状态下，置65水浴中2H，每隔10MIN摇混一次。为检验淀粉是否水解完全可加入两滴约01MOL/L的碘溶液（47），如无蓝色出现说明水解完全，否则将抽脂瓶重新置于水浴中，直至无蓝色产生。冷却抽脂瓶。以下操作同631163116。炼乳脱脂炼乳、全脂炼乳和部分脱脂炼乳称取约3G5G、高脂炼乳称取约15G（精确至00001G），用10ML蒸馏水，分次洗入抽脂瓶小球中，充分混合均匀。以下操作同631163116。奶油、稀奶油先将奶油试样放入温水浴中溶解并混合均匀后，称取试样约05G样品（精确至00001G），稀奶油称取1G于抽脂瓶中，加入8ML10ML45的蒸馏水。加2ML氨水充分混匀。以下操作同631163114。干酪称取约2G研碎的试样（精确至00001G）于抽脂瓶中，加10ML盐酸（49），混匀，加塞，于沸水中加热20MIN30MIN。以下操作按631263116操作。分析结果表述样品中脂肪含量按式（1）计算X100（M1M2）（M3M4）/M1式中X样品中脂肪含量，单位为克每百克（G/100G）；M样品的质量，单位为克（G）；M163113中测得的脂肪收集瓶和抽提物的质量，单位为克（G）；M2脂肪收集瓶的质量，或在有不溶物存在下，63115中测得的脂肪收集瓶和不溶物的质量，单位为克（G）；M3空白试验中，脂肪收集瓶和63113中测得的抽提物的质量，单位为克（G）；M4空白试验中脂肪收集瓶的质量，或在有不溶物存在时，中测得的脂肪收集瓶和不溶物的质量，单位为克（G）。以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果之差应符合脂肪含量15，03G/100G；脂肪含量515，02G/100G；脂肪含量5，01G/100G。其他实验过程注意事项空白试验检验试剂要进行空白试验，以消除环境及温度对检验结果的影响。进行空白试验时在脂肪收集瓶中放入1G新鲜的无水奶油。必要时，于每100ML溶剂中加入1G无水奶油后重新蒸馏，重新蒸馏后必须尽快使用。空白试验与样品测定同时进行对于存在非挥发性物质的试剂可用与样品测定同时进行的空白试验值进行校正。抽脂瓶与天平室之间的温差可对抽提物的质量产生影响。在理想的条件下（试剂空白值低，天平室温度相同，脂肪收集瓶充分冷却），该值通常小于05MG。在常规测定中，可忽略不计。如果全部试剂空白残余物大于05MG，则分别蒸馏100ML乙醚和石油醚，测定溶剂残余物的含量。用空的控制瓶测得的量和每种溶剂的残余物的含量都不应超过05MG。否则应更换不合格的试剂或对试剂进行提纯。乙醚中过氧化物的检验取一只玻璃小量筒，用乙醚冲洗，然后加入10ML乙醚，再加入1ML新制备的100G/L的碘化钾溶剂，振荡，静置1MIN，两相中均不得有黄色。也可使用其他适当的方法检验过氧化物。在不加抗氧化剂的情况下，为长久保证乙醚中无过氧化物，使用前三天按下法处理将锌箔削成长条，长度至少为乙醚瓶的一半，每升乙醚用80CM锌箔使用前，将锌片完全浸入每升中含有10G五水硫酸铜和2ML质量分数为98的硫酸中1MIN，用水轻轻彻底地冲洗锌片，将湿的镀铜锌片放入乙醚瓶中即可。也可以使用其他方法，但不得影响检测结果。（4）过氧化值测定方法碘量法。依据GB/T55382005（动植物油脂过氧化值测定）。原理在酸性条件下，脂肪中的过氧化物与过量的KI反应生成I2，析出的I2用硫代硫酸钠NA2S2O3溶液滴定，根据硫代硫酸钠的用量来计算油脂的过氧化值。求出每千克油中所含过氧化物的毫摩尔数，即为脂肪的过氧化值（POV）测定方法称取混合均匀的样品2000G（精确到0001G）置于干燥的碘量瓶底部，加入20ML氯仿冰乙酸混合液，轻轻摇动充分混合；加入2ML饱和碘化钾溶液，加塞后摇匀，在暗处放置5MIN；取出碘量瓶，立即加入50ML蒸馏水，充分混合后，立即用0001MOL/LNA2S2O3标准溶液滴定至水层呈浅黄色时，加入1ML淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失为止，记下体积V1，并计算POV。试剂仪器分析天平、具塞锥形瓶、移液管量筒、滴定管结果处理过氧化值按下式计算式中用于测定的硫代硫酸钠标准溶液（66）的体积，ML；1V用于空白的硫代硫酸钠标准溶液（66）的体积，ML；0硫代硫酸钠标定浓度MOL/L；试样的质量G。（5）亚硝酸盐与硝酸盐的测定方法离子色谱法。参考标准GB5009332010（食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定）。原理试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，采用相应的方法提取和净化，以氢氧化。