2009执业药师考试之药物分析

,主讲：宋沁馨中国药科大学 药物分析教研室,药物分析,执业药师考前辅导,第一章 药典的知识( 299 页) 第一节 国家药品标准 一 国家药品标准定义：,二 药品标准内容： (11项， 多项选择) （一）名称 中文：CADN原则 英文：INN 原则 （五）含量或效价的规定 方法 结果表示 含量测定：理化法 百分率 （%） 效价测定：生物学法 国际单位 (IU) （六）性状 1. 包含内容 (3项， 多项选择) 2. 物理常数 常见物理常数 (多项选择),（七）鉴别 定义：对已知药物(有标签) 的真伪辨别 （八）检查 纯度检查： 检查杂质 （九）含量测定 对象：有效成分 (基础知识：单项选择),第二节 中国药典1 中国药典：全称、简称、英文名、缩写Ch.P2 历史：( 53，63，77，85，90，95，2000，2005 ) 1995 版特点：名称变化 2000 版特点：方法增补 2005 版特点：三部3 药典基本结构：(四部分),(1)凡例 定义(2)正文 (3)附录(4)索引,第三节 国外药典,1 美国药典：英文全称 ，缩写 USP29NF242 英国药典：英文全称 ，缩写 当前版2005年3 日本药局方：名称，英文缩写， 最新版JP(14)欧洲药典：英文，缩写， 当前版(第五版),第二章 药物分析的基础知识 (308页) 一、基本程序 ( 3 项) 多项选择 1. 取样数量 2. 检验 3 .记录与报告 报告内容： （不需送检人签章） 二、计量仪器的认证： 强制检定 目录和管理办法：国务院制定,一、误差 (一)绝对误差、相对误差 (定义) (二)系统误差、偶然误差 1. 系统误差 ： 定义与特点，种类（4种） 及消除方法 试剂误差：用空白实验消除 2 .偶然误差： 定义与特点，消除方法：增加 平行测定次数 提示：配伍选择,第二节 药物分析数据的处理 （311页）,二、有效数字 1.定义,85.称量时的读数为0.0490g，其有效数字的位数为 A.5位 B.4位 C.1位 D.2位 E.3位,2. 有效数字修约规则（ 提示: 配伍选择） 规则 测量数据 修约后数字 (保留三位）四 要 舍 25.3432 25.3六 要 入 36.4643 36.5五 成 双 五后有数要进位 36.0531 36.1 五后没数看前方 36.15 前为奇数就进位 36.15 36.2 前为偶数就舍去 36.25 36.2,3. 运算法则 加减法：按小数位数最少者先修约，后加减 乘除法：按有效位数最少者先修约，后乘除,例：以下三个数字0.5362、0.0014、0.25 之和应为 A 0.78 B 0.788 C 0.787 D 0.7876 E 0.79,第三节 药品质量标准分析方法的验证,一 验证内容： 8项 ( 313315 页) 提示： 多项选择 1.准确度： (定义, 表示方法) 2.精密度： (定义, 表示方法) 提示：基础知识，单选题,3. 专属性：(定义) 方法排除干扰能力4. 检测限：(定义，被检出) 方法：信噪比法 (S:N=3:1)5. 定量限：(定义，定量测定) 方法：信噪比 (S:N=10:1),S,N,6.线性：定义7.范围：定义 8.耐用性:定义 例: 在设计范围内，测试结果与试样中被测 物浓度成正比关系的程度为 A.精密度 B.耐用性 C.准确度 D.线性 E.范围,D,第一节 熔点 ( m.p) 1. 定义 2. 传温液选择： 3. 方法:取经干燥的供试品，装入玻璃毛细管中，装管高度为3mm，至传温液中，升温速度为每分钟1.01.5。 4. 