《免疫学检查》PPT课件

免疫学检查ImmunologyExamination,第一节肿瘤标志物的检测肿瘤标志物（tumormarker）是由肿瘤细胞本身合成、释放或是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。主要包括蛋白质类、糖类物质和酶类肿瘤标志物。,一、蛋白质肿瘤标志物的检测（一）甲胎蛋白测定甲胎蛋白（alphafetoprotein,AFP）是在胎儿早期由肝脏合成的一种糖蛋白。出生后，AFP的合成很快受到抑制。,当干细胞或生殖腺胚胎组织发生恶性病变时，使原来已丧失合成AFP能力的细胞又重新开始合成，以致血中AFP含量明显升高。检测血中AFP浓度对诊断干细胞癌及滋养细胞恶性肿瘤有重要的临床价值。,【临床意义】1.原发性肝细胞癌患者血清AFP增高诊断阈值为超过300g/L,2.生殖腺胚胎癌（睾丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等）、胃癌、胰腺癌时，血中AFP含量也可升高。,3.病毒性肝炎、肝硬化，AFP也有不同程度的升高（20200g/L）4.妊娠34个月、孕妇AFP开始升高；78个月达峰后下降，但300g/L.,(二)癌胚抗原测定癌胚抗原（carcinoembryonicantigen,CEA）是一种富含多糖的蛋白复合物。【参考值】ELISA法和RIA法为100kU/L时，肯定有转移，敏感性高于CEA、TPA。,80的胰腺癌、71的肺癌、68的乳腺癌、64的卵巢癌、63的直肠癌、28的肝癌中也可见到CA15-3的升高5.5的正常人、一些良性肝病和良性乳腺病（16）也可见有CA15-3的升高,CA50,CA50来自抗直肠腺癌细胞系抗体是一种广谱的肿瘤标记物广泛存在于胰腺、胆囊、肝、胃、结直肠、膀胱、子宫，当细胞恶变时，由于糖基转化酶的失活或胚胎时才活跃的某些转化酶被激活，造成细胞表面糖链结构的性质改变而形成CA50。,4171的食管癌、4171的胃癌、5870的胆管癌、1478的肝癌和8097的胰腺癌都可见有CA50的升高。诊断直肠癌的阳性率与病情的分期密切相关，DukeA期1943、B期3059、C期和D期为5373的病人可出现CA50阳性在一些消化系统的良性病变，如胆管和胰管炎症、结石以及肝病中常见异常升高。CA50和CA19-9具有互补作用，同时测定可以提高检测的特异性和敏感性。,CA242,是一种与粘蛋白相关的标记物，也是一种唾液酸化的糖脂类抗原CA242能同时识别CA50和CA19-9的抗原决定簇。533的消化道良性疾病中可见有升高6879的胰腺癌、5585的直肠癌、44的胃癌病人中CA242的水平可高于20kU/L,临床应用,诊断胰腺癌时，敏感性为7080，特异性为90。可用于初诊时筛选胰腺癌。对非小细胞肺癌的敏感性和特异性分别为28.5和95.6。肺鳞癌患者血清CA242水平显著低于非鳞癌患者（肺腺癌和大细胞肺癌），可用于肺癌的鉴别诊断。,酶类标记物,肿瘤发生时，机体酶的活性常会发生较大的变化，这是因为：肿瘤细胞或组织本身诱导其它细胞或组织产生异常含量的酶肿瘤细胞代谢旺盛，细胞通透性增加，使得肿瘤细胞内的酶进入血液肿瘤使得某些器官功能出现障碍，从而导致各种酶的灭活及排泄障碍肿瘤组织压迫某些空腔而使得某些通过这些空腔排出的酶返流而进入血液,前列腺特异性抗原（prostatespecialantigen，PSA）,分子量约为34000含糖7的糖蛋白分子由240个氨基酸组成具有蛋白酶的活性，和缓激肽家族的丝氨酸蛋白酶的氨基酸序列相似,正常人PSA主要存在于精液中，其浓度（0.55.5g/L）约为血清（0.4g/L）的100万倍，每克前列腺癌组织可使血清中PSA升高3g/L，每克增生的列腺组织可使血清中PSA升高0.3g/L。,血清中总PSA（t-PSA）包括两种,较少的是游离型PSA（f-PSA），半衰期0.751.2小时大量存在的是复合型PSA（c-PSA），半衰期约23天，前列腺癌成功治疗后，高浓度的PSA降到正常值约需23周。,用ELISA法测定，血清PSA的正常值4.8g/L，良性前列腺肥大时介于两者之间，约为3.4g/L。PSA对前列腺癌具有高度的特异性，总的阳性率可达8297之间，PSA测定对包膜内癌的敏感性为70、转移癌为100。,临床应用：,早期发现前列腺癌临床分期和预后的判断监测前列腺癌的复发,自身抗体检测某些原因削弱或破坏健康人的自身免疫耐受（antoimmunetolerance）,免疫系统就会对自身组织或成分产生免疫应答，称为自身免疫（autoimmunity）.由于自身免疫而产生的疾病称为自身免疫病（autoimmunedisease,AID）.,一、类风湿因子类风湿因子（rheumatoidfactor,RF）是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体，主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液内。