专题九--生物技术实践PPT课件

.,1,2.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数,（1）实验原理,用培养基筛选菌株统计菌落数目设置对照,方法：法计数规则计算方法,稀释涂布平板,选择,（2）实验流程,土壤取样,样品的稀释,培养与观察,.,2,3.分解纤维素的微生物的分离（1）实验原理,纤维素+染料红色复合物（纤维素+）+刚果红染料培养基中出现以纤维素分解菌为中心的,刚果红,纤维素酶,透明圈,（2）实验流程,土壤取样选择培养挑选产生透明圈的菌落将样品涂布到鉴别的培养基上,纤维素分解菌,梯度稀释,.,3,二、传统发酵技术的应用1.果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌种及控制条件的比较,酵母菌,醋酸菌,毛霉,乳酸菌,无氧,无氧,3035,常温,.,4,2.果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程比较及亚硝酸盐含量的检测,无氧呼吸,有氧呼吸,.,5,.,6,材料,发酵液,材料的用量,泡菜坛,亚硝酸盐含量,.,7,三、植物有效成分的提取1.植物芳香油三种提取方法的比较,玫瑰油,薄荷油,利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来,.,8,柑橘,柠檬,通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油,使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油,.,9,2.实验流程设计（1）玫瑰精油的提取实验流程鲜玫瑰花+清水（14）油水混合物分离油层玫瑰油。（2）橘皮精油的提取实验流程橘皮漂洗静置再次过滤橘皮油。（3）提取胡萝卜素的实验流程胡萝卜干燥过滤胡萝卜素。,水蒸气蒸馏,加入NaCl,加入无水Na2SO4,除水,过滤,石灰水浸泡,压榨,过滤,粉碎,萃取,浓缩,.,10,四、植物组织培养技术和血红蛋白的提取和分离,1.植物的组织培养技术,（1）菊花的组织培养,原理：植物细胞的基本过程：离体的组织或细胞幼苗影响因素：营养、等实验操作：制备培养基,全能性,愈伤组织,移栽,pH,温度,光照,外植体消毒,接种,培养,移栽,栽培,（2）月季的花药培养,花粉发育经历了小孢子时期、单核期、双核期等阶段,四分体,.,11,影响花药培养的因素：选择的、的组成、亲本植株的生长条件、材料的预处理以及等实验操作：材料的选取,材料,培养基,低温,接种密度,消毒,接种,培养,2.血红蛋白的提取和分离,凝胶色谱法：根据分离蛋白质电泳：在电场作用下，带电粒子发生迁移的过程。利用了待分离样品中各种分子，,相对分子质量的大小,带电性质的差异,.,12,以及分子本身的的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而使样品中各种分子分离,大小、形状,样品处理：通过红细胞的洗涤、等操作收集到血红蛋白溶液粗提取：通过去除血红蛋白溶液中相对分子质量较小的杂质,（3）实验操作步骤,血红蛋白的释放,分离血红蛋白溶液,透析法,纯化：通过去除相对分子质量较大的杂质纯度鉴定：用进行样品纯度鉴定,凝胶色谱法,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,.,13,考点一微生物的培养与应用1.培养基（1）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。（2）培养基类型按培养基物理性质可分为固体培养基和液体培养基两种，其中固体培养基用于菌种分离、鉴定、菌落计数等。而液体培养基常用于科研或工业生产等。按培养基的功能可分为选择培养基和鉴别培养基。,.,14,按照人们对培养基中成分的了解程度可分为天然培养基和合成培养基两种。说明代谢类型不同的微生物，对培养基营养成分的要求不同，如自养型微生物可以利用无机碳源，而异养型微生物则必须利用有机碳源。不论代谢类型如何，微生物对营养物质的要求都包括碳源、氮源、水、无机盐、生长因子五类。,2.关于无菌技术（1）实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌；常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒。对不同的对象需采用不同的消毒或灭菌方法。,.,15,（2）在微生物培养时，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括四方面的内容：对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。,.,16,3.