实验十醋酸纤维薄膜电泳--血清白蛋白分析_第1页
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实验十、醋酸纤维薄膜电泳血清蛋白分析和人体动脉血压的测定,一、目的和要求、了解电泳的原理，掌握醋酸纤维薄膜电泳的操作、学习动脉血压的原理，测定收缩压与舒张压,二、实验原理（一）电泳在外界电场的作用下，生物大分子从电极一侧向另一侧移动的现象1、蛋白质由氨基酸通过肽键连接而成,2、等电点(isoelectricpoint,pI)在一定的pH条件下，当其正、负电荷数相等时，整体便失去了所有电荷，这时的pH称为等电点（pI）。氨基酸在等电点时电泳移动速度为零在碱性环境中，蛋白分子负电阳极在酸性环境中，蛋白分子正电阴极,3、醋酸纤维素薄膜(CelluloseAcetateMembranes)采用醋酸纤维素为支持物的电泳方法叫醋酸纤维薄膜电泳，具有很高的流速和热稳定性以及非常低的吸附，将其溶于丙酮等有机溶剂中，即可涂布成均一细密的微孔薄膜,4、血清蛋白电泳将抽取的血液置入不加抗凝剂的试管中，使血凝固后，析出的上清液就是血清。血清中主要含白蛋白、球蛋白。,血清蛋白电泳是一种临床化验检查项目。由于蛋白的绝大部分均由肝脏合成，所以，各种蛋白质的质与量的变化，除与免疫性疾病等有关外，主要反映肝脏的生理、病理情况,血清中各种蛋白质的等电点均低于pH7.0，在pH8.6的缓冲液中带负电，向正极移动，分子小且带电荷多者，则移动速度较快,（二）血压测定1、血压是指血管内的血液对于单位面积血管壁的侧压，目前采用千帕(KPa)为单位。以前采用mmHg表示。收缩压：收缩期动脉血压的最高值(高压)舒张压：舒张期动脉血压的最低值(低压),2、血压测定方法此次实验采用Korotkoff氏听诊法正常的收缩压/舒张压(mmHg)收缩压:130mmHg舒张压:85mmHg,三、实验方法（一）电泳1、薄膜的使用在毛（无光泽）面划线，并写上座位号（如右图）2、浸润,3、点样（毛细管，一根，放回）4、电泳点样面朝下点样端置于负极5、染色染色10min6、漂洗脱色各5min（、）最后，水洗,（二）侧血压1、血压计的构造：减压计、袖带、气球2、安静时收缩压/舒张压（120/80mmHg）3、运动后的收缩压/舒张压,四、实验报告1、将电
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