钾溶液为淋洗液，阴离子交换柱分离，电导检测器检测。以保留时间定性，外标法定量。样品处理用四分法取适量或取全部，用食物粉碎机制成匀浆备用。称取试样匀浆2G（精确至001G），以80ML水洗入100ML容量瓶中，超声提取30MIN，每5MIN振摇一次，保持固相完全分散。于75水浴中放置5MIN，取出放置至室温，加水稀释至刻度。溶液经滤纸过滤后，取部分溶液于10000转/分钟离心15MIN，上清液备用。实验条件离子色谱仪包括电导检测器，配有抑制器，高容量阴离子交换柱，50L定量环。色谱柱氢氧化物选择性，可兼容梯度洗脱的高容量阴离子交换柱，如DIONEXIONPACAS11HC4MM250MM（带IONPACAG11HC型保护柱4MM50MM）1，或性能相当的离子色谱柱。淋洗液氢氧化钾溶液，浓度为6MMOL/L70MMOL/L；洗脱梯度为6MMOL/L30MIN，70MMOL/L5MIN，6MMOL/L5MIN；流速10ML/MIN。抑制器连续自动再生膜阴离子抑制器或等效抑制装置。检测器电导检测器，检测池温度为35。进样体积50L（可根据试样中被测离子含量进行调整）。净化柱包括C18柱、AG柱和NA柱或等效柱。结果处理试样中亚硝酸盐（以NO2计）或硝酸盐（以NO3计）含量按下式计算式中X试样中亚硝酸根离子或硝酸根离子的含量，单位为毫克每千克（MG/KG）；C测定用试样溶液中的亚硝酸根离子或硝酸根离子浓度，单位为毫克每升（MG/L）；CO试剂空白液中亚硝酸根离子或硝酸根离子的浓度，单位为毫克每升（MG/L）；V试样溶液体积，单位为毫升（ML）；F试样溶液稀释倍数；M试样取样量，单位为克（G）。（6）乳制品杂质度的测定原理试样经过滤板过滤、冲洗，根据残留于过滤板上的可见带色杂质的数量确定杂质量。仪器和设备过滤设备杂质度过滤机或配有可安放过滤板漏斗的2000ML2500ML抽滤瓶。过滤板直径32MM，单位面积质量为135G/M，符合附录A的要求，过滤时通过面积的直径为286MM。杂质度标准板。杂质度标准板的制作方法见附录B。天平感量为01G。分析步骤液体乳样量取500ML；乳粉样称取625G（精确至01G），用8倍水充分调和溶解，加热至60；炼乳样称取125G（精确至01G），用4倍水溶解，加热至60，于过滤板上过滤，为使过滤迅速，可用真空泵抽滤，用水冲洗过滤板，取下过滤板，置烘箱中烘干，将其上杂质与标准杂质板比较即得杂质度。当过滤板上杂质的含量介于两个级别之间时，判定为杂质含量较多的级别。分析结果的表述与杂质度标准比较得出的过滤板上的杂质量，即为该样品的杂质度。精密度按本标准所述方法对同一样品所作的两次重复测定，其结果应一致，否则应重复再测定两次。（7）水分的测定依据GB/T541381997方法提要将样品放入1022的烘箱中加热，直至恒量，所失去的质量即为水分含量。仪器常用实验室仪器及分析天平灵敏度为01MG。适当的皿最好是铝、镍、不锈钢或玻璃皿，配有移动盖，直径为5070MM，高度为25MM。干燥器配有有效干燥剂。鼓风式烘箱可控制恒温在1022，烘箱中的温度应均匀。带密封盖的瓶子用于混合乳粉。操作步骤样品的制备将样品全部移入两倍于样品体积的干燥、带盖的瓶中，旋转振荡，使之充分混合。测定将皿和盖（不要放在皿上）放入1022的烘箱中，加热1H，加盖，然后将皿移入干燥器中，冷却至室温，称量。将约35G样品放入皿中，加盖，迅速准确称量。将皿和盖（不要放在皿上）放入1022的烘箱中，加热3H。加盖，将皿移入干燥器中，冷却至室温，并迅速准确地称量。再将皿和盖（不要放在皿上）放入1022的烘箱中，加热1H。加盖后移入干燥器中，冷却至室温，迅速称量。重复上述操作，直到两次连续称量质量之差不超过00005G。结果表示样品中的水分（）100321M1M2M3（1）式中M1加入样品后皿和盖的最初质量，G；M2样品烘干后两次称量获得的较小的质量，G；M3样品的质量，G。6允许差两次测得结果的最大偏差不得超过005。国家技术监督局19970528批准19980901实施（8）总酸的测定方法常规法依据GB5413342010原理以酚酞作指示剂，硫酸钴作参比颜色，用01MOL/L氢氧化钠标准溶液滴定100ML干物质为12的复原乳至粉红色所消耗的体积经计算确定其酸度。试剂和材料除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的三级水。氢氧化钠标准溶液同41。参比溶液将3G七水硫酸钴（COSO47H2O）溶解于水中，并定容至100ML。酚酞指示液称取05G酚酞溶于75ML体积分数为95的乙醇中，并加入20ML水，然后滴加氢氧化钠溶液（81）至微粉色，再加入水定容至100ML。