菌种的纯化（1）利用不同的菌体的菌落特征不同分离菌种，常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法两种：平板划线法是同一接种环在固体培养基表面连续划线，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，以形成标准菌落。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释程度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，进行培养，以形成标准菌落。（2）选择培养，利用不同微生物对营养需要的不同或对环境要求的不同，将不同微生物分开。,.,17,4.微生物数量测定测定土壤中的细菌数，一般选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养，测定放线菌一般选用104和105倍的稀释液进行平板培养，测定真菌一般用102、103和104倍的稀释液进行平板培养。实验时，每一浓度至少涂布3个平板，以增强实验的说服力和准确性。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少个活菌。（1）方法：稀释涂布平板法统计活菌数,.,18,（2）计数规则计算方法：每克样品中的菌落数=（CV）MC代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数V代表涂布平板时所用稀释液的体积（mL）M代表稀释倍数设置对照：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。,选择菌落数在30300的平板进行计数若某两个或多个稀释浓度下获得的菌落数均符合条件时，要看两者菌落数的比值，若小于2，则取两者的平均值；若大于2，则取较小值,.,19,苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，为土壤样品。下列相关叙述错误的是（）A.图中培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源B.如果要测定中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C.若图中为对照实验，则其中应以苯酚作为惟一碳源,.,20,D.使用平板划线法可以在上获得单菌落解析用苯酚作为选择培养基的特殊的碳源，也是微生物的能源物质，所以会影响其生长。测定培养液中细菌数目多用稀释涂布平板法。若为对照实验，则应含除苯酚外的其他碳源，以苯酚作为惟一碳源。使用稀释涂布平板法或平板划线法都可以在上获得单菌落。答案C,考点二果酒、果醋、腐乳、泡菜制作的注意事项1.果酒、果醋制作的注意事项（1）材料的选择与处理选择新鲜的葡萄，榨汁前应先冲洗，再除去枝梗，以避免去除枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会。,.,21,（2）防止发酵液被污染需要从发酵制作的过程进行全面的考虑，因为操作的每一步都可能混入杂菌。为避免杂菌污染：榨汁机要洗净并晾干，发酵装置要洗净并用70%的酒精消毒；若用简易的发酵装置，每隔一定时间排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。（3）控制发酵条件,.,22,2.腐乳制作的注意事项（1）影响腐乳品质的条件：水、盐、酒、温度、发酵时间等。水的控制：含水量约70%，用含水量过高的豆腐制腐乳，不易成形。盐的控制：盐浓度过高，会影响腐乳的口味，浓度过低，腐乳易腐败变质。酒的控制：酒精含量一般控制在12%左右。酒精含量过高，使腐乳成熟期延长。酒精含量过低，杂菌繁殖快，豆腐易腐败。温度的控制：温度为1518,适合毛霉生长。发酵时间易控制在6个月左右。,.,23,（2）防止杂菌污染用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。装瓶时，操作要迅速小心。加放卤汤后，要用胶条将瓶口密封。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。,3.泡菜制作的注意事项（1）泡菜坛的选择：选择气密性好的泡菜坛。用水封闭坛口使坛内与坛外空气隔绝，这是最简易的造成无氧环境的方法。这样，坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭，则会有许多需氧菌生长，蔬菜会腐烂。,.,24,（2）腌制条件的控制：腌制过程中要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量。发酵时间受到温度的影响：1820，腌制15天左右。温度高，时间短一些。温度过高、食盐用量不足10%、腌制时间过短，都容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。