体外受精和早期胚胎培养

.,1.精子和卵细胞发生的时期2.排卵时卵子从何处排出？排出的卵子是什么细胞？3.判断卵子是否受精的标志？4.受精前的准备,5.受精阶段，如何防止多精入卵？6.根据胚胎形状变化，可将早期胚胎划分为哪几个阶段？,.,专题3,胚胎工程,体外受精和早期胚胎培养,课题2,.,国产奶牛：年均产奶量3000公斤左右国际良种奶牛：年均产奶量10000公斤左右我国蒙古黄牛：均重300Kg海福特肉用牛：2岁体重可达800Kg,存在的问题：,1.引进一头良种成年奶牛需要3万5万元2.牛的生育率低，一头牛一胎只一个，一生只能生育四五次,.,牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右公牛产生的精子数目就更多了伟大设想诞生了,.,(1)概念：通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经过移植产生后代的技术(2)过程,移植,卵子,受精卵,早期胚胎,子宫,精子,个体,试管动物技术,.,从试管牛说起,实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是（体外受精）和（早期胚胎）的培养,体外受精：采取雌性动物的（卵细胞）和雄性动物的（精子），使其在（试管）中受精。,注：但发育的主要场所是（母体）,.,1.思考一下，试管动物和克隆动物的比较？,有性生殖无性生殖,体外受精、胚胎移植,核移植技术、胚胎移植,遵循,不遵循,.,步骤1、卵母细胞的采集和培养2、精子的采集和获能3、受精,二、体外受精：,.,用促性腺激素处理，使其排出更多的卵子，然后，从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。,对不同动物,采取卵母细胞的方法不同,.,不同动物,采集卵母细胞的方法不同：实验动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等卵细胞的采集：最常用的方法是卵巢经过处理。具体做法是给供体注射，使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子，之后从中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。,超数排卵,促性腺激素,输卵管,.,大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集：从屠宰场已屠宰母畜的中采集卵母细胞；也可以借助、或等工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出。,卵巢,超声波(B超)探测仪,内窥镜,腹腔镜,注意：后两种方法采集的卵母细胞需在体外培养成熟后才能与获能的精子受精。,.,活体采集的牛卵母细胞,.,超声波探测仪,.,.,卵母细胞的成熟培养：CO2培养箱,.,培养箱,.,1.不同方法采集的卵母细胞成熟程度相同吗？能不能直接用于体外受精？为什么？,不同,初级卵母细胞，体外培养至MII中期,不能。,2.如何让雌性动物排出更多的卵细胞？,超数排卵，给供体注射促性腺激素。,.,精子的收集和获能,假阴道法,手握法,电刺激法,.,受精,获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在或中完成受精过程。,获能溶液,专用受精溶液,.,获能的精子成熟的卵子（MII）受精卵,获能液或受精液,胚胎,发育培养液,.,三、胚胎的早期培养,培养液成分：有机盐、无机盐、激素、维生素、氨基酸、核苷酸、血清等,.,培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷动保存。,不同动物胚胎移植时间不同,桑椹胚阶段：牛、羊,8个或16细胞胚阶段：小鼠、家兔,4个细胞胚阶段：试管婴儿,检查受精状况和受精卵的发育能力。,目的：,.,1.以牛为例，从屠宰场收集卵巢中的卵母细胞进行体外受精的应用效果如何？,目前，从屠宰场废弃的卵巢中，每个卵巢平均可采集10枚左右可用卵母细胞，经体外培养成熟和受精后约可获4枚可用的胚胎，经过移植给受体母牛，最终可得到12头犊牛。牛的体外受精胚胎的工厂化生产已在一些发达国家开展。,.,.,“试管牛”工业化生产的技术流程图,胚胎移植,.,小结：试管牛工厂化生产技术流程,（）（包括卵细胞采集、精子的获能、受精等步骤）（）（）（）良种牛犊成熟期牛,例题1从澳大利亚和新西兰引进一流良种无角道赛特肉用绵羊和布尔肉用山羊，能否设计一种快速繁殖子代个体，而又大大缩短良种本身周期的办法？简述其具体的过程。,体外受精,早期胚胎的培养,胚胎移植,代孕母牛,.,能。,分别取赛特肉用绵羊和布尔肉用山羊的卵母细胞和精子，然后做以下处理：,卵母细