细菌的分布与分离接种.ppt

医学微生物学实验,微生物学教研室2011年4月,实验内容,一、细菌分布实验空气中细菌的检查（操作）皮肤、日常物品细菌的检查（操作）二、细菌分离接种技术（操作）平板划线接种法；斜面培养基接种法液体培养基接种法；半固体穿刺接种法三、细菌在培养基上生长现象（示教）,目的要求,认识细菌在外界的分布规律掌握细菌分离培养基本技术认识细菌在不同培养基中的生长现象,一、细菌的分布实验,（1）空气细菌检查材料：培养基，普通琼脂平皿（2）皮肤（其他物品）消毒前后的细菌检查材料：培养基，无菌生理盐水，75%酒精棉球，2.5%碘酒棉球，无菌棉棒（3）自来水中的细菌检查材料：培养基，无菌棉棒，酒精灯,1.空气中细菌的检查(操作,4块/室),取三块琼脂平板，将2个打开皿盖分别置于不同的环境1530min后，盖好皿盖。另外1个不启盖作为对照。置37培养1824h。,材料：,普通琼脂平板,方法：,结果：,计数菌落数，观察菌落数的差异。,2、皮肤（其他物品）消毒前后的细菌检查方法,在1个平皿底部做好标记，分为消毒前与消毒后两个区域。取一支无菌棉签放入无菌盐水中浸泡，在管壁上挤干水后擦拭皮肤或其他物品，然后将该棉签涂布于无菌平皿消毒前区域，作来回划线，注意勿划破琼脂表面。将皮肤区域或物品用碘酒棉球及酒精棉球涂擦消毒，另取一支无菌棉棒用消毒前所述方法取材，接种于标有消毒后的平皿区域。平皿37、24h培养后取出观察表面有无细菌生长，比较消毒前后菌落数目，描述菌落特征。,结果：,计数菌落数,371824h,消毒前,消毒后,自来水中的细菌检查,在1个平皿底部做好标记。用酒精灯对水管口灭菌，拧开水管开关放水15S。取一支无菌棉签蘸取自来水，将该棉签涂布于标有消毒前的无菌琼脂平皿表面，作来回划线，注意勿划破琼脂表面。将平皿于37、24h培养后取出观察平皿表面有无细菌生长，描述菌落特征。,1.半固體培養基接種法（操作）2.斜面培養基接種法3.液體培養基接種法,細菌的接種法,（一）分離培養,1.平板分離劃線接種法（操作）,（二）純培養,接种环（上）和接种针（下）,无菌操作,无菌操作,Asepticarea10-20cm,外焰,焰芯,内焰,菌液采取法,（一）平板划线接种法（分离培养法）,连续划线法分段划线法,Rotate90,Flameloop,Rotate90,Flameloop,（一）平板划线接种法（分离培养法）,培养结果,1,3,2,注意事项：,1.区之间接种要灭菌,2.用力适当，不要划破琼脂表面,3.注意无菌操作,（二）液体培养基接种法,（二）液体培养基接种法,（三）半固体穿刺接种法,用途：观察细菌动力，保存菌种。,斜面培养基接种法（操作）,用途：常用于扩大纯种细菌及实验室保存菌种。,斜面培养基接种法,液体培养基接种法,半固体培养基接种法（操作）,方法：穿刺接种,结果：沿穿刺线生长动力-扩散生长动力+,三、细菌在培养基上生长现象（示教）,沉淀成链生长浑浊均匀分散生长菌膜表面生长（需氧菌）,1.固体,2.半固体,3.液体,菌落菌苔,动力+动力-,固体培养基生长现象,液体培养基中生长现象,沉淀生长,混浊生长,表面生长,半固体培养基中生长现象,有