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文档简介

常用试剂配方1. 黏片剂 铬明矾明胶1明胶与0.1铬明矾(硫酸铬钾)等量混合。5060中加热,用纱布过滤。一般载玻片预处理时涂明胶三层,自然干燥。2. 多聚甲醛戊二醛固定液10ml 25戊二醛20ml 10多聚甲醛溶液 (w/v)50ml 0.2M PH7.4PBS20ml 蒸馏水3. DAB 显色液配方 3,3二胺基联苯盐酸盐 (DAB) 20mg PBS 50ml 30过氧化氢 50ul用PBS溶解DAB,用前加过氧化氢混匀,避光染色4. 0.2MPBS配方 PH7.3 无钙镁Nacl 8.0gKcl 0.2gNa2HPO4 1.15g (Na2HPO412H2O 2.9g)KH2PO4 0.2g双蒸水 1000ml5. 0.01M PH7.4磷酸盐缓冲液 (PBS)先配0.1M PH7.4 PBKH2PO4 2.61g Na2HPO412H2O 28.94g加蒸馏水至 1000ml用时,取上液100ml,加NaCl8.5g,加蒸馏水1000ml.即为 0.01M PH7.4 PBS6. 盐酸酒精配方70乙醇 100ml盐酸 1ml混匀 7. 清洗液配方(玻片) 重铬酸钾:120g 蒸馏水:1000ml 浓硫酸:200m先将重铬酸钾与水置塑料桶中搅拌溶化,置桶于冷水中,慢慢加入浓硫酸并不断搅拌,溶液透明即可。此液可使用多次,至颜色变暗绿时,即失去清洁能力,不能再使用。8. 10中性福尔马林固定液配方 PH7.0 甲醛 100ml KH2PO4 4g Na2HPO4 6.5g ( Na2HPO412H2O 16.4g) 蒸馏水 900ml9. 多聚赖氨酸多聚赖氨酸 5g双蒸水 1000ml配制方法:称取多聚赖氨酸,溶于双蒸水充分溶解,此溶液为0.5%,4保存,也可-20保存备用,多聚赖氨酸可反复冻融效果无明显影响。工作液再稀释10-50倍,即工作浓度可为0.01-0.05%。使用时,将洗净的载玻片放入多聚赖氨酸溶液中浸泡5min,60烤箱烘烤1h,或室温过夜自然干燥,装盒备用。10. 枸橼酸钠0.01M枸橼酸缓冲液:1000ml蒸馏水中加枸橼酸三钠(C6H5Na3O7.2H2O)3g,枸橼酸(C6H8O7.H2O)0.4g使用时配成3.8%溶液,0.5ml可溶于5ml全血。11. 5%碘酊的配制碘片 2g碘化钾 1g等量纯化水和95%乙醇加至40ml制成酊剂,先将碘化钾1g放入大腹瓶中,加水和乙醇等量混合液20ml使其溶解后,再将碘片放入纱布囊中悬挂于液面令碘溶解,最后加余量的水和乙醇等量混合液冲洗纱布囊,至含量为40ml。12. 2.5%戊二醛固定液 0.2M磷酸缓冲液 50ml 25%戊二醛水溶液 10ml 双蒸水加至100ml(即最终体积为100ml)(本次采用缓冲液为本实验室0.2MPBS缓冲液,而所查0.2M磷酸缓冲液配方为:甲液:Na2HPO4.12H2O 71.64g 加蒸馏水溶解成1000ml乙液:Na2HPO4.2H2O 31.21 加蒸馏水溶解成1000ml按下表混合甲乙两液即得所需PH的磷酸缓冲液(50ml):PH 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4甲液(ml)13.3 18.8 24.5 30.5 36.0 40.5乙液(ml)36.7 31.2 25.5 19.5 14.0 9.5磷酸缓冲液对细胞无毒性作用,常用于配制戊二醛固定液,并适于做灌注固定。本缓冲液的特点是固定时容易产生沉淀,并容易生长细菌,不能长期储存。)13. HE染色分化液(1) 0.5%盐酸水溶液(体积比) 盐酸 0.5ml 蒸馏水 100ml一般是配500ml,即2.5ml盐酸 + 500ml蒸馏水(亦可用自来水)。(2) 0.5%氨水 氨水(氢氧化铵) 0.5ml 自来水 100ml一般是配500ml,即2.5ml氨水 + 500ml自来水。14. 油红O染液油红O 1g60%磷酸三乙酯 100ml将溶液水浴加热至1005min,并不停地搅拌,趁热过滤,待冷却后再过滤一次。该溶液可在冰箱内4保存,恢复室温,过滤后使用。15. 甘油明胶液 明胶 5g 甘油 35ml 蒸馏水 30ml 将明胶溶于蒸馏水中,水浴加热使明胶溶解,再加甘油充分混合,加1 2粒石炭酸,冷却后4保存,用时水浴加热。 16. 苏丹染液 苏丹 0.5g 60%磷酸三乙酯 100ml将溶液水浴加热至1005min,并不停地搅拌,趁热过滤,待冷却后再过滤一次。该溶液可在冰箱内4保存,恢复室温,过滤后使用。17. 苏木素染液改良的哈瑞(Harris)苏木素液A液: 苏木素1g 无水酒精10mlB液: 硫酸铝钾20g 蒸馏水200ml 两液分别溶解后混合,加热煮沸后,徐徐加入红色氧化汞0.5g,此时有大量气泡产生,故容器宜大,以防液体溢出,然后将染液迅速冷却,冷却后过滤即可使用,使用前每100ml加入冰醋酸6ml,并加入甘油(丙三醇)10ml。18. 伊红染液伊红有水溶性和醇溶性,伊红染液一般浓度为0.25% 1%.0.5%醇溶性伊红染液伊红B0.5g 95%酒精100ml将伊红溶于酒精内搅拌,全部溶解后即可使用,染色时间位13分钟。19. 2%碘酊配制碘20g 碘化钾(或碘化钠)15g 70-95%乙醇500ml 加水至1000ml取碘与碘化钾,置1000ml量杯中,加稀醇,搅拌,溶解后,再加适量的稀醇,使全量成1000ml。20. 75%酒精配制95%乙醇75ml 蒸馏水20ml将水加入乙醇里,带上一次性塑料手套将其混匀,导入瓶内。21. 蛋白甘油蛋清:甘油 = 1:1(体积比)22. 双抗(青霉素及链霉素溶液)医学微生物学实验指导100万U青霉素 1瓶

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