注意事项：初熔、全熔定义,第三章 物理常数测定法,第二节 旋光度 () 1. 旋光度 ：定义 p361 2. 比旋度 ：物理常数, 定义3. 旋光度测定：与温度、波长有关 (20 ,钠光D线),4. 掌握计算公式: = C：g/ ml , l：dm例 1：样品10g溶于100ml, 于2dm管测定， 为-188。，计算旋光度。 = C l = -188 0.1 2 = -37.6。,C l,20,D,20,D,20,D,5. 应用实例 p318,第三节 折光率（符号：nD ）1.折光率2.方法 测定前以水进行校正。水的 折光率常数20为1.3330， 25为1.3325， 40为1.3305,20,n =,sin i,sin r,第四节 pH测定法一、pH: 氢离子浓度的负对数，表示溶液酸度。二、测定方法 5种标准缓冲液（pH值）三、注意事项 (1)选择pH相差3的两种缓冲液 (2)用与供试液接近的第一种对仪器定位，用第二种核对仪器 (3)重复上述操作后，定位旋钮不得再动,第四章 化学分析法,第一节 重量分析法(定义)三. 沉淀法（p323） （一）定义 待测物 沉淀形式 称量形式 Mg2+ MgNH4PO4 Mg2P2O7 Ba2+ BaSO4 BaSO4 （二）要求（提示：多选题） 沉淀形式： 称量形式：,（三）沉淀法结果计算,例：2 Mg2+ Mg2P2O7 换算因数= 2 Mg2+ / Mg2P2O7,称量形式分子量,换算因数 = 系数 .,被测组分分子量,F = n ,M,M,第二 六节 滴定分析法,1. 定义：以滴定液体积为测量值,第二节 酸碱滴定,一、（二）强碱滴定弱酸 (acid) 滴定剂：NaOH (0.1 mol/L) 计量点范围：碱性 指示剂： 酚酞、百里酚酞 能否准确滴定界限：C Ka 10-8,（三） 强酸滴定弱碱(base),滴定剂：HCl (0.1 mol/L) 计量点范围：酸性 指示剂：甲基橙、溴甲酚绿 能否准确滴定界限：C . Kb 10-8,二 、酸碱指示剂 （327页） 变色范围：pH=pKIn1 理论范围 2个pH单位 pH = -log H+三、滴定液配制和标定 NaOH 滴定液： 配制 浓度 0.1 mol/L 标定 浓度 0.1005 mol/L,第三节 氧化还原滴定,一、 碘量法（一）直接法 p330 滴定剂：碘液 指示剂：淀粉，或碘液本身 实例：维C及其制剂 p332,（二）剩余法 滴定剂：硫代硫酸钠 指示剂：淀粉 实例：复方对乙酰氨基酚中 咖啡因 的含量测定 p332,二、铈量法 滴定剂：硫酸铈 指示剂：邻二氮菲 测定药物：硫酸亚铁片 p333,四、亚硝酸钠滴定法 p334滴定剂：NaNO2药物特点：具芳伯氨基，如 对氨基水杨酸钠条件：（1）加入HCl （2）室温（3）加入KBr （4）滴定方法：先快后慢（5）终点指示：永停法，外指示剂法 （ KI-淀粉）,第四节 非水滴定法 一、非水碱量法 p335例如： 水中： HClO4 = H2SO4 = HCl = HNO3 均化溶剂 冰醋酸中： HClO4 HCl H2SO4 HNO3 区分溶剂,（一）基本原理 对 象： 弱碱性药物 溶 剂： 冰醋酸（醋酐） 滴定剂： 高氯酸 终 点：电位法、结晶紫,（二）有机碱盐的滴定 p336,1.氢卤酸盐： 加入醋酸汞,排除氢卤酸根干扰 2.硫酸盐： SO42-滴定至 HSO4- 3.硝酸盐： 电位法指示终点,二、 非水酸量法,（一）基本原理 对象：弱酸性药物 溶剂 ：DMF(甲基甲酰胺)、乙二胺 滴定剂：甲醇钠 终点 ：电位法、偶氮紫 应用：乙琥胺的含量测定,第五节 沉淀滴定法,一. 银量法：定义二. 分类 1. 