《动物细胞核移植》PPT课件

,目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常在10代以内，为什么？,保存10代以内的细胞，因为其生物学特性未发生大的变化，最接近于体内组织或细胞的生长特性，很适合用于药物测试、基因表达等实验研究。,点击此处添加标题文字,问题10：为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？,血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等，其中蛋白质主要为白蛋白和球蛋白。氨基酸有多种，是细胞合成蛋白质的基本成分，其中有些氨基酸动物细胞本身不能合成（称为必需氨基酸），必须由培养液提供。血清激素有胰岛素、生长激素等及多种生长因子（如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子等）；血清还含有多种未知的促细胞生长因子、促贴附因子及其他活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。因此，细胞培养时，要保证细胞能够顺利生长和增殖，一般需添加10%20%的血清。,专题一：,专题,2,动物体细胞核移植技术和克隆动物,随着细胞分化程度的提高而逐渐受到限制，全能性表达很难，但细胞核内仍含有该物种所需的全套遗传基因，具有发育成完整个体的潜能，即细胞核仍具有全能性条件：只有动物的细胞核是不行的，必须提供促进细胞核表达全能性的物质和营养条件，去核的卵母细胞是最合适的细胞，因为卵母细胞体积大、易操作，含有促进促进细胞核表达全能性的物质和营养条件,动物细胞全能性的特点？,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,2.原理:,1.概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。,细胞核的全能性,3.核移植种类,（难度高）,受体细胞：M期的卵母细胞,细胞分化程度低，恢复全能性容易,什么是克隆?,就是无性繁殖，具体的说，是指从一个共同的祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子、细胞或个体。,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,用核移植的方法得到的动物称为克隆动物,细胞质,细胞核,细胞核移植,多莉羊的培育过程,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,（1）动物的克隆与植物克隆一样吗？,（2）用动物体细胞进行克隆的过程,其实际操作过程是什么？,动物克隆过程的实际是细胞核移植,（3）简述高产牛体细胞核移植过程,思考,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,供体细胞培养,（M卵母细胞）,减数第二次分裂中期,去核的卵母细胞,供体细胞注入去核卵母细胞,受体细胞激活，完成分裂、发育,胚胎移植,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,供体细胞（供核）,细胞培养,体细胞,卵巢卵母细胞（M中期：供质）,去核,无核卵母细胞,注入,细胞融合,重组细胞,构建重组胚胎,胚胎移植,代孕母体,生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛,4.体细胞核移植过程,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,归纳:,（1）共分成两大阶段：,（2）移植过程用到的生物技术：,核移植和胚胎移植,动物细胞培养、核移植、早期胚胎培养、胚胎移植等,（3）严格来说新个体具有两个亲本的性状,据上图思考下列问题：,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，为什么必须先去掉受体卵母细胞的核？,提示：为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体细胞，在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前，必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，想一想，这是为什么？,提示：培养的动物细胞一般当传代至1050代左右时，部分细胞核型可能会发生变化，其细胞遗传物质可能会发生突变，而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此，在体细胞核移植中，为了保证供体细胞正常的遗传基础，通常采用传代10代以内的细胞。,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物，是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗？为什么？,提示：克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核，但其核外还有少量的DNA，即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。用教材中所述的方法克隆的动物不是供核动物完全相同的复制。此外，即便动物的遗传基础完全相同，但动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系，核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同，其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同，从这一角度看，克隆动物不会是核供体动物100%的复制。,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,动物克隆实例很多，为何多莉就举世闻名呢？,在1997年2月英国罗斯林研究所维尔穆特博士科研组公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功之前，胚胎细胞核移植技术已经有了很大的发展。实际上，“多莉”的克隆在核移植技术上沿袭了胚胎细胞核移植的全部过程，但这并不能减低“多莉”的重大意义，因为它是世界上第一例经体细胞核移植出生的动物，是克隆技术领域研究的巨大突破。这一巨大进展意味着：在理论上证明了，同植物细胞一样，分化了的动物细胞核也具有全能性,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,对比多莉羊和课本高产奶牛的克隆过程，找出操作过程的不同点？,多莉克隆过程的受体细胞是去核卵细胞，而高产奶牛的克隆过程的受体细胞是去核卵母细胞；多莉克隆过程是将供体细胞核注入受体细胞，而高产奶牛的克隆过程是将供体细胞注入受体细胞。,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,讨论分析上述哪一种措施更科学？并说明理由？,卵母细胞当中的细胞周期蛋白含量、活性比卵细胞高，用它作受体更容易成功,将供体细胞注入受体细胞，使克隆动物更像供体动物，操作也方便,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,5、体细胞核移植技术的应用前景：,在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程，促进优良畜群的繁育。,在保护濒危物种方面，可望利用体细胞核移植技术增加动物的存活量。,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,医药卫生领域可作为生物反应器生产医用蛋白质。,在治疗人类疾病时，转基因克隆动物细胞、组织和器官可作为异种移植的供体；人的核移植胚胎干细胞经诱导分化，形成相应的组织、器官后，可用于器官移植。,医药卫生领域可作为生物反应器生产医用蛋白质。,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,1、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是-（）A细胞系B细胞株C原代细胞D传代细胞,2、动物细胞工程技术的基础是-（）A.动物细胞融合B.单克隆抗体C.胚胎移植D.动物细胞培养,A,D,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞（）A.容易产生各种变异B具有更强的全能性C.取材十分方便D分裂增殖的能力强,D,4、下列属于动物细胞工程中的工具是（）A限制性内切酶BDNA连接酶C胰蛋白酶D果胶酶,C,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,5、在动物细胞培养的有关叙述中，正确的是（）A动物细胞培养的目的就是为了获得大量的细胞分泌蛋白B动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散C细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中D培养至50代后继续传代的细胞是细胞株,B,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,6、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为（）A原代培养B传代培养C细胞株D细胞系,D,7、动物细胞培养的正确过程是（）A.原代培养传代培养细胞株细胞系B.原代培养传代培养细胞系细胞株C.传代培养细胞系原代培养细胞株D.原代培养细胞系传代培养细胞株,A,二、动物体细胞核移植技术和克隆动物,8、下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是（）A培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清B原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞C动物细胞培养一般能够传到4050代，但其遗传物质发生了改变D动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞,C,动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。右图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息可以获得的正确结论有()A正常细胞与癌细胞的增殖速率相同B有无血清对正常细胞培养的影响不同C培养基中补充血清有助于正常细胞的培养D培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大,BCD,9、07年江苏高考题,10、下图是动物细胞培养的过程示意图。据此图回答。,(1)容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自_。(2)容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是_，然后用酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是_.(3)培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有_等。在此瓶中