,图甲是果醋发酵装置。发酵初期不通气，溶液中有气泡产生；中期可以闻到酒香；后期接种醋酸菌，适当升高温度并通气，酒香逐渐变成醋香。图乙中能表示整个发酵过程培养液pH变化的曲线是（）,.,25,A.B.C.D.解析果醋制作的基本过程是挑选葡萄冲洗榨汁酒精发酵醋酸发酵获得果醋。在酒精发酵过程中，产生的CO2溶于水后形成碳酸（酸性较弱），pH会下降，但不会急剧下降；当接入醋酸菌后，在有氧,.,26,会下降，但不会急剧下降；当接入醋酸菌后，在有氧的情况下，醋酸菌能将乙醇变成乙醛，再将乙醛变成醋酸，酸性物质持续增加，pH持续下降，4条曲线中曲线是比较符合pH变化的。答案B,（09浙江自选模块）下面是有关食醋和泡菜制作的实验。请完成下列问题：（1）食醋可用大米为原料经三步发酵来制作：第一步：大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成（填中间产物），然后进一步分解成葡萄糖，这一过程可用（填淀粉指示剂）来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。,.,27,第二步：用菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，玻璃发酵瓶不应完全密闭的主要原因是。第三步：用菌将乙醇转化成乙酸，这一过程氧气。（2）泡菜发酵过程中，会产生多种酸，其中主要是，还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用法，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺偶联成色化合物。进行样品测定时，还要取等量水进行同样的测定，目的是。,.,28,考点三植物的组织培养技术1.植物组织培养原理植物组织培养的原理是细胞的全能性。不同细胞的全能性不一样。生物体的所有细胞全能性大小比较如下：受精卵生殖细胞体细胞；体细胞中：幼嫩植物组织（如芽尖）成熟组织细胞。,答案（1）糊精碘液酵母发酵过程中会产生大量CO2，使瓶内压力升高而可能引起爆裂醋酸杆需要消耗（2）乳酸（或有机酸）（光电）比色紫红作为对照,.,29,脱分化,再分化,诱导,2.植物组织培养技术和花药培养技术的异同,.,30,3.植物组织培养技术、微生物培养技术和无土栽培技术比较,.,31,.,32,请回答下列有关植物组织培养的几个问题。（1）离体植物组织和细胞培养常用的一种培养基是，其主要成分包括大量元素和。培养中常用的两种植物激素是和，两者使用时的、等，都会影响实验的结果。（2）植物组织培养的一般步骤为。（3）下图为植物组织培养的部分过程。过程是，过程是，A是。（4）植物组织培养过程中还需要维持一定的外界条件，一是要有适宜的，二是。,离体的器官、组织或细胞,A,植物体,.,33,解析MS培养基包括大量元素N、P、K、Ca、Mg、S和微量元素、有机物和植物激素（生长素和细胞分裂素）。使用激素时要特别注意激素的浓度、使用顺序、用量的比例，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向。答案（1）MS培养基微量元素生长素细胞分裂素浓度使用的先后顺序用量的比例（2）制备MS固体培养基、外植体消毒、接种、培养、移栽、栽培（3）脱分化再分化愈伤组织（4）温度和pH等无菌（环境）,.,34,（09山东卷）人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：请回答：（1）配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行。接种前，要对人参根进行。（2）用于离体培养的根切块，叫做。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于污染。,.,35,（3）用少量酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用方法，操作时应采用加热。,解析（1）灭菌是指用强烈的物理或化学的方法，杀死物体内外的一切微生物，包括芽孢和孢子。消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物。在组织培养过程中要防止杂菌的污染，需要对固体培养基进行灭菌，对人参根进行消毒。,.,36,（2）用于离体培养的离体的植物组织或器官（或切块）称为外植体。单个或少数微生物细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。我们可以根据菌落的特征判断微生物的种类。霉菌的菌落较大，肉眼可见许多毛状物，呈棕色、青色等，细菌菌落常表现为湿润、黏稠，有光泽。（3）果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁和胞间层，使愈伤组织分离。