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文档简介
第二章植物组织培养室的设施(Equipmentsforplanttissueculturelaboratories),开展植物组织培养工作所需要的药品和仪器设备比较简单,都不昂贵。,第一节试剂与设备一、化学试剂(Chemicals),用于配制培养基的主要化学试剂:无机试剂:硝酸钾、硝酸铵、硝酸钙、硫酸钾、硫酸镁、硫酸铵、磷酸氢二钾、氯化钙、硼酸、钼酸钠、硫酸铜、硫酸亚铁等。有机试剂:维生素(B1、B6、烟酸、生物素)氨基酸、碳源、植物激素、凝固剂以及其它一些物质。,二、无菌设备Equipmentsformicrob-freemanipulation,1.灭菌锅(autoclave):最常用消毒的工具。种类很多:手提式(如常见的医用消毒锅,体积小)、立式(体积中等)和卧式(有中型和大型)之分;有自热式(带有加热装置)和外热式(无加热装置,需要从外部加热,如煤气、电炉、蒸气等)之分。使用什么样的灭菌锅,要根据植物组织培养的目的和规模而定。,2.超净工作台(laminarair-flowcabinet):用于对植物材料进行无菌操作。超净工作台实际上是一台空气过滤器,它通过马达将普通空气抽入,经过12次粗滤后,空气最后通过孔径为0.20.4m的滤网。是进行植物组织培养必不可少的一种设备。超净工作台可以分为双人和单人、单面和双面、水平风和垂直风等类型。,印度一家组培公司的接种车间,浙江省农科院组培中心无菌接种车间,三、培养室(Cultureroom),植物材料需要一个可控温、控光、洁净的地方进行培养。如规模小,则有12个培养箱即可。培养箱体积小,不占地方,控温、控光条件好,很适合于摸索植物材料的培养条件。缺点是空间小、价格昂贵(7000-10000元/台)。如果植物材料比较多,应建立专门培养室。建一个面积为30平方米的培养室,只要7000元左右,但可以摆放5000瓶材料,可年产100万苗。,培养室,培养室所需要的设备:1.培养架:培养架的设计既要考虑充分利用培养室的空间,也要考虑取放材料方便。2.加温/降温设备:空调3.光照和控光设备。分为光培养室和暗培养室。光培养室常用日光灯照明,并安置控制光照时间的自动开关。,四、其它仪器设备和用具,1.培养容器:玻璃容器,如试管、三角瓶、果酱瓶、罐头瓶、饮料瓶等。玻璃瓶耐高温消毒、透明(便于观察),且为惰性物质,对植物材料的生长影响小,是组培中用得最广的容器,但容易破碎。透明塑料容器:轻巧,不易破碎,但不耐反复高温消毒,而且有些塑料容器在高温消毒时会释放一些有害的物质,影响材料的生长。,容器封口:良好的封口用品要求做到既可以防止污染和容器内水分的过分散失,又要做到透水、透气。棉塞、锡箔纸、耐高温的塑料纸(如培养食用菌的聚丙烯塑料袋)。其中以棉塞是最好。现在也有专用的封口膜和瓶塞。,2.天平:需要1台万分之一的精密分析天平和百分比之一或十分之一的普通天平。这两类天平都有电子自动的和人工手动的,但价格差异很大,视经费状况购置。3.冰箱:用于储藏一些不宜在常温下较长时间放置的药品和试剂,如维生素、氨基酸、激素、微量元素等。,4.酸度计:植物的生长需要一定的pH值,因此需要对培养基的pH值进行测定、调节。酸度计测定pH值精度高,准确,但比较烦琐。如不是进行要求很高的培养(如单细胞培养、原生质体培养)或进行不同pH值对植物材料生长的影响,可以用pH试纸代替。5.酒精灯6.蒸馏水器7.解剖刀和镊子8.摇床,第二节植物组织培养室的设计(Laboratorydesignforplanttissueculture),植物组织培养工作按内容不同可以分为3个的过程:1.培养基的准备:包括试剂的配制、容器的洗涤、培养基的制备与消毒等;2.植物材料的无菌操作;3.植物材料的培养、观察与分析。,植物组织培养要求无菌,因此,在设计植物组织培养实验室时既要考虑各环节的衔接,又要避免不必要的交叉,特别是商业化组培苗生产,更要特别注意防止污染。最好是三部分工作相互独立(如下图),培养室,培养基制备、消毒室,分析室,接种室,更衣室,储藏室,
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