,【临床意义】类风湿性疾病时，RF的阳性率可高达7090，类风湿性关节炎的阳性率为70。其他自身免疫性疾病，如多发性肌炎、硬皮病、干燥综合征、SLE等，RF也可阳性。,二、抗核抗体检测（一）抗核抗体检测抗核抗体（antinuclearantibody,ANA）是指抗细胞核（DNP、DNA、ENA、RNA等）成分的自身抗体的总称。主要为IgG,根据细胞核染荧光的图象可分析为均质型、边缘型、颗粒型和核仁型。,【临床意义】1.ANA阳性多见于未治疗的SLE，阳性率达80%100%;也可见于药物性狼疮、混合性结缔组织病、原发性胆汁性肝硬化等。,（二）抗DNA抗体测定抗DNA抗体分为双链DNA和抗单链DNA抗体。1.抗-ds-DNA抗体阳性见于活动期SLE,阳性率7090%,2.抗ss-DNA抗体阳性见于SLE，尤其是合并有狼疮性肾炎，还可见于一些重叠性结缔组织病等。,（三）可提取核抗原性多肽抗体谱测定,病毒性肝炎标志物检测,病毒性肝炎有7型，HA、HB、HC、HD、HE、HG、TTV肝炎，分别与相应的肝炎病毒有关。病毒标志物的检测有相关抗原、抗体、核酸的检测。检测方法有：ELISA、RIA、PHA、PCR、斑点杂交等。,一、甲型肝炎病毒标志物检测（一）甲型肝炎病毒抗原和RNA测定HAV属于小RNA病毒科。,参考值ELISA和RIA法阴性。临床意义HABAg阳性：见于甲肝患者，可作为急性感染证据；HAV-RNA阳性：早期诊断有特异性。,（二）HAVAb测定参考值ELISA法IgM和IgA均阴性，IgG阳性可见于感染后的人群。,临床意义IgM阳性是早期诊断的特异性指标，提示HAV感染期；IgG阳性提示既往感染，作为流行病学调查的指标。,二、乙型肝炎病毒标志物检测（一）乙型肝炎病毒表面抗原检测乙型肝炎病毒表面抗原(hepatitisBvirusantigen,HBsAg)是HBV中Dane颗粒外层的脂蛋白包膜。,参考值阴性临床意义阳性见于急性乙肝潜伏期、携带者。HBsAg本身不具有传染性，与HBV同时存在，常作为传染性标志之一。,（二）乙型肝炎病毒表面抗体检测乙型肝炎病毒表面抗体(hepatitisBsurfaceantibody,抗-HBs)对HBsAg有一定中和作用。临床意义抗-HBs是保护性抗体，提示机体有一定免疫力，一般在发病后36个月出现，可持续多年。注射过乙型肝炎疫苗或抗-HBs免疫球蛋白者，抗-HBs可呈阳性。,（三）乙型肝炎病毒e抗原测定乙型肝炎病毒e抗原(hepatitisBviruseantigen,HBeAg)是一种可溶性蛋白质。,参考值阴性临床意义HbeAg阳性表明乙型肝炎处于活动期，提示HBV在体内复制，传染性强；HbeAg持续阳性，表明肝细胞损害较重，可转为慢性乙肝或肝硬化。如转阴表明病毒停止复制。,（四）乙型肝炎病毒e抗体测定乙型肝炎病毒e抗体(hepatitisBviruseantibody,抗-HBe)常继HBeAg后出现于血液中。,临床意义急性期出现阳性易进展为慢性；慢活肝出现阳性可进展为肝硬化；HbeAg与抗-Hbe均阳性，切ALT升高时可进展为原发性肝癌；抗-Hbe阳性表明大部分乙肝病毒消除，复制减少，传染性减低，并非无传染性。,（五）乙型肝炎病毒核心抗原测定乙型肝炎病毒核心抗原(hepatitisBviruscoreantigen,HBcAg)在血清中一般不易检测到。,（六）乙型肝炎病毒核心抗体测定乙型肝炎病毒核心抗体（hepatitisBviruscoreantibody,抗-HBc）可分为IgM、IgA、IgG。,抗-HBc总抗体临床意义抗-HBc总抗体主要反映的是抗-HBcIgG,比HBsAg更敏感，可作为HBsAg阴性的HBV感染的敏感指标；乙肝疫苗和血制品安全性鉴定和献血员的筛选。抗-HBcIgG对机体无保护作用。,2.抗-HBcIgM测定IgM是乙肝近期感染的指标，是HBV在体内持续复制的指标，IgM转阴，预示乙肝逐渐恢复，抗-HBcIgM转阳，预示乙肝复发。,3.抗-HBcIgG测定IgG在发病后1个月左右升高，可持续终身，是HBV既往感染的指标，可用于乙肝流行病学调查。,（七）乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2和前S2抗体测定乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2（pre-S2）是HBV表面蛋白成分，为HBV侵入肝细胞的主要结构成分；乙型肝炎病毒表面抗原蛋白前S2抗体是HBV的中和矿体。,临床意义pre-S2阳性提示HBV复制活跃，有传染性；抗pre-S2阳性提示