卡式法技术介绍

微柱凝胶免疫分析技术（MGIA）的简介一、 微柱凝胶免疫分析技术1990年，法国人Y. Lapierre发表文章*介绍了一项免疫学检测新技术：将抗原抗体反应与凝胶分子筛技术相结合，即微柱凝胶免疫实验。该技术的本质是血凝试验，即红细胞抗原抗体在微柱腔内的凝胶介质中发生肉眼可见的免疫凝集反应。微柱凝胶免疫反应的本质是红细胞凝集试验，也可称之微柱凝胶血凝试验（Microcolumn Gel Heamagglutination Assay，MGHA）， 在微柱凝胶管中，红细胞和相应抗体结合后，形成红细胞凝集团块。在一定离心力下，该凝集团块位于胶表面或胶中；而如果红细胞未和相应抗体结合，仍为分散的红细胞，在同样的离心力下，红细胞沉降到微柱管尖底部。二、 微柱凝胶法的较其他方法的优势微柱凝胶法是一种新的血型血清学技术，用于常规血型鉴定及抗体 筛检时，由于其具有易于标准化、反应结果可靠、特异性强、灵敏度高等特点，已在欧美等发达国家作为常规红细胞血型血清学检测技术应用于临床。美国FDA也已于1994年批准微柱凝胶技术作为红细胞抗体检测及ABO和RhD血型鉴定的选用方法。相比传统的玻片法和试管法都有自己的独特优势。1、相比玻片法有以下优点：1) 准确、敏感，可以检测到微弱的红细胞凝集，并在易于肉眼观察，防止误判。2) 标本用量少，每个测试孔只需0.8%人红细胞悬液50微升，同时也减少了污染。3) 判读结果客观，减少了人为因素的干扰，减少人为误差。4) 相对密闭系统，保护工作人员免遭感染。5) 结果稳定可保存达一周以上，便于工作人员事后查对，溯源。6) 12份标本可一次离心出结果，有利于临床大量标本检测。7) 在检测混合凝集方面有独特优势。由于在微柱凝胶法因为抗原抗体量是恒定的，操作标准化，并采取了特殊的分子筛技术，所以检测到抗原抗体弱反应的强度高于传统的试管法1,2，具有独特的优势，目前国内也已逐步应用于临床。 还有研究显示3微柱凝胶法对混合凝集(即在一个反应体系中同时出现阴性、阳性两种反应结果)的呈现在发现ABO血型亚型方面具有明显的技术优势(许多亚型红细胞在与标准血清反应呈现混合视野凝集，在传统的玻片法和试管法中不便于发现)。三、微柱凝胶免疫分析技术的血型检测方面的应用ABO.RhD血型定型检测卡（单克隆抗体）该检测卡可让红细胞血型正反定型检测及RhD抗原检测结果在同一张卡上实现，涵盖国家输血规范血型检测的基本项目，方便快捷。结果示例如下：下图为一例(A型,RhD阳性)的检测结果：案例：海某某，长春某医院患者，用微柱凝胶卡定型为AB型RH(D)为混合凝集，抗筛阴性(O型RH阳性筛检细胞，患者还未产生抗-D抗体)。该患一周前在某区医院输入1800ccRH阳性血(经该医院证实)，其本人确为阴性血。这一检测为病人下一步诊断和治疗提供了有力提示，保障病人安全。总之：在做ABO血型鉴定时,临床广泛应用的玻片法虽操作简单、方便快捷,但在临床实际工作中却时有发生血型鉴定错误现象,而且往往是在患者需要输血治疗申请配血时被发现错定血型,导致临床科室对检验科产生不良印象,认为检验质量差,检验结果不准确、不可靠。对检验科工作会产生很大的负面影响。试管法是传统经典的ABO、RhD血型鉴定方法,其结果准确可靠,但与微柱凝胶法相比,敏感性较差,操作难以规范化、自动化、检测结果不易保存,而微柱凝胶法用于ABO、RhD血型鉴定易于自动化、标准化、结果准确可靠,特异性强等优点被许多大医院所采用。另外，在输血前相容性检测方面，MGIA技术应用于常规的红细胞血型血清学检测已在国内越来越多地引起关注,各地也都不同程度地开展了一些MGIA法的相关实验。经过不断地与其它方法对比分析,不论从血型鉴定,交叉配血,不规则抗体筛检还是Coombs试验来看,所有结果充分表明MGIA优越于传统抗球蛋白法、木瓜酶法以及凝聚胺法。由于MGIA法的灵敏度高,特异性好,结果准确,操作简便快速,为其它方法所不能比拟。在发达国家,MGIA法早已常规应用于红细胞血型血清学检测,而在国内由于进口试剂价格等方面的原因,阻碍了其全面推广的速度,因此国产试剂盒的早日推广是适应国内医疗卫生事业发展的趋势。不管怎么说,MGIA法可为临床进一步提供可靠的诊断依据,为早日治愈病患者创造有利条件。参考文献：1. 1 郭 博,马 华,李兴武,等.手工微柱凝胶免疫检验法在ABO、RhD血型抗原鉴 定中的应用J.蚌埠医学院学报,2005,30(1):72-73.2 周小玉,许进明,华 岚,等.微柱凝胶法鉴定ABO血型正反定型不一致原因分