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文档简介
清洗与消毒C&D,提要一、清洗与消毒,两者一样重要,不可偏废。清洗的目的在于清除特定场所中的污物,而消毒则要求尽其可能减少病原微生物的载量。二、消毒并不能绝对地清除某个特定环境中的所有病原。而是尽其可能降低病原载量。一般认为消毒后病原数有4Log或以上的降低,即认为这样的消毒是有效的。三、不同消毒剂有不同的特性。消毒剂选择,要注意其针对性、对人畜与环境的伤害性、操作的方便性与经济性。,消毒剂与防腐剂的病原杀灭特性,细菌,分支杆菌,细菌孢子,真菌,病毒,消毒剂,防腐剂,乙醇,过氧化氢,甲醛,石碳酸,氯,碘附,戊二醛,碘附,乙醇,双氯苯双胍己烷,四级铵,对氯间二甲苯酚,三氯生,戊二醛与季铵盐类复方消毒剂,为当今西方养殖业空栏消毒、卡车消毒主流消毒剂。本实验也可验证此类消毒剂的良好效果。纯戊二醛类消毒剂,效果也极显著,但价格过高,局限其田间推广。纯季铵盐类消毒剂,效果亦佳。消毒效果差异,与消毒剂类型相关。,市售过氧乙酸产品,浓度为16%到23%。依据说明书浓度要求,其消毒效果不佳。市售泡沫洗涤剂,侧重其清洗与去污效果,其消毒效果不佳。有吹嘘所谓消毒效果者,实属无稽。,五百倍稀释过氧乙酸,在抑制细菌生长方面是效果不佳的。,农场总水源饮用水消毒农场总水源消毒:有效氯5mg/L能在2小时之内,有效杀灭ASFV,即每吨水添加5g有效氯。市售漂白粉(次氯酸钙)有效氯含量为百分之二十八。由于市售漂白粉每个批次有效氯含量会有较大差异性,所以可打出百分之三十的富裕量进行计算。5除以0.28,乘以1.3,即每吨水中添加25g漂白粉。农场总水池,可在半夜进行两个小时的停水消毒作业。次氯酸钙饮用水消毒效果,在冬天与夏天一样有效。(见数据),氯化钙长期以来作为抗冻剂、除雪剂使用。针对禽流感病毒、非洲猪瘟病毒,具有良好的消毒作用。氯化钙溶解时会释出热量,溶解速度也快,应该能成为华北、东北地区冬天农场消毒的一个有力武器。如,硬化路面除雪消毒、出猪台、消毒池、消毒盆及其他一切会上冻但需要消毒的场合。数据将陆续补齐做细。,-20条件下,消毒剂与氯化钙或其他抗冻剂合用能提升针对禽流感病毒的灭活效果,摘要禽流感多发于冬季,所以在冰冻条件下,养鸡场所的有效消毒就显得十分必要。市售消毒剂卫可与Accel与抗冻剂丙二醇、甲醇与氯化钙连用,用于禽流感病毒的消毒(-20与20条件下)评估其效果。禽流感病毒液涂布于不锈钢盘、风干、然后喷上消毒剂或抗冻剂,作用5到30分钟。卫可(2)与Accel(6.25)分别加入30%丙二醇、20%甲醇或20%氯化钙,能在5分钟内杀灭6log10禽流感病毒(-20与20条件下)。在这两种温度条件下,单纯丙二醇与甲醇单独使用对于禽流感病毒不具有杀灭作用,但是20%氯化钙在五分钟之内能杀灭5log10的禽流感病毒。本实验结果表明,氯化钙在温暖与寒冷的气候条件下,能够提升禽流感病毒消毒操作的效果。,不同消毒剂溶液添加抗冻剂一小时以后的状态(在-20温度下),S-固态:L-液态:G:胶状。,抗冻剂浓度,消毒剂溶液状态,丙二醇,甲醇,氯化钙,不同温度与接触时间下,两种消毒剂针对禽流感的消毒效果,抗冻剂及浓度,丙二醇,甲醇,氯化钙,EID50-50%胚胎感染剂量。NT-没有测试。PBS-磷酸盐缓冲液,处理后活病毒量,抗冻剂及浓度,针对禽流感病毒,不同消毒溶液五分钟内消毒效果,丙二醇,甲醇,氯化钙,处理后的活病毒量log10EID50,磷酸盐缓冲液,三次重复样本的均数,其标准偏差小于等于0.5,其差异具有统计学上意义。,猪场运输车辆清洗与消毒问题,农场车辆清洗与消毒方案:一、清洗:车辆打湿后半小时软化污物,喷上泡沫清洁剂(泡沫百净消,150倍稀释),作用半小时后,清水冲洗。(需确保完全无污物残留于车体上)。二、烘干:60,20分钟。(70,30分钟更佳)要确保车体完全干燥,才能进入消毒环节。(为确保完全干燥,可延长烘干时间)。三、消毒:百净消100倍稀释,全车无死角喷洒。,一、不仅仅考虑到非洲猪瘟的消毒,必须把几种重要猪群传染疾病的消毒问题同时列入考虑,如PEDV、PRRSV、FMDV、HCV等。