铬酸钾法： Cl - 、 Br - 滴定剂：AgNO3 指示剂：K2CrO4 （中性溶液） 条件：剧烈振摇，防止生成的AgCl沉淀吸附Cl-。 2. 铁铵矾指示剂法：Ag + 滴定剂：KSCN 指示剂：Fe(NH4)2+SO4 （强酸性溶液） 条件：加入有机溶剂，防止沉淀转化。,3. 吸附指示剂法：Cl- 、 Br- 、l- 滴定剂：AgNO3 指示剂：荧光黄，曙红 条 件：加入淀粉、糊精等保护胶体。,第六节 配位滴定法,1. 分析对象：金属离子2. 滴定剂： 乙二胺四乙酸（EDTA）3. EDTA 与金属离子反应配比 1：14. 应用实例 葡萄糖酸钙（直接滴定） 硫酸锌（直接滴定） 氢氧化铝（间接滴定）,第五章 分光光度法 定义：以对光的吸收度为测量值 第一节 紫外-可见分光光度法 p345一、基本原理：价电子跃迁 1. Beer-lambert 定理 A= -lgT = -lg(I/I0) = E .C .l A: 吸收度(无单位) ；C: 浓度；E: 吸收系数； L: 比色池厚度 (cm),2. 吸收系数（物理常数 ） 摩尔吸收系数： 百分吸收系数： E1cm C = A / C单位：mol/L C = A / E1cm C单位：g/100ml,1%,1%,二、紫外-可见分光光度计 p346 1.光源 紫外区：氢灯，氘灯 可见区：钨灯 2.单色器 3.吸收池 紫外区：石英皿 可见区：玻璃皿 4.检测器：常用检测器,三、吸收度的测定方法 p347 1. 选择溶剂（对光吸收尽可能小） 2. 做空白实验 3. 选择测定波长（在最大吸收波长处） 4. 供试液制备（ 0.30.7） 5. 狭缝的选择 提示：多项选择,四、应用 (一)紫外光谱用于定性鉴别 1 2 3 （：多项选择）,（二）杂质检查 应用实例： 1. 地蒽酚中二羟基蒽醌的检查 2.肾上腺素中“酮体”检查 p399,(三) 含量测定 p348 （1）对照品比较法：有对照品 （2 ）吸收系数法： 无对照品 A= E C L C = A / E 注意：浓度C单位 g/100ml （3）计算分光光度法 （4）比色法,第二节 荧光分析法一、基本原理 价电子由激发态回到基态发射的光谱 说明：1. 发射光谱 2. 荧光比入射光波长长二、荧光光度计 单色器： 两个（作用不同） 特点：比紫外法灵敏度高三、应用 维生素 B1 鉴别、地高辛片含量测定,第三节 红外分光光度法 p350一、原理 分子振动、转动能级跃迁产生的吸收光谱 二、红外光谱仪 1. 常用检测器： 2. 固体样品制备：KBr 压片三、红外光谱与物质结构的关系 1.特征区与指纹区 2. 表 5-3 p352,四、应用 药物中不同晶型杂质检查：甲苯咪唑 A晶 检查 提示：比较紫外法、荧光法、红外法 原理、仪器 （配伍选择题）,第六章 色 谱 法 第一节 概论 p354色谱法：定义分配系数：定义 容量因子 ：定义 (提示：单项选择),第二节 TLC法一、基本原理 1.吸附色谱法 比移值（定性参数）：定义（最适宜范围） 2.常用吸附剂： 硅胶、氧化铝、聚酰胺三、应用 1. 鉴别 ：对比Rf 一致性 2. 杂质检查 （1）杂质对照品法 （2）自身稀释对照法,第三节 HPLC一、高效液相色谱法p359 1. 基本概念 色谱峰基本参数,2. 基本理论 （1）塔板理论（2）速率理论 范氏方程： H= A + Cu (B项忽略不计) 3. 仪器：常用检测器 p361 4. 分类 最常用固定相：十八烷基硅烷键合硅胶 最常用流动相：甲醇-水，乙腈-水,5 .