临床生化AFU检测.ppt

-岩藻糖苷酶(AFU)试剂介绍新一代单一稳定液体试剂,四川迈克科技有限公司,-L-岩藻糖苷酶(-L-FUCOSidase，AFU)是一种溶酶体酸性水解酶，早期测定本酶主要用于遗传性AFU缺乏症的诊断，并借以与其它遗传性粘多糖贮积病的鉴别。1980年法国学者Deugnier等研究发现，原发性肝癌(PHC)患者血清AFU升高，并被众多的研究所证实。故有人提出AFU可作为PHC的肿瘤标志物，与AFP联合或参照应用大大提高了诊疗价值。近年来研究发现，AFU对某些疾病的发生、发展均具有重要意义。国内外早期文献报道AFU在原发性肝癌患者血清中活性显著升高,测定AFU对诊断原发性肝癌具有重要价值,AFU测定有利于原发性肝癌（PHC）的诊断、疗效观察、手术后随访、以及肝癌普查。在AFP阴性的病例中，大约有70-85%出现AFU的阳性结果，在小肝癌病例血清AFU的阳性率高于AFP，因此同时测定AFU与AFP可使PHC的阳性检出率从单测的AFP70%，提高至90-94%。目前，国内大多数医院使用的商品试剂为终点法试剂，该法由于酶底物本身的抗干扰性差，对溶血、黄疸表现出明显的基质效应。我们根据市场需要，从国外引进新型底物（MCPNP），并优化反应体系，加入合成溶血抗干扰剂和采用抗黄疸缓冲体系，使试剂具有抗干扰性强、精密度较好，基质效应不明显。历时近两年的试验室和临床应用评价，结果稳定,性能达到设计要求，现正式向国内市场独家推出新一代的单一稳定AFU测定试剂。该试剂采用连续检测法，适用于各种半/全自动分析仪器。,概述,主要性能指标,单一液体试剂:直接使用，不占试剂位。连续检测法:方便简捷，抗干扰性强高稳定性:28避光密闭贮存稳定12个月28避光开瓶稳定性30天检测范围:高感度方式(原倍)300U/L低感度方式(减量)600U/L精密度:平均CV%=1.14相关性:与终点法比较r=0.976适用性:适用于各种半/全自动分析仪灵敏度:高感度方式0.0100/min(约20U/L)反应线性期：7分钟稳定的试剂空白:监测期内空白稳定,仪器:7060分析仪,精密度,灵敏度(S2反应曲线),试剂空白,主要测定方法及部分性能比较,临床意义,AFU测定有利于原发性肝癌（PHC）的诊断、疗效观察、手术后随访、以及肝癌普查；在AFP阴性的病例中，大约有70-85%出现AFU的阳性结果，在小肝癌病例血清AFU的阳性率高于AFP，因此同时测定AFU与AFP可使PHC的阳性检出率从单侧的AFP70%，提高至90-94%AFU广泛存在于人体各组织细胞溶酶体和体液中，胎盘、胎儿组织、脑、肺、肝、胰、肾以及血清、尿液、唾液和泪液中均含有AFU。早期测定本酶主要用于遗传性AFU缺乏症的诊断，并借以与其它遗传性粘多糖贮积病的鉴别。1980年法国学者Deugnier等研究发现，原发性肝癌（PHC）患者血清AFU升高，并被众多研究所证实。故有人提出AFU可作为PHC的肿瘤标志物，与AFP联合或参照应用大大提高了诊疗价值。近年来，国内外学者又作了许多研究，发现AFU对某些疾病的发生、发展均有重要意义。,临床资料表明，在肝癌诊断中，PHC患者AFU活性不仅显著高于正常对照，而且也显著高于转移性肝癌、肝硬化、先天性肝囊肿、恶性血管内皮瘤、胆管细胞癌和其它良性占位性病变。对PHC诊断的阳性率为70-85%，特异性达90%左右。Marotta等对PHC、肝硬化后肝癌患者进行AFU、AFP检测，发现PHC和肝硬化后肝癌患者AFU、AFP均增高。慢性肝炎和肝硬化患者血清AFU也增高，其阳性率分别为3.8%和5.6%,可能与肝细胞损伤,酶逆流入血有关。也有血清AFU在PHC和肝硬化等非PHC疾病组重叠的报道，但后者一般轻度升高，且随疾病的治愈和好转而下降；而PHC则血清AFU持续升高，且升高幅度较大。因此AFU测定还有鉴别诊断的意义。AFU活性升高与肝功能受损和肝细胞破坏无关，是由于癌细胞本身代谢所致。有研究提示AFU诊断肝细胞癌（HCC）的敏感性好，而特异性较AFP为低。血清AFU的活性和阳性率与肝癌直径大小无明显相关性。血清AFU活性与AFP水平无相关性，AFP阴性和AFP升高而不足以诊断PHC患者，其血清AFU的阳性率达80.8%。肝组织活检证实为PHC者，血清AFU的阳性率67%为AFP阳性率（20%）三倍以上。因此AFU测定对AFP阴性和小细胞肝癌的诊断价值更大。AFU与AFP联合检测可提高肝癌的检出率。Giadina等对肝硬化患者进行随访研究，结果表明，血清AFU活性是早期发现HCC的有用指标，血清AFU明显增加的肝硬化患者应及时检测其它肝癌标志明确诊断。,临床意义,测定AFU活性还有有利于不同类型白血病分化程度的认识，从而指导临床诊断和治疗。Besly等报道，B细胞性慢性淋巴细胞白血病患者白细胞AFU活性明显低于其它类型白血病，认为这与B细胞属性无关，而是恶性细胞的增殖产物。研究表明，随妊娠周数增加血浆AFU递增，在分娩或人工终止妊娠后，迅速下降，5天后降至正常。胎儿、胎盘组织也可影响妊娠时血浆AFU活性，故测定AFU可作为妊娠的监测指标。卵巢癌患者血清AFU活性下降。胃癌患者血清AFU升高，急性胰腺炎不升高，囊性纤维变性伴发胰腺炎时则下降。,临床意义,PHC与HCC时AFU阳性率,67.8%,HCC,87%,82.0%,75.%,76.0%,81.2%,PHC,翟飞等报道,王晓玲等报道,Dongnier等报道,谭欣诚等报道,张世民等报道,杨申海报道,两百例病人血清AFU活性(U/L),正常对照137006.061.31PHC251872.014.679.55急性肝炎45613.36.872.93慢性肝炎69710.16.232.74肝硬化45511.16.512.91其他消化系统肿瘤16112.56.752.58,组别例数异常数异常率Xs,健康人与肝病患者血清AFP浓度AFU活力测定结果,七例PHC患者术前、术后AFU活力测定结果,注意事项,1.本法禁止使用肝素和橼酸盐血浆.可使用EDTA-Na2、草酸盐、NaF血浆。2.试剂应注意避光密闭