美国、欧洲对于农场车辆清洗与消毒的实验数据与方案都相当完备,可供我们借鉴。二、由于血清、血液以及粪便等有机物,对于消毒的效果影响很大,所以,必须强调的是清洗与消毒是缺一不可的,没有清洗或清洗不彻底,后续的消毒效果将会大打折扣。三、清洗后的车体烘干彻底与否,与后续消毒效果也是关系重大的。干燥本身对于病毒就具有杀灭作用(参见后面资料)。,讨论,醛类最为人们所熟知的就是甲醛与戊二醛。甲醛能溶于水,其水溶液称为福尔马林(37),甲醇作为一种稳定剂添加于福尔马林中。低浓度的甲醛溶液是抑菌的,然而高浓度(20以上)则可以杀灭所有生物。戊二醛对活组织毒性较低,对皮肤与黏膜依旧具有腐蚀性。戊二醛在碱性环境下,能够有较好的消毒作用,但较不稳定。有机物能够减损戊二醛的消毒性能,所以消毒前,将对象清洗干净是十分重要的。,四级铵类由四个有机基团以共价键与氮原子联接组成四级铵,8-18个碳链的四级铵化合物,具有最好的消毒性能。此类化合物能够造成微生物的细胞膜变性,并释出细胞内容物释出。低浓度时为抑菌作用,高浓度时具有杀菌作用。假单包菌、毛癣菌属(真菌)则对本品具有抗性。实际上,某些单包菌能够在四级铵的溶液中生存。有些病毒与所有的细菌芽孢对本品也具有抗性。阴离子洗涤剂、有机物等能减损坏四级铵类的消毒性能。,FromOIE,市售几种消毒剂在寒冷天气条件下,针对蓝耳病病毒污染运猪车辆的消毒效果评估,本试验目的在于评估寒冷气候条件下(-20与4),针对蓝耳病病毒污染的运猪车辆,市售七种消毒剂的洗消效果评估。Synergize:戊二醛7%四级氨氯26%Aseptol2000:戊二醛12.75%四级氨氯9.2%Biophene:苯酚类。Sentramax:22%四级氨氯Virkon:过硫酸氢钾复合盐TekTrol:26%苯酚类DC&R:19.2%丙二醇甲醛2.28%四级氨氯3.08%,Synergize:戊二醛7%四级氨氯26%Aseptol2000:戊二醛12.75%四级氨氯9.2%Biophene:苯酚类。Sentramax:22%四级氨氯Virkon:过硫酸氢钾复合盐TekTrol:26%苯酚类DC&R:19.2%丙二醇甲醛2.28%四级氨氯3.08%,PCR检出数,PCR检出数,处理方式,WWW:挡风玻璃清洗液(40%甲醇)Syn:SynergizeP:10%丙二醇,结冻影响消毒效果,防冻液的添加能确保消毒效果。,生产现场对污染了蓝耳病病毒的全尺寸运猪车辆洗消方案评估,本试验在于评估污染了蓝耳病病毒的全尺寸运猪车辆,在生产现场条件下,使用冷水洗车(21),然后再以低压起泡机喷洒商业消毒剂,全部过程小余两个小时。而后评估其洗消效果(经由PCR检测与生物评估)。十五个采样点(如图所示),人工污染上蓝耳减毒活疫苗(博灵格)。每个采样点,其剂量为5X105组织培养感染剂量。一共做十次重复(共一百五十个点)洗消之前与之后(120分钟)棉签采样,做PRRSVPCR检测,检测为阳性的棉签进一步验证其是否为活病毒(生物评估)。结果150个样品中,检出10个PCR阳性,但生物评估皆未能检出活病毒。本试验洗消方式为高压冷水清洗,而后以低压起泡机喷洒1%过硫酸氢钾复合盐,作用两小时,杀灭PRRSV效果最佳。,全尺寸双层运猪车蓝耳病病毒检测15个采样点示意图,上层,下层,上猪坡道,格栅,运猪车辆蓝耳病病毒污染的洗消方案评估,本试验目的在于寻求一种针对蓝耳病病毒污染的运猪车辆进行有效的、快速的洗消方案(对其他病原也防控也甚有启发性)。处理组1Trt1:清洗。处理组2Trt2:清洗后再用甲醛薰蒸。处理组3Trt3:清洗后再用戊二醛加四级氨氯薰蒸。处理组4Trt4:清洗后隔夜阴干。处理前,与处理后六十分钟、九十分钟进行PCR检测,同时将哨兵猪关入处理后车厢两小时,了解受感染情况。值的注意的是,处理组3,处理后九十分钟,PCR检测全部为阴性,并且也无法造成哨兵猪感染,其效果与处理组4隔夜阴干一样好。(实验结果给我们个醒,干燥与病原的杀灭效果存在著密切相关性。),处理组1Trt1:清洗。处理组2Trt2:清洗后再用甲醛薰蒸。