系统适用性试验 p364 （1）理论塔板数 （2）分离度 （计算公式 ） 要求 R 1.5 （3）重复性 RSD 2.0 % （4）拖尾因子 T: 0.951.05,第四节 GC 1. 基本原理 （1）塔板理论（同HPLC） （2）速率理论（与HPLC不同）,范氏方程： H= A+ B /u+ Cu A 涡流扩散项 B纵向扩散项 C传质阻力项,第五节 电泳法1.电泳法： 定义淌度 适用范围2. 影响电泳分离因素： p370,第七章 药物的杂质检查 p373 一、 1. 杂质的来源 （1） 生产 （2） 贮藏 2. 杂质的分类 （1） 一般杂质 : 特殊杂质: （2）无机杂质： 有机杂质： （3）有害杂质: 普通杂质（信号杂质）:,二、 限量检查: p374 杂质限量：定义 限量表示：百万分之几（ppm） 百分之几（%）,p374,C V L = . 100% S 百万分之一 = 1 ppm = 10-6 1 ug = 10-6 g,第二节 一般杂质的检查方法,检查的方法,四. 重金属盐的检查 p377 （1）第一法 硫代乙酰胺 Pb2+ + pH 3.5缓冲液 + 硫代乙酰胺（H2S) PbS (掌握pH条件),(2) 第二法 高温炽灼后检查 (3) 第三法 硫化钠法 注意: 适用药物 (4)第四法 微孔滤膜法 （灵敏度高）,五. 砷盐的检查,古蔡法 砷 + Zn+ HCl AsH3 + HgBr2 棕黄色砷斑 Ag-DDC法 砷 + Zn+ HCl AsH3 + Ag-DDC Ag 测定A510 （灵敏度高）,标准砷溶液,药物样品,试剂作用 p 378 ZnHCl： 醋酸铅棉花： SnCl2 与 KI 试液： HgBr2 试纸： Ag-DDC：,六、干燥失重 包括常压恒温干燥法、干燥计干燥法、减压干燥法、热重法。七、炽灼残渣 检查有机药物中无机杂质。 p380九、有机熔剂残留量 检查药物中有害有机杂质。采用气相色谱法。（1）GC固定相：高分子多孔小球。（2）GC流动相：氮气。（3）检测器：FID。,第八章 芳酸及其酯类药物的分析 第一节：阿司匹林 (乙酰水杨酸)及其制剂 结构特点：具酯基、羧基、芳环,一、鉴别 1. 三氯化铁反应 （酚性羟基，pH46) 乙酰水杨酸 -水解成水杨酸 + FeCl3 -紫色,2. 水解反应(酯基) 阿司匹林-水解产生水杨酸（白色沉淀）3. 红外光谱法 （ 特征基团特征吸收峰）,二、特殊杂质检查 1. 溶液澄清度 2. 游离水杨酸 3. 易碳化物,三、含量测定 （1）直接滴定法 (原料药) 方法： 溶剂： 滴定剂： 指示剂：,滴定度(T)：1ml 标准滴定液相当被测物的mg数T=(待测物系数 滴定剂系数) 滴定液浓度 待测物分子量 标准滴定液浓度：0.1 mol/L（氢氧化钠） 阿司匹林分子量：180.2 T=0.1 1/1 180.2=18.02 mg/ml,(2)两步滴定法 (阿司匹林片及肠溶片) p387 原理： 中和 水解测定,(3）反相HPLC法 (阿司匹林 栓剂) 提示：剂型不同, 含量测定的方法不同 (配伍选择),第二节 布洛芬 结构特点：具羧基、苯环 一、鉴别 1. UV 2. IR,二、特殊杂质：,方法: TLC三、含量测定： 原料、片剂：酸碱滴定法 ( 具羧基) 胶囊：HPLC,第三节 丙磺舒结构特点：羧基、苯环、磺酰胺基 一、鉴别： (1) 与碱式三氯化铁反应 苯甲酸盐反应 (2)分解产物硫酸盐反应,三、含量测定 方法： 酸碱滴定法 滴定剂： 指示剂：,第九章 胺类药物的分析 第一节 盐酸普鲁卡因 结构特点：芳伯胺基、酯基、烃胺基,一、鉴别： 1. 芳香第一胺反应（重氮化-偶合反应） (芳伯氨基) Ar-NH2 +NaNO2 (HCl) + -萘酚- 显色 2. 