（4）人参皂苷溶于水溶性有机溶剂，可以用萃取法从培养物干粉中提取。萃取时要采用水浴加热，这是因为有机溶剂都是易燃物，用明火加热容易引起燃烧、爆炸。答案（1）灭菌消毒（2）外植体真菌（霉菌）细菌（3）果胶（4）萃取水浴,.,37,例1下列对生物技术在实践中应用的叙述，错误的是（）A.在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色B.普通洗衣粉只是缺少酶，不会污染环境C.制葡萄醋所需的温度要比制葡萄酒所需的温度高些D.凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的一种方法解析果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌在20左右的环境中最适合代谢和繁殖；果醋的制作需要醋酸菌，醋酸菌的最适生长温度为3035；普通洗衣粉虽然没有酶，但含有一定量的磷，所以使用较多时也会污染环境。,B,.,38,错因分析本题错因主要是对各种现代生物技术的原理的识记不到位，所以，熟记不同技术的原理、操作程序等是解此类试题的关键。,例2请分析回答下列有关生物技术实践方面的问题：（1）微生物培养基一般都含有：水和无机盐以及。（2）在微生物接种过程中，试管口需要通过酒精灯火焰12次，其目的是。（3）分离分解尿素的微生物的实验流程包括：土壤取样、梯度稀释、样品涂布到培养基上、挑选。（4）在植物组织培养过程中，往往需要使用植物激素启动细胞分裂，人为地控制细胞的。,.,39,（5）通过电泳分离提纯蛋白质时，影响蛋白质迁移速率的因素是蛋白质分子的带电性质、分子大小及。（6）根据果胶酶在果汁生产中的作用的系列实验结果回答下列问题：能正确表示pH对果胶酶活性影响的曲线是。在原材料有限的情况下，能正确表示相同时间内果胶酶的用量对果汁产量影响的曲线是。,.,40,解析培养基的成分一般包括四大部分：碳源、氮源、水、无机盐。微生物接种的过程中一定要注意无菌操作，在酒精灯火焰旁的操作就是灭菌。在分离微生物时是运用选择培养基进行筛选，能够生长形成菌落的就是所需要的微生物。组织培养需要把得到的外植体通过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化才会形成新植物。电泳法分离蛋白质时影响蛋白质迁移速率的因素是蛋白质分子的带电性质、分子大小以及带电荷量、分子形状。温度过高或过低都会降低酶的活性，酶的催化作用具有一个最适温度。由于原材料是有限的，因此相同时间内果胶酶的用量对果汁产量影响有一个最大值。,.,41,方法点评本题综合考查生物技术实践多个专题内容，综合性强，比较基础。针对高考，复习基础知识理解生物技术实践的基本过程，强化要点的记忆，是获得高分的最好办法。,答案（1）碳源和氮源（2）灭菌（3）选择菌落（4）脱分化、再分化（5）带电荷量、分子形状（6）乙丙,.,42,1.（09海南卷）请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题：（1）植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、和。（2）芳香油溶解性的特点是不溶于，易溶于，因此可用作为提取剂来提取芳香油。（3）橘子果实含有芳香油，通常可用作为材料提取芳香油，而且提取时往往选用新鲜的材料，理由是。（4）对材料压榨后可得到糊状液体，为除去其中的固体物获得乳状液可采用的方法是。,.,43,（5）得到的乳状液加入氯化钠并放置一段时间后，芳香油将分布于液体的层，原因是。加入氯化钠的作用是。（6）从乳状液中分离得到的芳香油中要加入无水硫酸钠，此剂的作用是。,答案（1）蒸馏法萃取法（2）水有机溶剂有机溶剂（3）橘子皮芳香油含量较高（4）过滤（5）上油层的密度比水层小增加水层密度，使油和水分层（6）吸收芳香油中残留的水分,.,44,2.（09辽宁、宁夏卷）（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑、和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能。（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的。,.,45,（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的。,（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是。（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。,解析（1）影响微生物培养的因素除了营养条件外，外界条件主要包括温度、酸碱度和渗透压等。