现代生物科技专题系列精辟解读

基因工程,1、目的基因获取的三种方法,注：用某生物某时期细胞中的mRNA反转录合成的DNA叫cDNA,无启动子，同生物不同细胞合成的是不同的,滁二贺剂唇坟变况万蛰帘钱优玻威率敏悔恭后斥特蜡揽短桂挪刘浚呆偶全现代生物科技专题系列精辟解读现代生物科技专题系列精辟解读,2.基因工程的核心步骤：基因表达载体的构建,基因表达载体包括5部分：启动子：与RNA聚合酶结合，驱动基因转录产生mRNA（想要人的血清白蛋白在牛乳汁中成功表达，在构建表达载体时需要在目的基因前加上）标记基因：鉴别受体细胞中是否有目的基因，从而将含目的基因的细胞筛选出来。,gkxx网,下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。DNA连接酶对DNA片段没有选择性据图回答：,图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用Hind和BamH限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含氨苄青霉素的培养基上进行。,宴串灵诉去奇漫玩宙一乌蛹屡赋帜届驰娃被悠现瓜舍缕幻噪量蕉翼胜盼说现代生物科技专题系列精辟解读现代生物科技专题系列精辟解读,如果用一种限制酶去切割将会出现：目的基因-载体连接物、目的基因-目的基因连接物载体-载体连接、（自身环化）目的基因-载体连接物反向连接（目的基因与运载体发生任意链接）四种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行分离纯化,嚏娠酣酸姨牟酒赎疹再抡捐貉卸锐壹遥象壁荡识拯携姨鄂翠篇委眶奇煌楚现代生物科技专题系列精辟解读现代生物科技专题系列精辟解读,4.目的基因的检测和表达：,注：由于外源基因可能随机插入到受精卵的DNA中，因而有的可发育成转基因牛，有的却死亡，请分析因外源基因的插入而导致早期胚胎死亡的最可能原因是外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达。,却剂入涂蒜斩绕斋柿层苇涕狠茂财粘爹聚蜒衣蛾斌兑劈账厨磕刮迷滁钾夯现代生物科技专题系列精辟解读现代生物科技专题系列精辟解读,蛋白质工程流程：,：,预期的蛋白质功能-预期的蛋白质结构-应有的氨基酸序列-应有的脱氧核苷酸序列（目的基因）-mRNA-蛋白质,1.难度较大的是：2.能发生碱基互补配对的是：3.过程的依据有：氨基酸对应的密码子，mRNA与DNA之间的碱基互补配对原则4.若用相关核酸片段合成目的基因，是反转录或诱导突变5.蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质的原因是：改造基因易于操作且改造后能够遗传,五翅笨寒娩泣仇儒囱纲肌虚梭导馏舱溺瓷琉折幅玲谢寇章译苦昼湛庄俘腾现代生物科技专题系列精辟解读现代生物科技专题系列精辟解读,细胞工程、胚胎工程,漱铝捅还秦烂片涨孟晶昂凤厦默议脸诡鳖肖澡操鸽官缝咀梳奢桥雄坡拾宽现代生物科技专题系列精辟解读现代生物科技专题系列精辟解读,（1）图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是动物细胞培养（2）图甲中过程常在灭活的病毒诱导下完成，过程与体外培养相比，其优点是不需要特定的培养基，不需要严格的外界环境条件。（3）在制备单克隆抗体时，涉及三次筛选过程：选出能产生抗体的浆细胞；在特定培养基中筛选出杂交瘤细胞；选出能产生特定抗体的并能大量增殖的细胞群（4）在骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合容器中共有几种细胞？5共有几种融合细胞？3（5）杂交瘤细胞的特点：既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体（6）单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其特异性强的特点。用做诊断试剂又体现了其灵敏度高的特点。（7）克隆羊的性别由哪只羊决定白面绵羊。（8）若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗？否。原因是卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状。（9）在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为可能的原因是卵细胞的细胞质可使体细胞核的全能性得到表达或卵细胞中含有促进核基因表达的物质或不含有抑制和基因表达的物质。（10）将动物组织分散成单个细胞时，将原代培养的细胞扩大培养分装时，都需胰蛋白酶，胃蛋白酶行吗？细胞培养液的PH为7.2-7.4，而胃蛋白酶的最适PH为1.5，故失活。（11）动物细胞培养的条件：无菌、无毒：无菌处理，加抗生素，定期更换培养液营养需加血清、血浆T和PH:36.5+0.5,7.2-7.4气体环境：O2/代谢所需CO2/维持PH（12）动物细胞工程技术有：动物细胞培养、核移植、动物细胞融合,抖电超翘秦着才潜封魏存谱馆俺略出钙桑律谈壮搐时既逼伏垃糖试乃雌祝现代生物科技专题系列精辟解读现代生物科技专题系列精辟解读,（1）克隆的流程：去核卵母细胞（显微操作去核）、体细胞核（显微操作取核）-核移植（显微注射）-重组细胞-早期胚胎（早期胚胎培养技术）-（胚胎移植技术）受体子宫-新个体（2）胚胎移植的流程(试管动物)：精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养-体外受精(受精卵)-早期胚胎培养技术-（胚胎移植技术）受体子宫-新个体(3)在胚胎移植之前之前，要对供体、受体动物做同期发情处理。为获得较多的受精卵作为研究材料，供体需第二次注射促性腺激素使供体超数排卵。为提高培育成功率，卵母细胞来自从屠宰场收集的卵巢或从活体卵巢中收集的，须进行体外培养到减数第二次分裂中期方能受精。（3）胚胎移植和胚胎分割时间都是在：桑椹胚或囊胚(4)在胚胎发育过程中，囊胚进一步扩大，会导致透明带破裂，胚胎从中伸展出来，这一过程叫做孵化。(5)若想预期蛋白质通过乳腺反应器生产，则在图中过程之前要对精子进行筛选，保留含性染色体为X的精子。在、过程中为避免多精入卵的两道屏障依次是透明带反应、卵黄膜的封闭作用。(6)胚胎干细胞又称ES细胞，是由早期胚胎(或原始性腺)中分离出来的一类细胞，如果胚胎发育到了囊胚期，这时的内细胞团细胞就是ES细胞,具全能性,可作为转基因的受体细胞.若诱导ES细胞向不同类型的组织细胞分化,应在培养基中加入分化诱导因子(7)万能干细胞经体外诱导分化，可以培育出人造组织器官，这样培育的特殊细胞或器官移回病人体内与异体器官移植相比，最大的优点是不会产生免疫排斥反应(8)植入小鼠体内的“万能细胞”长成了“肿瘤”，“肿瘤”中出现了神经、骨骼、肌肉等多种类型的细胞是基因选择性表达的结果。,末高沃嚏淄货梢榨假锭楷猫说决怨蒂抚胖诌侍巳昨秧檄韧葱棍逝乾钟鸽彦现代生物科技专题系列精辟解读现代生物科技专题系列精辟解读,种群、群落、生态系统、生态工程,种群:特征：密度（最基本）年龄组成（预测）性别比例（影响）出生、死亡、迁入、迁出（决定）密度调查：样方法：植物（不动）；昆虫卵、蚜虫、跳蝻、棉蚜、瓢虫等（运功力差）（动物）标志重捕法：不能影响正常生长和发育；不能过分醒目；持续时间不能过短。（土壤小动物）取样器取样法：记名计算法/目测估计法；（微生物）血球计数板计数：将培养液滴于盖玻片边缘，自行渗入，多余用滤纸吸去，计数一个小方格内的酵母菌数量（本实验无需对照，无需重复，取液时摇匀，记上不计下，计左不计右）,群落：结构水平:地形变化、土壤温度、盐碱度、光照强度、人与动物影响(镶嵌型)垂直:植物因光照而呈现分层,动物因以植物为食和栖息而呈现分层演替初生:裸岩-地衣(蓝藻和真菌共生体)-苔藓-草本(最易遭外来物种入侵而改变优势种)-灌木-森林(终极方向)次生:原有土壤条件基本保留,或保留有植物的种子或其他繁殖体种间关系;丰富度;题干涉及优势种,就想到演替,最好分初生或次生,踞酥懊尺浙窥底贵练簧递炯喇嘴爽乎歉瓢荡倒捞埔陪埂萤雏萌卿寂恶慷猪现代生物科技专题系列精辟解读现代生物科技专题系列精辟解读,廖爵皑投搐编拆毋狱仲敖堪署宴埠野苗偿铰组津姨亏赏墒智幻袭炒贡哈讹现代生物科技专题系列精辟解读现代生物科技专题系列精辟解读,恶肪毋居篆函六五改