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文档简介
第一节病毒的基本特性病毒(virus):最微小的、结构最简单的非细胞型微生物。特征1体积微小;2非细胞结构,结构简单“一包基因”而且仅一种核酸;3严格的胞内寄生(分子水平寄生;)4以复制方式繁殖;5抵抗力特殊;6在医学微生物中占重要地位病毒感染占75%轰动效应传染性强,传播快,流行广,诊治困难,病死率高,后遗症严重与肿瘤相关分子生物学研究的重要工具。,一、病毒的大小、形态与组成(一)病毒的大小与形态1.病毒大小:以纳米表示,根据大小分为大、中、小三型大型病毒:200300nm如痘病毒中型病毒:80160nm又分为中小型与中大型:中小型病毒:80120nm如流行性感冒病毒和腺病毒等中大型病毒:120160nm如副流感病毒与疱疹病毒等小型病毒:1830nm如鼻病毒与脊髓灰质炎病毒等2.形态:呈多样性,大致分5种类型球形、杆形(丝形)、弹性、砖形、蝌蚪状3.观察及测量:电镜、滤过、超速离心、X线衍射,(二)病毒的结构与化学组成,病毒的结构,基本结构,核衣壳(nucleocapsid),(病毒体),病毒,核心(core),衣壳(capsid),辅助结构,包膜(envelope),病毒核心(viralcore)是病毒的中心结构,其内充满DNA或RNA一种核酸,构成病毒的基因组。2.病毒衣壳:包绕在核酸外面的蛋白质外壳衣壳由壳粒(capsomere)组成,形态亚单位,壳粒由多肽分子组成,结构亚单位,根据壳粒排列方式不同,病毒有三种对称型螺旋对称二十面体立体对称复合对称核衣壳,病毒体,基本功能单位,感染单位,3.辅助结构某些病毒在核衣壳外包被有包膜,是病毒以出芽方式从细胞内释放时穿过核膜、胞质膜、空泡膜等,在核衣壳外获得了宿主细胞的膜成分。包膜有无:裸病毒(nakedvirus)包膜病毒(envelopedvirus)有的包膜上有刺突(spike)或包膜子粒,包膜表面表达病毒基因编码的病毒特异抗原因包膜的基质是脂类,故对脂溶剂敏感,乙醚因能破坏包膜而灭活病毒,故常用来鉴定病毒有无包膜。,(一)病毒的复制周期(replicationcycle)吸附穿入脱壳生物合成组装成熟释放1.吸附(adsorption)亲嗜性病毒表面吸附位点宿主细胞表面受体易感性特异性、不可逆的结合,二、病毒的增殖,2.穿入(penetration)吸附后进入细胞内3.脱壳(uncoating)脱去衣壳、核酸裸露,穿入,脱壳,4.生物合成(biosynthesis),合成大量病毒核酸和结构蛋白(1)DNA病毒早期mRNA转录早期蛋白质转译(功能蛋白)复制子代核酸晚期mRNA转录晚期蛋白质转译(结构蛋白),(2)RNA病毒合成:遗传信息存在于RNA分子上单正链(ssRNA+)RNA病毒是按“ssRNAprotein”方式进行单负链(ssRNA)RNA病毒(如流感病毒等)按“ssRNAssRNAprotein”方式进行双链RNA病毒复制:是先由双链中的负链RNA复制出新正链RNA,再由新正链RNA复制出新的负链RNA,子代病毒RNA全部为新合成的双链RNA。正链RNA又翻译出子代病毒的结构蛋白和非结构蛋白。,病毒RNA,逆转录酶,RNA:DNA杂交中间体,RNA酶H,水解,负单链DNA,DNA聚合酶,双链DNA,整合酶,整合到细胞染色体上(前病毒),转录,子代RNA,mRNA,翻译,结构蛋白,子代病毒,释放,(3)逆转录病毒(retrovirus),非结构蛋白,装配,5.组装(assembly)与释放(release)(1)破胞释放:无包膜病毒在宿主细胞内经复制周期可增殖数百至数千个子代病毒,致使细胞破裂而一次性将病毒全部释放至细胞外。(2)芽生释放:包膜病毒在宿主细胞内复制时,胞质膜上会出现病毒基因编码的抗原物质,这些部位也是核衣壳出芽的位置。,(二)病毒的生长曲线一步法生长曲线或单峰实验分析:隐蔽期:也称黑暗期,当接种病毒后数小时内找不到任何病毒颗粒潜伏期(latentperiod):是病毒成熟阶段,为细胞外新的病毒第一次出现之前的时间;对数生长期(logarithmicperiod):病毒数量的对数与时间成比例增加,产生大量子代病毒,释放到细胞外的病毒出现波峰(burst)。,三、病毒的遗传和变异,(一)病毒的基因组病毒核酸仅含一种类型,DNA或RNA形态多样性(单一线形、双股环状)完整性不同(完整的、分节段的)还有携带反转录酶的RNA病毒可突变,并决定其表型,(二)遗传物质变异的类型1.基因突变突变株指病毒基因碱基序列改变,导致表型性状改变的毒株条件致死性突变株(conditional-lethalmutant)温度敏感突变株(temperaturesensitivemutant,ts株)为条件致死性突变株中应用最广泛的缺陷型干扰突变株(defectiveinhibitionmutant,DIM)宿主范围突变株(hostrangemutant,hr突变株)耐药突变株(drug-resistantmutant),2.基因重组与重配,两种不同病毒感染同一细胞时,可发生基因交换而形成新性状的重组体。基因重组(recombination)不分节段基因组病毒基因重配(reassortment)分节段基因组的病毒类型:活病毒之间:N0H0+N1H1N0H1活病毒与灭活病毒之间(交叉复活)灭活病毒之间(多重复活),活病毒与灭活病毒之间(交叉复活),互补:一种病毒为另一种病毒提供本身不能合成,但又是必需的基因产物,而使其在混合感染的细胞内得以繁殖。辅助
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