3.2月季的花药培养ppt课件

,1,花的结构:,2,植物的花药培养在育种上有什么意义？,明显缩短育种年限,为新品种的培育开辟了新途径。,3,（一）被子植物的花粉发育1.被子植物的花粉是在中由细胞经过分裂形成的。所以，花粉是的生殖细胞,一、基础知识：,花药,花粉母,减数,单倍体,花丝,花药：囊状结构,内有很多花粉,雄蕊,P37,4,(一)被子植物的花粉发育,5,小孢子母细胞(2n),()时期(n),()分裂,()细胞核(n),()分裂,花粉粒(双核期),()居中期(n),()靠边期(n),生殖,()细胞核(n),花粉管,()细胞(n),()细胞(n),()个精子(n),生殖,营养,2,四分体,单核,单核,有丝,()分裂,有丝,减数,填图：,6,(2)在正常情况下,若一个有24对染色体的植物开花，其一个小孢子母细胞可以产生个精子，精子中的染色体数目是；在一枚花药中可以产生很多个花粉。,(1)由此可见,被子植物的花粉的发育要经历时期，期和期等阶段。,四分体,单核,双核,8,24条,2个精子和1个营养核的基因型是否相同?,相同,12对？,7,【思考1】营养细胞在花粉管生长过程中的作用是什么？,【思考2】花粉的染色体组成与体细胞有什么区别？为什么？,【思考3】减数分裂过程中和被子植物花粉发育过程中的四分体是一回事吗？为什么？,控制花粉的萌发并提供营养。,花粉的染色体只有体细胞的一半，无同源染色体（二倍体生物）,不是一回事。前者的四分体时期是指同源染色体配对后，一对同源染色体含有四条染色单体的阶段；后者的四分体时期是指4个单倍体的细胞（小孢子）连在一起的时期。,8,(二)产生花粉植株的两种途径：,胚状体,愈织,愈伤组织,胚状体,【思考4】花药培养产生花粉植株的两种途径的差别主要取决于。,培养基中激素的种类及浓度配比(没有绝对的界限),丛芽,丛芽,P38第二段,9,【思考6】单倍体性细胞产生的花粉胚,也可发育成为单倍体植株，这和植物的体细胞克隆有区别吗？,【思考5】什么是体细胞胚？,在组织培养过程中，某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似，被称为体细胞胚（胚状体）。,有区别。单倍体性细胞发育成的单倍体植株表现为高度不育，植物的体细胞克隆的植株可育。,P38小字,10,花瓣已有些松动又给材料的消毒带来困难，且难以挑选到单核期的花药,(三)影响花药培养的因素1.影响花粉植株成功与否和成功率的主要因素：和等。,材料的选择,培养基的组成,质地幼嫩，极易破碎,完全未开放,初花期,单核期,P39,11,【思考7】为什么选择合适的花粉发育期是诱导花药培养成功率的重要因素？,因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体，花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。,【思考8】为什么花药的培养要选择完全未开放的花蕾？,这种花蕾,可挑选到单核期的花药,菌少、易消毒,【思考9】为什么花瓣松动会给材料消毒带来困难？,松动后微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难,【思考10】除此之外,你认为影响花粉诱导成功率的因素还有哪些？,植物的种类、亲本植株的生长条件、材料的低温预处理、接种密度、培养基组成、培养的环境条件,P38-39,P39,P39,12,二、实验操作（一）材料的选取1.选择花药时一般通过确定花粉发育时期，此时需要对花粉细胞核进行染色，最常用的染色剂是和焙花青铬钒溶液，它们分别可以将细胞核染成色和色。2.在使用焙花青铬钒溶液时，需要首先将花药用处理20min。该试剂的配制方法是将按体积比为的比例混合均匀。,镜检,醋酸洋红,蓝黑,3:1,红,无水酒精和冰醋酸,卡诺氏固定液,P39,13,（二）材料的消毒,花蕾,(酒精)大约30s,()清洗,()吸干水分,()24min,()冲洗,【思考11】月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较，二者有何不同？,在酒精消毒前，花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗。,14,【思考12】为什么不直接给花药消毒而是给整个花蕾消毒？,用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。,【思考13】实验完毕后1氯化汞溶液应如何处理？,收集、回收或运至废物处理场所处置（收集好后，运到垃圾处理站专门处理）,实验室内少量HgCl2可以转化成HgS来进行销毁，即：HgCl2+Na2S=HgS（沉淀）+2NaCl由于HgS溶于过量硫化物中，所以往往需要加入硫酸亚铁进行共沉淀。,15,3.培养:花药培养利用的培养基是培养基,pH为，温度为,幼苗形成之前(需要、不需要)光照。,2.接种花药:剥取的花药要立刻接种到培养基上。每个培养瓶接种个花药。,（三）接种和培养1.剥取花药:消毒后的花蕾,要在条件下除去花萼、花瓣。在剥离花药时,要尽量不损伤花药，否则,还要彻底除去花丝,因为:。,容易从受伤部位产生愈伤组织,与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成,无菌,MS,710,MS,5.8,25,不需要,P39-40,16,4.培养2030d后,花药开裂,长出或释放出。前者还要转移到上进行分化培养成再生植株；后者要尽快并转移到新的培养基上。5.通过愈伤组织形成的植株，常常会出现的变化，因而需要鉴定和筛选。,愈伤组织,胚状体,分化培养基,分开,染色体倍性,【思考14】为什么通过愈伤组织形成的植株会发生染色体倍性的变化？,有些是由花粉发育形成的单倍体植株，有些是由花粉壁细胞发育形成的二倍体植株。,17,【思考15】植物组织培养技术与花药培养技术有何异同？,相同点：不同点：,二者均为离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。,植物组织培养技术所用的外植体为体细胞，染色体数无需加倍。,而花药培养技术取材为花药，培养的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。,18,总结：,19,1.基因型为AaBb的水稻(条染色体)的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下培养成试管苗。()愈伤组织是花粉细胞分裂形成的不规则的细胞团，愈伤组织必须从培养基中获得()()和小分子有机物等营养物质。()要促进花粉细胞的分裂分化,培养基中应有()()两种激素。愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，由芽发育成叶茎。这一过程必须给予光照，其原因是()利用光能制造有机物促进试管苗生长发育。()试管苗的细胞核中有()条脱氧核苷酸链。试管苗的基因型有：,水,无机盐,生长素,细胞分裂素,叶,24,ABAbaBab,20,2.(9分)草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代，导致产量降低。品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下：外植体愈伤组织芽、根植株请回答：(1)微型繁殖培育无病毒草莓苗时,一般选取_作为外植体，其依据是。,茎尖、根尖,茎尖、根尖不含病毒,21,(2)在过程中,常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和_，在配