《动物生化实验》实验牛乳中蛋白质的提取与鉴定_第1页
《动物生化实验》实验牛乳中蛋白质的提取与鉴定_第2页
《动物生化实验》实验牛乳中蛋白质的提取与鉴定_第3页
《动物生化实验》实验牛乳中蛋白质的提取与鉴定_第4页
《动物生化实验》实验牛乳中蛋白质的提取与鉴定_第5页
已阅读5页，还剩7页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

实验三、牛乳蛋白质的提取与鉴定,一、实验目的：,了解蛋白质的化学性质；掌握蛋白质的提取方法和鉴定理。,二、实验原理：,牛乳中含丰富的蛋白质（水分87.8%、脂肪3.5%、蛋白质3.1%、乳糖4.9%、灰分0.7%、能量29.kg/100kg），其中主要是酪蛋白。酪蛋白在牛乳中约占总蛋白量的5/6。,1、酪蛋白提取的原理,蛋白质是含羧基和氨基的两性电解质，在某一pH值溶液中，蛋白质分子所带的正电荷和负电荷相等，蛋白质以两性离子状态存在，这时溶液的pH值，称为该蛋白质的等电点（PI）,酪蛋白PI=4.8。在等电点时，蛋白质所带净电荷为零，溶解度最小，蛋白质沉淀析出，利用蛋白质的这个特点可将蛋白质提取出来。由于粗提出的酪蛋白中还含有脂肪，可用乙醇和乙醚洗涤除去。,2、酪蛋白鉴定的原理,酪蛋白中含有酪氨酸残基，酪氨酸残基的R基团为：含酚羟基，可与米伦试剂反应先生成白色絮状沉淀，继续反应生成红色沉淀。,三、操作步骤,（一）酪蛋白的制备,新鲜牛奶、醋酸纳缓冲液各5ml40分别加热至同样温度上清液：保留做鉴定（三）边加边摇混匀5min沉淀加4ml95%的乙醇离心5分钟上清液：弃去沉淀：做鉴定,2000r/min离心,（二）酪蛋白的性质鉴定,1、溶解度取3支试管+0.1MNaOH、0.2MHCl、10%NaCl各2ml+少许酪蛋白振荡观察溶解快慢。2、米伦反应1mlH2O少许酪蛋白加热观察10滴米伦试剂,（三）乳清中可凝固性蛋白质鉴定：将第一次离心所得的上清液徐徐加热，出现蛋白质沉淀（球蛋白、清蛋白）。,四、实验结果五、讨论,实验室普通离心机使用方法,1.将离心机放在坚实而平整的工作台上；2.在适用的离心管中加入样品，必须对称配重，否则会损坏离心机；3.按离心机转头的离心管位置刻度所对应孔插入，放下离心机顶盖；4.检查确认调速钮处于最低速位置；5.打开电源开关，调速到需要的转速；6.选择工作时间，调“选时”钮到需要的位置。7.离心完成，离心机自然停止。,2、离心机使用注意事项（1）严禁各种液体和杂物进入离心工作室，那样会损坏主机；（2）仪器电源线应有良好的接地，以免发生意外；（3）离心机工作时不要打开顶盖；（4）电压的高低以及不稳定现象直
人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论