由于大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、易培养、生活周期短等优点，所以常作为遗传学研究的实验材料。,.,46,（2）对于培养基和培养器皿要进行灭菌，对操作者的双手需要进行清洗和用酒精消毒，静止空气中的细菌在用紫外线照射后能够使蛋白质变性，并损伤DNA结构，使细菌死亡。（3）样品的稀释直接影响平板上生长的菌落的数目，实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得的菌落数在30300之间。（4）菌落的特征是判断微生物的种类的重要依据。对获得的纯菌可以依据菌落的特征对细菌进行初步检测。（5）要判断固体培养基是否被污染，可将未接种的培养基在适宜的温度下培养一段时间，若发现有菌落说明培养基已被污染。,.,47,（6）进行微生物培养时，使用过的培养基及培养物必须经灭菌后才能丢弃，防止培养的微生物扩散到环境中，造成危害。答案（1）温度酸碱度易培养生活周期短（2）灭菌消毒损伤DNA的结构（3）比例合适（4）鉴别（或分类）（5）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生（6）灭菌,.,48,3.（09上海卷）回答下列有关植物组织培养的问题。（1）用于植物组织培养的植物材料称为。（2）组织培养中的细胞，从分化状态转变为未分化状态的过程称为。（3）在再分化阶段所用培养基中，含有植物激素X和植物激素Y。逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如下图所示。据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的关系：,.,49,当植物激素X与植物激素Y的浓度比等于1时，；。（4）若植物激素Y是生长素，在植物组织培养中其主要作用是；则植物激素X的名称是。（5）生产上用试管苗保留植物优良性状，其原因是。,解析（1）植物组织培养时所取材料称为外植体。（2）让已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程，称为脱分化。（3）据图可得当激素X与激素Y的浓度比为1时，未分,.,50,化的细胞群形成愈伤组织；当激素X与激素Y的浓度比大于1时，未分化的细胞群分化形成芽；当激素X与激素Y的浓度比小于1时，未分化的细胞群分化形成根。（4）生长素的作用是促进细胞生长、分裂和分化；植物激素X能促进细胞分裂，是细胞分裂素。（5）试管苗为无性繁殖系，能够保持亲本的一切性状，不发生性状分离。答案（1）外植体（2）去分化（脱分化）（3）未分化细胞群经分裂形成愈伤组织当植物激素X与植物激素Y的浓度比大于1时，未分化细胞群分化形成芽当植物激素X与植物激素Y的浓度比小于1时，未分化细胞群分化形成根,.,51,（4）促进细胞的生长（伸长）、分裂和分化细胞分裂素（5）组织培养形成试管苗的过程属于无性生殖，后代不发生性状分离,4.根据从胡萝卜中提取胡萝卜素的相关知识及胡萝卜素的性质，回答下列问题。（1）胡萝卜素是色的结晶。从胡萝卜中提取胡萝卜素时，常用作为溶剂，原因是。（2）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、。,.,52,（3）在胡萝卜颗粒的加热过程中，应严格将和控制在一定范围内，原因是。（4）提取的胡萝卜素可通过法进行鉴定，在鉴定过程中需要用对照。（5）一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒的含水量成比。,解析（1）胡萝卜素的颜色是橘（橙）黄色，胡萝卜素是脂类物质，根据相似相溶原理，易溶于亲脂性有机溶剂。（2）提取胡萝卜素常用萃取方法，步骤：胡萝卜粉碎干燥萃取过滤浓缩胡萝卜素。（3）胡萝卜颗粒在加热过程中，应严格将温度和时间控制在一定范围内，防止胡萝卜素因温度过高和时,.,53,间过长而导致分解。（4）提取到的胡萝卜素通过纸层析法鉴定，该过程需要用标准样品作为对照。（5）一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒含水量成反比。答案（1）橘（橙）黄亲脂性有机溶剂（或有机溶剂）胡萝卜素是脂类物质（2）萃取萃取过滤浓缩（3）温度时间温度过高和时间过长会导致胡萝卜素分解（4）纸层析标准样品（5）反,.,54,5.葡萄汁、葡萄酒都具有一定的保健养生功效，随着人们生活水平的提高，我国葡萄汁、葡萄酒的需求量逐年增长。请回答：（1）葡萄可用来制作葡萄汁、葡萄酒，为减少资源浪费，提高产品的附加值，可对葡萄做怎样的处理？。（2）制作葡萄酒时，为防止发酵液被污染，应采取的措施是；在制作过程中，一般将温度控制在1825，原因是。（3）为研究发酵罐中酵母菌的生长状况，常要取样统计分析，并测定pH，判断取样先后顺序的主要依据是。,.,55,（4）葡萄梗的主要成分为木质