水解反应（酯基） 盐酸普鲁卡因 - 水解为白色沉淀 (对氨基苯甲酸) 3.IR,二、 特殊杂质检查 检查： 对氨基苯甲酸 p394 方法： TLC 法三 、含量测定 亚硝酸钠滴定法 ( 芳伯氨基) 适用：原料、注射剂,第二节 盐酸利多卡因,结构特点： 具烃胺侧链（碱性）,一、鉴别,1. 与三硝基苯酚产生黄色沉淀。2. 与硫酸铜产生蓝紫色配位化合物。二、含量测定：非水溶液滴定法 溶剂：冰醋酸（醋酐） 滴定剂：高氯酸 指示剂：结晶紫 或电位法 加醋酸汞消除氯离子干扰,第三节 对乙酰氨基酚,结构特点：酚羟基、酰胺键一、 鉴别 1. FeCl3 反应 （酚羟基） 2. 水解后重氮化-偶合反应 对乙酰胺基酚-水解产生芳伯氨基-反应,二、 特殊杂质检查 1. 有关物质 TLC法 2. 对氨基酚：三、 含量测定 ：UV法 适用： 原料、片剂、注射剂、栓剂 结果计算方法： 吸收系数法,第四节 肾上腺素,结构特点： 具烃胺侧链，显碱性 一、 鉴别 1. 三氯化铁反应 显紫色,2. 氧化反应 肾上腺素+过氧化氢-血红色二、酮体检查 方法：紫外分光光度法 p348 药物：310nm无吸收 杂质：310nm有吸收,三、 含量测定 原料药：非水滴定法 注射液：反相离子对HPLC,巴比妥母核： （ 丙二酰脲类结构）,第十章 巴比妥类药物的分析,丙二酸,脲素,1,2,3,4,5,6,巴比妥类,性质 （1） 弱酸性 （2）与重金属离子络合 (丙二酰脲类反应) 一、 丙二酰脲类鉴别反应 1. 与银盐的反应 p402,2. 与铜盐的反应不含硫巴比妥 + Cu2+- 紫色含硫巴比妥 + Cu2+- 绿色 可区分含硫，与不含硫巴比妥,二、取代基的鉴别 1. 芳环的反应 （苯巴比妥） p401-402 加亚硝酸钠-硫酸 ：橙黄色 加甲醛-硫酸 ：玫瑰红色,2. 烯丙基的反应（司可巴比妥） p405 加碘液：棕黄色消失3. 硫元素反应（ 硫喷妥钠） 加Pb2+ ：白色沉淀，加热成黑色 p406 提示：掌握各药物的区分鉴别法,二、苯巴比妥特殊杂质检查1.酸度2.乙醇溶液澄清度 控制苯巴比妥酸杂质量。3.中性或碱性物质 控制中间体及分解产物。,第三节 含量测定,1.苯巴比妥： 银量法 p403 滴定剂： 终点指示： 2.司可巴比妥：溴量法 p405 滴定剂： 终点指示：3.注射用硫喷巴比妥钠： UV法 p407,第十一章 磺胺类药物的分析 代表： 磺胺嘧啶 磺胺甲噁唑结构： （1）具磺酰氨基， 显弱酸性（同巴比妥类） （2）具芳伯氨基,一、 鉴别：p408409 1.重氮化-偶合反应 (芳伯氨基) 原理： Ar-NH2 +NaNO2 + -萘酚-显色 2. 与金属离子（Cu 2+ ） 生成沉淀,三、 含量测定 1.亚硝酸钠滴定法（芳伯氨基） 适用：原料药与普通制剂 2.HPLC（中国药典2005） 适用: 复方磺胺制剂,第十二章 杂环类药物的分析 第一节 异烟肼的分析结构特点： 吡啶环(碱性)、 酰肼基(-NHNH2 强还原性、缩合反应),一、 鉴别 1. 与香草醛缩合反应（CONHNH2 ） 异烟肼+香草醛-黄色 2. 还原反应（CONHNH2 ） 异烟肼+硝酸银-银镜,二、 游离肼检查 p415方法：TLC 杂质对照品法 1 供试液 2 杂质对照液,三 、含量测定 氧化还原滴定：溴酸钾法 适用于：原料、片剂、注射剂 滴定剂：溴酸钾 指示剂：甲基橙,第二节 硝苯地平,结构特点： 还原性（二氢吡啶环） UV 酯键（水解）,三、含量测定 铈量法,第三节 诺氟沙星,结构特点： 羧基（酸性） 吡嗪环（碱性） F UV,第四节 盐酸氯丙嗪和奋乃静 氯丙嗪奋乃静结构特点： （1）碱性（烃氨侧链、含氮杂环） （2）UV谱有三个吸收峰 （3）S原子易被氧化,一、 鉴别 氧化反应（ S被氧化）： 盐酸氯丙嗪：加硫酸、硝酸显色 奋乃静：加过氧化氢呈色三、 含量测定 （一）盐酸氯丙嗪 1. 