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文档简介

专题九生物科技与技术实践,0807508227刘伟星08计算机科学与技术医学应用2班,合成,逆转录,基因工程目的基因的获取:分为直接分离基因、人工合成基因。,基因表达载体的构建方法,将目的基因导入受体细胞,目的基因的检测与鉴定,导入检测:DNA分子杂交技术,即使用放射性同位素标记的含目的基因的DNA片段作探针检测。,转录检测:分子杂交法,即目的基因表达检测作探针与mRNA杂交翻译检测:抗原抗体杂交法个体生物学水平鉴定:转基因生物是否具有抗性或转基因产品的功能活性。,细胞工程细胞工程包括动物细胞工程和植物细胞工程。植物组织培养植物组织培养的理论基础是细胞的全能性。植物组织培养可培育繁殖速度快而且无病毒的植株,还可以通过大规模的植物、细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等,另外,还可用植物组织培养方法形成的胚状体,包裹上人工种皮,制成人工种子。,植物组织培养与动物细胞培养,植物体细胞杂交和动物细胞融合,单克隆抗体制备过程中的两个核心问题为何制备单克隆抗体要将单个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合?体内的B淋巴细胞数目很多,可以产生多达百万种以上的特异性抗体,这些抗体主要存在于动物体血清中,也存在于组织液及外分泌液中。如果从动物血清中分离出所需要的抗体,不仅获得的抗体产量低,而且抗体的特异性差,纯度低,反应不灵敏。如果利用单个B淋巴细胞通过无性繁殖,就可产生大量单一抗体,但B淋巴细胞在体外不能无限增殖(从动物细胞培养的过程可以理解,单个细胞要度过两次“危机”几乎是不可能的),这就需要利用肿瘤细胞无限增殖的特点,将单个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,可以使杂种细胞具有两个亲本的遗传特性,也就是既具有无限增殖的特点,又能产生单一抗体。,制备过程中为何须经两次筛选?第一次筛选是在B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合之后,因为有三种融合情况:B淋巴细胞与B淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合。而只有B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞才是需要的杂种细胞。第二次筛选是在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。,胚胎移植胚胎移植的供体和受体必须是同种生物,同一物种的动物才有可能具有相同的生理特征。作为受体的雌性动物应为常见或存量大的品种,供体则为优良

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