仪器和设备分析天平感量为1MG。滴定管分刻度为01ML，可准确至005ML。分析步骤样品的制备同测定试样的称取及溶解同621、622。向其中的一只锥形瓶中加入20ML参比溶液（82），轻轻转动，使之混合，得到标准颜色。如果要测定多个相似的产品，则此标准溶液可用于整个测定过程，但时间不得超过2H。向第二只锥形瓶中加入20ML酚酞指示液（83），轻轻转动，使之混合。用滴定管向第二只锥形瓶中滴加氢氧化钠溶液（81），边滴加，边转动烧瓶，直到颜色与标准溶液的颜色相似，且5S内不消退，整个滴定过程应在45S内完成。记录所用氢氧化钠溶液的毫升数，精确至005ML，代入公式（1）计算。分析结果的表述式中X112C1V1/01M11WX1试样的酸度，单位为度（T）；C1氢氧化钠标准溶液的浓度，单位为摩尔每升（MOL/L）；V1滴定时所用氢氧化钠溶液的毫升数，单位为毫升（ML）；M1称取样品的质量，单位为克（G）；W试样中水分的质量分数，单位为克每百克（G/100G）；1212G乳粉相当100ML复原乳脱脂乳粉应为9，脱脂乳清粉应为7；01酸度理论定义氢氧化钠的摩尔浓度，单位为摩尔每升（MOL/L）。以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。注若以乳酸含量表示样品的酸度，那么样品的乳酸含量（G/100G）T0009。T为样品的滴定酸度（0009为乳酸的换算系数，即1ML01MOL/L的氢氧化钠标准溶液相当于0009G乳酸。）精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过10T26产品中食品添加剂残留量的检测（1）酸奶中三聚氰胺的测定方法高效液相色谱法原理试样用三氯乙酸溶液乙腈提取，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用高效液相色谱测定，以外标法定量。样品处理1）提取A液态奶、奶粉、酸奶等。城区2G（精确至001G）试样于50ML具塞塑料离心管中，加入15ML乙腈，超声提取10MIN，再震荡提取10MIN后，以不低于4000R/MIN离心10MIN。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至25ML，移取5ML滤液，加入5ML水混匀后作待净化液。B奶酪、奶油和巧克力等。称取2G（精确至001G）试样于研钵中，加入适量海砂（试样质量的46倍）研磨成干粉状，转移至50ML具塞塑料离心管中，用15ML三氯乙酸溶液分数次清洗研钵，清洗液转入离心管中，再往离心管中加入5ML乙腈，余下操作同上。2）净化将上述待净化液转移至固相萃取柱中，依次用3ML水和3ML甲醇洗涤，抽至近干后，用6ML氨化甲醇溶液洗脱。整个固相萃取过程流速不超过1ML/MIN。洗脱液于50下用氮气吹干，残留物（相当于04G样品）用1ML流动相定容，涡旋混合1MIN，过微孔滤膜后，供HPLC测定。HPLC参考条件色谱柱C8柱，250MM46MMID，5M，或相当着；C18柱，250MM46MMID，5M，或相当着。流动相C8柱，离子对试剂缓冲液乙腈（8515，体积比），混匀；C18柱，离子对试剂缓冲液乙腈（9010，体积比），混匀。流速10ML/MIN柱温40M，波长240NM进样量20L标准曲线的绘制用流动相将三聚氰胺标准贮备液逐渐稀释得到的浓度为08G/ML，2G/ML，20G/ML，40G/ML，80G/ML的标准工作液，浓度由低到高进样检测，以峰面积浓度作图，得到标准曲线回归方程。定量测定待测样液中三聚氰胺的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围应稀释后再进样分析结果处理试样中三聚氰胺的含量由色谱数据处理软件或按下式计算获得。X（ACV1000）F/ASM1000式中，X为试样中三聚氰胺的含量，MG/KG；A为样液中三聚氰胺的峰面积；C为标准溶液中三聚氰胺的浓度，G/ML；V为样液最终定容体积，ML；AS为标准溶液中三聚氰胺的峰面积；M为试样的质量，G；F为稀释倍数。2苯甲酸钠和山梨酸钾的测定方法气相色谱法原理样品酸化后，用乙醚提取苯甲酸、山梨酸，用带氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行分离测定，与标准系列比较定量，再分别乘以换算系数，求出苯甲酸钠、山梨酸钾的量。样品提取称取250G事先混合均匀的样品，置于25ML带塞量筒中，加05ML盐酸（11）酸化，用15ML10ML乙醚提取2次，每次振摇1MIN，将上层乙醚提取液吸入另一个25ML带塞量筒中。