医院干化学应用专题讲座ppt

干化学应用,实验室专员房圣亚,主要内容,干化学原理V350分析仪的日常保养常见应用问题解析,美国强生公司是世界上最大的、最具综合性的医疗保健品制造商，为消费者、制药业和医疗器材及诊断市场提供全面的专业化服务。,2010年销售额达到675亿美元，在全世界的医疗保健产品生产企业中名列第一。全球雇员超过12万。公司总部位于美国新泽西州，拥有多于250家子公司，为57个国家的市场提供产品和专业化服务。产品覆盖制药、医疗器材和保健品。在外科缝线、OTC药品、医疗器械及诊断领域居于国际领先地位。2010年在财富全球最受景仰的公司评选中，名列第三。全球仅有的五家AAA信用级工业公司之一。,强生公司,3,强生OCD主要产品,安全输血 血型分析 血液筛查,实验室诊断 临床生化 临床免疫 实验室自动化*,ValuMetrix实验室管理咨询服务* Veridex肿瘤分子诊断*,* 注册中,MicroSlide 多涂层薄膜干片技术,标本,MicroSlide多涂层薄膜干片技术：将所需试剂预固相在多层薄膜和邮票大小的透明支持基垫之上。当血浆，血清，尿液或脑脊液与这些已含化学物质的干式薄膜接触时发生反应并对反应信号进行测量。,干片分类,CM/RT,PM,IR,干片,钠钾氯,地高辛苯巴比妥卡马西平苯妥因C反应蛋白,胆固醇 甘油三酯总蛋白 白蛋白高密度酯蛋白 脂肪酶尿蛋白 脑脊液蛋白谷丙转氨酶 谷氨酸转移酶碱性磷酸酶 r谷氨酰转酞酶乳酸脱氢酶 肌酸激酶肌酸激酶同工酶 尿素氮肌酐 尿酸 乳酸 铁、总铁结合力磷 锂,淀粉酶胆碱脂酶总胆红素结合/非结合胆红素血氨乙醇水杨酸茶碱醋氨酚镁二氧化碳,比色/速率法干片,免疫速率法干片,电极法干片,指示剂层 支持层,扩散层试剂层,比色/速率法干片,通过测定干片颜色变化来确定化合物浓度,指示剂层 支持层,多孔结构，允许标本通过 均匀分布标本 过滤大分子（蛋白质，脂肪等） 去除干扰物质（溶血，黄疸等） 提供反射测定的背景,扩散层试剂层,扩散层,比色/速率法干片结构,试剂层,包含检测反应所需的酶，缓冲液，催化剂等 多层试剂，控制反应顺序,比色/速率法干片结构,葡萄糖干片,指示剂层,试剂层产物与指示剂层中的染料结合时，形成有色复合物，其与分析物浓度成正比。,比色/速率法干片结构,支持层,提供反应支持基垫 允许光路自由通过,比色/速率法干片结构,反射光的测定,干扰物质,反光背景,成色层,生成纯净的反射光,光源,滤光片,接收器,比色/速率法干片功能演示,湿化学 ： 采用透射光度法 遵循朗勃比尔定律干化学 ： 采用反射光度法 遵循Williams Clapper定律,吸光度,浓度,反射光,浓度,透射与反射,接收器,接收器,透射 与 反射,光线经过干扰物质 光线不经过干扰物质 受影响 不受影响,尿酸,其他的优异抗干扰能力,MicroSlide多层涂膜技术可以针对不同检测项目使用加以不同成份的薄膜以达到最佳的检测结果某些干片中有清道夫层如尿酸试剂去除维他命C 和镁干片去除钙的干扰 某些干片试剂层下有半透膜层（如尿素氮）：去除药物干扰,半透膜,尿素氮,竞争性与非竞争性免疫速率反应模式 需要液体反应底物 地高辛、苯妥因、苯巴比妥、CRP、 卡马西平,免疫速率法干片,电极法干片,离子选择电极技术 直接法测定两电极间电势不同 钾，钠，氯,18,盐桥,S2,S1,S3,S4,aI,ar,离子载体膜,M+ Cl,AgCl,Ag,离子载体膜,M+ Cl,AgCl,Ag,aI,ar,V,V,干片,常规,已知浓度液体(参比液),待测液体(标本),离子选择电极(ISE),盐桥,ar,电极法干片,19,干片在接触点被穿透测量电压读数通过电压读数计算出分析物的浓度,旗舰测试项目 K，Na，Cl 直接离子选择电极,20,Aqueous Solution (Serum)水相(血清),Non-aqueous solution(Lipids, Proteins)非水相(血脂,蛋白质),以间接法检测的容量,以直接法检测的容量,间接法无法对血脂和蛋白质进行校正.,21,组成成分 原始体积,水相9.3 ul非水相 0.7 ul总样本体积 10.0 ul,按照血清中, 非水相占有的体积约为7 %计算,标本,电解质排斥效应,22,组成成分 原始体积,稀释液 990.0 ul水相 9.3 ul非水相 0.7 ul总样本体积 1000.0 ul,稀释后的正常人标本(100倍稀释),稀释比率 = 最终体积 / 原始体积,总的血清稀释比率 = 1000 / 10 = 100 倍水相稀释比率 = (990 + 9.3) / 9.3 = 107.45 倍,电解质排斥效应,23,正常人标本Na=140K = 4.0,稀释 1:100,检测,计算,Na= 140K = 4.0,结果,Na = 130.3K = 3.72,单位：mmol/L,Na = 140 /107.45100 = 130.3 mmol/LK = 4/107.45100 = 3.72 mmol/L,直接离子选择电极法,检测,间接离子选择电极法,结果,电解质排斥效应,蛋白质增高脱水巨球蛋白血症多发性骨髓瘤高球蛋白血症肉芽肿病某些胶原病,血脂增高甲状腺机能减退肾病综合症糖原过多症糖尿病急性胰腺炎,直接法 vs. 