非水碱量法 ：原料药（加醋酸汞）,2. 紫外分光光度法 ：片剂及注射剂 片剂： 254nm测定(最强峰) 注射剂： 306nm测定(次强峰),排除维C干扰（二）奋乃静 1. 非水碱量法 ：原料药 2. 紫外分光光度法 ：片剂 3. 注射剂：提取-非水碱量法,第五节 地西泮、奥沙西泮结构特点： 具含氮杂环，显碱性 UV（荧光）一、 鉴别 （一）地西泮的鉴别 1. 与硫酸反应：显黄绿色 （二）奥沙西泮的鉴别 1. 水解后-重氮化偶合反应(潜在芳伯氨基） 地西泮 不反应,二、 有关物质检查 1. 地西泮的鉴别HPLC 2. 奥沙西泮的鉴别TLC 自身稀释对照法 1 供试液 2 对照液（供试液稀释液）,三、 含量测定（地西泮） 1. 非水滴定法 ：原料药 2. UV法：片剂 3. HPLC法：注射剂,第十三章 生物碱类药物的分析一、 分类及常用鉴别方法 药物 鉴别方法 杂质检查 1.盐酸麻黄碱 双缩脲反应 2.硫酸阿托品 Vitali 反应 1）莨菪碱 2）其他生物碱 3.盐酸吗啡 Marquis 1）阿扑吗啡 钼硫酸反应 2）罂粟酸 铁氰化钾反应 3）其他生物碱 4.硫酸奎宁 绿奎宁反应 其他金鸡纳碱 5.硝酸士的宁 重铬酸钾反应 马钱子碱,三、 含量测定（一） 盐酸麻黄碱（生物碱盐酸盐） 方法：非水碱量法 溶剂：冰醋酸 滴定剂：高氯酸 指示剂：结晶紫 盐酸盐滴定：加入醋酸汞,（二）硫酸阿托品 原料药：非水滴定法（三）盐酸吗啡 原料药：非水滴定 加入醋酸汞 片剂：UV法,（四）硫酸奎宁 （硫酸盐） 原料：非水碱量法 硫酸奎宁:高氯酸=1：3片剂：提取- 非水碱量法 硫酸奎宁:高氯酸=1：4,（五）硝酸士的宁 原料药：非水滴定 （电位法指示终点） 注射剂：UV法,第十四章 糖类药物的分析 第一节 葡萄糖及其注射液 结构特点：具还原性、 具旋光性一、 比旋度的测定方法： p436 = / Cl 单位：C（g/ml）， l（dm）,二、 鉴别 ：Fehling反应 葡萄糖 + 酒石酸铜-砖红色沉淀三、 杂质检查 1.葡萄糖 蛋白质：加入磺基水杨酸 乙醇溶液澄清度：检查糊精 2.葡萄糖注射剂 检查：5-羟甲基糠醛 方法：UV,四、 含量测定： p438 1. 葡萄糖：含量不要求，比旋度应符合规定 2.葡萄糖注射剂： 旋光法 加入氨试液（作用）,第二节 右旋糖苷20,结构特点： 高分子葡萄糖聚合物三 、检查 5. N 6. 分子量及分布分子排阻色谱法,四、 含量测定： p441 1. 右旋糖苷20：含量不要求，比旋度应符合规定 2. 右旋糖苷20-NaCl注射剂： 右旋糖苷20旋光法 NaCl铬酸钾法（Ag量法） p338,第十五章 甾体激素类药物的分析,环戊烷骈多氢菲,第一节 醋酸地塞米松一、 鉴别 （C17 -醇酮基） 加碱性酒石酸铜：橙红色沉淀 F反应三、 含量测定 原料、片剂：HPLC 注射剂：四氮唑比色法 原理： 加氯化三苯四氮唑， 产生红色,第二节 丙酸睾酮 含量测定：HPLC第三节 黄体酮 一 、鉴别： 1.甲基酮基鉴别： 加亚硝基铁氰化钠：显蓝紫色 2. 酮基鉴别 加异烟肼：显黄色 二 、含量测定：HPLC,第四节 雌二醇 一、鉴别 FeCl3反应酚羟基三、含量测定 HPLC,二、 特殊杂质检查 药物 特殊杂质 醋酸地塞米松 其他甾体，硒 丙酸睾酮 其他甾体 黄体酮 其他甾体 雌二醇 其他甾体,第一节 维生