合并乙醚提取液，用3ML氯化钠酸性溶液（40G/L）洗涤2次，静止15MIN，用滴管将乙醚层通过无水硫酸钠滤入25ML容量瓶中，加入乙醚至刻度，混匀。准确吸取5ML乙醚提取液于10ML带刻度试管中，置40水浴上挥发干，加入2ML丙酮溶解残渣，备用。色谱条件色谱柱玻璃柱，3MM2M，内装涂以5DEGS1H3PO4固定液的6080目CHROMOSORBWAW。流速载气为氮气，50ML/MIN。温度进样口230，检测器230，柱温170。操作方法进样2L标准系列中各浓度标准使用液于气相色谱仪中，可测得不同浓度山梨酸、苯甲酸的峰高，以浓度为横坐标，相应的峰高值为纵坐标，绘制标准曲线。同时进样2L样品溶液。测得峰高与标准曲线比较定量。结果计算X（M11000）/M25/25V2/V11000G/KG或G/L式中X为样品中苯甲酸或山梨酸的含量，G/KG；M1为测定样品液中苯甲酸或山梨酸的质量，G；M2为样品的质量，G；V1为加入丙酮的体积，ML；V2为测定时进样的体积，ML。27产品微生物检测（1）金黄色葡萄球菌检测方法方法金黄色葡萄球菌BAIRDPARKER平板计数。依据GB4789102010（食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验）。原理连续的适宜稀释度的样品匀液，接种BAIRDPARKER平板后，平板计数及血浆凝固酶试验，对金黄色葡萄球菌进行定性定量检测。样品处理称取25G样品置盛有225ML磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，800010000R/MIN均质12MIN，或置盛有225ML稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打12MIN，制成110的样品匀液。用1ML无菌吸管或微量移液器吸取110样品匀液1ML，沿管壁缓慢注于盛有9ML稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1支1ML无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1100的样品匀液。试剂仪器10氯化钠胰酪胨大豆肉汤、75氯化钠肉汤、血琼脂平板、BAIRDPARKER琼脂平板、脑心浸出液肉汤等。检验流程制备23个连续的10倍适宜稀释度的样品匀液，接种BAIRDPARKER平板后36，422H后，进行平板计数及血浆凝固酶试验，结果阳性即检出金黄色葡萄球菌。结果处理对金黄色葡萄球菌进行定性定量检测后，按下式计算T样品中金黄色葡萄球菌菌落数；A某一稀释度典型菌落的总数；B某一稀释度血浆凝固酶阳性的菌落数；C某一稀释度用于血浆凝固酶试验的菌落数；D稀释因子。根据BAIRDPARKER平板上金黄色葡萄球菌的典型菌落数，按公式计算，报告每G（或ML）样品中金色葡萄球菌数，以CFU/G或ML表示；如T值为0，则以小于1乘以最低稀释倍数报告。（2）大肠杆菌菌落数检测方法方法大肠菌群MPN（MOSTPROBABLENUMBER）计数法。依据GB478932010食品微生物学检验大肠菌群计数。原理大肠杆菌在样本内的分布是随机的，所以检测细菌时，可按概率理论计算菌数。如果每份接种样的细菌数平均值为，每个接种管中进入KK0、1、2个菌的概率PN接近于泊松分布。样品处理称取25G样品,放入盛有225ML磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，800010000R/MIN均质12MIN,或放入盛有225ML磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打12MIN，制成110的样品匀液。用1ML无菌吸管或微量移液器吸取110样品匀液1ML，沿管壁缓慢注于盛有9ML稀释液的无菌试管中。试剂牛肉膏蛋白胨培养基、月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（BGLB）、结晶紫中性红胆盐琼脂、生化试剂盒等。检验流程制取3个连续10倍样品梯度稀释液，接种肉汤管，42H后将产气再接种BGLB肉汤，42H后，仍然产气的为大肠杆菌，选取试样进行MPN计数。结果处理确证的大肠菌群阳性管数，检索MPN表，报告每G（ML）样品中大肠菌群的MPN值。详见GB478932010大肠菌群最可能数（MPN）检索表（3）乳酸菌的检测31方法平板计数法32依据GB478935201033操作步骤331样品制备液体样品应先将其充分摇匀后以无菌吸管吸取样品25ML放入装有225