(26.4ml福马林每立方米,30分钟)处理组3Trt3:清洗后再用戊二醛加四级氨氯薰蒸。(128倍稀释,Synergize,雾化机,30分钟)处理组4Trt4:清洗后隔夜阴干(20C)。NegCtrl:阴性对照组。NT:没有测试。a:分母为PCR测试数量,分子为检出率。b:分母为放入哨兵猪数量(两小时),分子为造成感染数量。,热辅助干燥与消毒系统(TADD)在运猪车辆洗消中,对猪蓝耳病病毒的杀灭效果的评估,56,持续6到20分钟处理,其感染力将消失。经由一连串协同事件所造成的蓝耳病病毒的机械性传播,在寒冷气候(0以下)比温暖气候(10到16)发生机率要更高。,本试验所使用的模拟运猪小车与正规大车比较,丙烷加热器,处理后采样时间,检出数,加热空气干燥清洗,八小时自然干燥未列入本图,CitricacidcandisinfectinFMD,Africanswinefeveroutbreaks,柠檬酸能用于口蹄疫与非洲猪瘟爆发期间的消毒,美国兽医学会,柠檬酸能用于口蹄疫与非洲猪瘟爆发期间的消毒,2%的柠檬酸或高浓度次氯酸钠(2000ppm)能够作用于木质表面(孔洞表面),杀灭非洲猪瘟病毒。然而,柠檬酸溶液的效果会更好。,桦木载体上,柠檬酸与次氯酸钠对口蹄疫与非洲猪瘟病毒的消毒效果评估。,美国农业部外国疫病研究中心,2%柠檬酸溶液,能在22、三十分钟内,在木质表面上,有效杀灭口蹄疫与非洲猪瘟病毒。而2000ppm次氯酸钠,效果就要差些,不能符合4Log的消毒阈值要求(针对口蹄疫病毒)。综观所有数据,消毒剂中可添加至少2%的柠檬酸。在孔洞表面上,对口蹄疫与非洲猪瘟病毒,能有良好的杀灭作用。,桦木表面上,口蹄疫病毒与非洲猪瘟病毒消毒所需时间:(A):2%柠檬酸溶液。(B):1000ppm次氯酸钠溶液。横轴为作用时间,不同的作用时间后,进行中和处理,对残留病毒进行定量。每个点代表三个(或更多)实验数据的均值。错误棒表示标准偏差。虚线表示可侦测病毒的下限。,2%柠檬酸消毒时间(分钟),1000ppm次氯酸钠消毒时间(分钟),不同浓度次氯酸钠消毒效果比较,上图为口蹄疫病毒,下图为非洲猪瘟病毒。将病毒喷涂于桦木片表面,干燥后,以1000、1500与2000ppm次氯酸钠溶液进行消毒,不同的作用时间后,将消毒剂中和,残留病毒提取后进行定量。每一个点代表三个实验数据的均值,标准偏差以错误棒来表示,虚线表示病毒可以侦测的最低量。,桦木表面三十分钟消毒时间,病毒Log值(常用对数)降低情况的比较,2%柠檬酸,次氯酸钠,a.Log差值,指的是消毒前后病毒效价Log值均数相减。N是病毒呈阳性的桦木片数量,每个数值至少有三个重复,取其均数。b.2%柠檬酸溶液,与口蹄疫病毒作用25分钟。,2019.01.29中心实验室,柠檬酸的消毒效果,第四天下雨,酸碱度急遽下降,消毒效果变差。建议卡车消毒池有遮雨棚与引流沟设施,避免雨水直接流入消毒池。卡车消毒池现场检查,可使用酸碱度试条纸,要求酸碱度至少在12以上。,PCV2不是一个好的消毒指标。卡车消毒池,建议烧碱浓度在2%到3%为佳。烧碱添加量在1%时,消毒效果极差,虽然酸碱度能达到12以上。所以除了酸碱度以外,还有其他因素在起消毒作用。,运输车辆生物安全:卡车与拖车的洗消操作,一、车内污物的刮除,在清洗区外,移出车内拖盘,清除垫料与粪便,车厢内污物也要刮除干净,将车内拖板置于储放架,车辆进入清洗区。,二、清洗前预备动作:,三、打湿、初步清洗,在清洗点卸下车内拖板与冬天保温隔板,卸下所有车厢内使用的物件,进行清洗。,以多量清水尽其可能去除粪便与垫料,四、打上泡沫洗洁剂,使用泡沫喷枪,将泡沫覆盖所有表面,包括车厢内拖板与冬天保温档板,泡沫留置十分钟。,五、清洗,使用旋转喷水嘴,不要忘记死角,包括门后、难于触碰到角落,储物空间、把手、门边角、车厢内拖板与冬天保温档板等。,六、验收洗消效果,验收人员穿上干净的水鞋与工服,带上手电筒,验收洗消工作完善否。任何洗消的遗漏之处,必须严格要求返工。,七、洗消点的清洗,刮除污物、以低压水枪清洗。,八、重新组装
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