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文档简介
实验二动物实验基本操作技术,.,实验目的,掌握:常用实验动物的捉取、固定与给药方法;实验动物的麻醉方法、气管插管方法、动静脉插管方法、尿管插管方法、输尿管插管方法。熟悉:颈部和腹部手术操作的基本技术,常用仪器设备与手术器械的使用方法,实验动物取血法和处死的方法。了解:常用实验动物的主要生物学特性及应用;动物的去毛、编号、去毛、取血和处死方法。,.,操作练习,全身麻醉家兔气管插管颈总A插管,.,哺乳动物手术器材清单,.,药品,戊巴比妥钠(1.5%)为中效巴比妥类药物。是最常用的麻醉剂,需保存在阴凉处。一般作用时间可维持2-4h。使用剂量为2ml/kg,使用方法为静脉注射(iv.)或腹腔注射(ip.)。生理盐水肝素(1:10000)肝素是一种酸性粘多糖,主要是由肥大细胞和嗜碱性粒细胞产生。肺、心、肌肉等组织中含量丰富,生理情况下血浆中含量甚微。无论在体内还是体外,肝素的抗凝作用都很强,故临床把它作为抗凝剂广泛使用。肝素在动物体内抗凝的剂量一般为3-10mg/kg,体外血液抗凝浓度为0.1-0.2mg/ml。,.,家兔全身麻醉,麻醉剂:1.5%戊巴比妥钠2ml/kg,给药方法:耳缘静脉注射,麻醉药物应用原则:依据动物体重计算麻醉药物的剂量;依据动物生命体征变化控制给药速度;掌握宁少勿多、分阶段给药的方式。,针对不同的动物,选择不同的麻醉药物、实施不同的麻醉方法。,.,家兔耳缘静脉注射麻醉具体操作,备皮。用手指轻弹血管,使耳缘静脉充盈。用左手食指和中指夹住静脉近心端,拇指和小指夹住耳缘部分,以左手无名指和小指放在耳下作垫。右手持注射器使针头由静脉末端呈30刺入,顺血管方向向心端推进约1-1.5cm放松左手拇指和食指对血管的压迫,右手试推注射器针芯,若注射阻力较大或出现局部肿胀,说明针头没有刺入静脉,应立即拔出针头,若推注阻力不大,可将药物徐徐注入,注射完毕后将针头抽出,随即以棉球压迫止血。,.,给药速度,前2/3快速推入,使动物能顺利、快速地渡过兴奋期;后1/3速度宜慢,且边注射边注意观察动物的生命体征变化,当确定已达到麻醉效果时,即停止给药,不必急于将剩余的麻醉药物全部推入。,麻醉成功标志,角膜反射迟钝,肢体肌肉松弛,疼痛反射消失,呼吸变浅变慢,.,动物实验常用插管技术,气管插管术颈动脉插管术颈静脉插管术,.,插管技术的基本步骤,1.动物称重、麻醉、固定。2.插管部位皮肤去毛、备皮。3.皮肤切开。4.皮下组织结构的分离。5.目标器官或组织结构的游离。6.导管的插入或固定。,家兔颈部神经和血管的解剖位置,迷走神经交感神经,减压神经,.,气管插管术,1、麻醉固定、颈部皮肤去毛、备皮,2、在颈前区正中作一约5-7cm的切口,3、钝性分离皮下组织、肌肉,游离出气管,穿线备用。,4、在甲状软骨下方第3-4软骨环处作一倒“T”形切口,向胸腔方向插入气管插管,确认插管通畅后用线固定,再在插管分叉处打结(二次固定)。,.,颈动脉插管技术,.,1、由颈正中剪开一约5-7cm的口、钝性分离皮下筋膜(略)。2、换能器与插管的准备。换能器与三通管、动脉插管连接,充灌满1:10000生理盐水肝素,并关闭三通管。,.,三通管的使用,3、用玻璃分针分离一侧颈总动脉,暴露血管2-3cm,穿双线备用。,4、结扎颈总动脉远心端,在近心端用动脉夹夹闭。,5、在靠近结扎线处用眼科剪剪一“v”形切口,切口大小约为动脉口径的1/31/2。,6、将充满肝素的动脉插管向近心端插入,用线打双结结扎,再固定于插管缠胶布处(二次固定)。,进入BL410/420系统。,选择“输入信号”选择“通道”“压力”点击“开始”实验按钮,即可在屏幕上观察到正常的血压曲线。,选择“实验项目”选择“循环实验”“兔动脉血压调节”实验模块。,7、打开生物机能实验系统,观察并记录动脉血压。,先小心松开动脉夹,确认无误后再取走。若有渗血或血液回流等意外,可立刻夹闭再进一步
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