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文档简介

第一部分微生物的利用实验2分离以尿素为氮源的微生物,浙科版选修1,1.使用专一的培养基（含有尿素）分离专一的细菌（有脲酶的细菌）。2.利用指示剂颜色的变化检知（脲酶）所催化的反应。,1、尿素的利用,尿素是一种重要的农业氮肥。尿素不能直接被农作物吸收。土壤中的细菌将尿素分解成氨之后才能被植物利用。,2、细菌利用尿素的原因,土壤中的细菌分解尿素是因为它们能合成脲酶,+H2O,一、基础知识,要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；方法：抑制大多数微生物生长；造成有利于该菌生长的环境。结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。,3、实验室中微生物的筛选原理：,培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。,4、培养基选择分解尿素的微生物的原理,本实验中，酚红作为酸碱指示剂被添加到了培养基中，其变色范围是pH6.48.2，在中性情况下呈黄色，碱性情况下呈红色，,尿素NH3中性碱性酚红颜色：黄色红色,细菌,、制备无菌的尿素固体培养基和固体培养基,尿素培养基葡萄糖0.025gNaCl0.12gK2HPO40.12g琼脂糖0.5g酚红0.25g水15ml,实验组,二、操作过程,灭菌后再加尿素,、倒平板：,需要倒2个培养基，6个尿素固体培养基,每个稀释度1个LB对照平板3个尿素平板(平行重复组),、制备一定浓度梯度的细菌悬液：,g土壤ml无菌水，振荡，为稀释液，依次制备、的土壤稀释液。,、稀释涂布分离法分离细菌,取10-4和10-5各0.1ml菌悬液,接种,涂布分离,涂布前后三角刮刀需要灼烧吗？,、培养观察（倒置，度）,平板倒置按浓度捆成一摞,恒温37培养,LB培养基上10-2、10-3、10-4、10-5稀释度
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