间接法 ISE,疾病状态对标本的影响,血浆蛋白影响,血浆蛋白为部分水溶性，故高浓度的蛋白会造成与血脂类似地影响,4 8 12 16,0.80,0.90,1.00,检测结果,总蛋白,直接电极法,间接电极法,干式生化系统的抗干扰性（黄疸）,文件来源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.,干式生化系统的抗干扰性（黄疸）,文件来源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.,干式生化系统的抗干扰性（脂血）,文件来源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.,干式生化系统的抗干扰性（脂血）,文件来源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.,干式生化系统的抗干扰性 （溶血）,文件来源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.,强生干式生化系统的抗干扰性（溶血）,文件来源于：INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.,主要内容,干化学原理V350分析仪的日常保养常见应用问题解析,每日保养,需要做的保养:清空:废稀释杯和废吸头箱空试剂盒箱废干片箱检查: 加样架是否脏了有无损坏补充:稀释杯,吸头试剂参比液,稀释液,免疫冲洗液质控: 做所有机上项目的质控,每日保养,清洁加样架和通道,每日保养,更换各种辅助试剂:选择相应的子程序仪器自动准备放入新的辅助试剂参比液,洗液都是记数为300滴稀释液是2-10ML,每周保养,需要做的保养:清洁:加样架平台,加样架运动轨道吸头停止位加样位的样品杯限位器触摸屏和键盘检查:加样臂的运动路径主控计算机的空气滤网,每周保养,加样架平台加样架运动轨道吸头停止位加样位的样品杯限位器,每周保养,加样臂的运动路径,每周保养,空气滤网,必要的保养,应做的保养:须更换的:保湿剂,干燥剂 反射光度计的灯泡清洁: 废干片通道 推片尺和干片通道需做的: 用黑白参考片做的光 路校正测试,必要的保养,必要的保养,进入Diagnostic-setup/adjust-Reflectometer Iris调整灯电压(至8V以下),必要的保养,用黑白参考片做的光路校正测试Diagnostic-setup/adjust-Correction Factor输入黑白参考片的反射系数按提示将参考片放入孵育盘更新生成的校正系数,主要内容,干化学原理V350分析仪的日常保养常见应用问题解析,45,肌酐为什么有时候肌酐不出结果，报DP,稀释后结果反而不高？,常见应用问题解析-肌酐,反应原理,两点速率法：滴加样本后，干片进行孵育。反应初期样本重的内源性肌酸被氧化，所产生的反射信号值在两个时间点测定，测定的反射强度差值与样本中的肌酐 (CREA) 浓度成正比。,46,常见应用问题解析-肌酐,已知干扰物质血清和血浆 肌酸：肌酐 (CREA) 浓度为 133 mol/L 时，大于 707 mol/L的肌酸浓度将会显示“DP”代码（因为提高很多的肌酸浓度可能引起过度的背景密度）。 对于没有显示错误代码的样本，肌酸引起的残留偏差将小于 13.3 mol/L。 肌酐 (CREA) 浓度为 1237 mol/L时，大于 88 mol/L 的肌酸浓度将会显示“DP”代码。 对于没有显示错误代码的样本，肌酸引起的残留偏差将小于 2%。,47,肌酐,常见应用问题解析-肌酐,处理方法稀释样本如果肌酐浓度超出系统可报告范围，或者分析仪显示“DP”代码（指示高背景密度，通常是因为肌酸浓度升高所致），则按如下步骤操作：手工样本稀释1. 使用 VITROS 7% 牛血清白蛋白溶液稀释样本；2. 重新分析；3. 结果乘以稀释因子，获得原始样本中肌酐浓度的估计值。,48,CK/CKMB为什么在检测同一标本时CKMB大于CK？,说明书的应用（3）,CKMB反应原理,CK反应原理,49,CK/CKMB,说明书的应用（3）,实验的局限性已知干扰物质 CK-BB（存在于新生儿 、脑局部缺血、小脑血肿、休克 和癌症患者样品中）和大分子 CK I 类及 II 类会使 CK-MB 结果假性升高 大于 1000 U/L 的总 CK 活性可能会引起 CK-MB 结果升高。总 CK 1000 U/L 的样本在分析前应进行稀释,电解质应用注意事项,参比液要24小时更换,否则测量结果会下降参比液枪头要8小时更换钾、氯试剂弹夹从冰箱中取出必须室温1个小时钠试剂弹夹从冰箱中取出必须室温2个小时,电解质应用注意事项,夏秋季节干燥剂保证正常状态，潮湿易引起电解质项目测量报警6BG定标室温不要与测量时室温相差5度以上定标时不要用分装太长的定标液做好参比液部分的日保养工作，防止参比液碗