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文档简介
液-液分配色谱与化学键合固定相色谱,正相分配色谱(正相柱),组分极性越大,保留时间越长;使用极性化合物的分离。,反相分配色谱(反相柱),组分极性越小,保留时间越长;适用非极性化合物的分离。,2,正相与反相的出峰顺序相反,待测物极性:ABC,利用硅胶表面存在的硅羟基,通过化学反应将有机分子键合到硅胶表面。,A.硅氧碳键型:SiOCB.硅氧硅碳键型:SiOSiCC.硅碳键型:SiCD.硅氮键型:SiN,化学键合固定相,特点:非常稳定,在使用中不易流失。可将各种极性的官能团键合到载体表面,适用于种类繁多样品的分离。,ODS(C18)键合相,硅胶,十八烷基氯硅烷,双重分离机制:(键合基团的覆盖率决定分离机理)高覆盖率:分配为主;低覆盖率:吸附为主。,硅胶为基质键合的C18填料,2.键合固定相类型,类型,反相柱,正相柱,氨丙基氰乙基、醚和醇等极性基团,不同碳原子数的烷烃(C8和C18)、苯基等疏水基团,C8硅胶键合辛烷基C18硅胶键合十八烷基,C8和C18都是反相色谱柱的一种,适用于分析弱极性的物质,C8适合分析弱极性物质里极性稍强的一类物质,C18适合分析弱极性物质里极性更弱的物质。,例:以ODS键合色谱柱、甲醇-水为流动相分离以下两种苯甲酸,试判断出峰次序。,没食子酸,3,4-二羟基苯甲酸,因此,保留时间:,没食子酸,3,4-二羟基苯甲酸,固定相:非极性;流动相:
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