正常家兔磺胺嘧啶钠药动学参数的测定

1,正常家兔磺胺嘧啶钠药动学参数的测定,中国医科大学药学院药理教研室孙也之,掌握家兔动脉插管的手术过程；2.熟悉磺胺嘧啶钠血药浓度测定原理与测定方法；3.了解药动学参数的计算方法。,.实验目的,.实验药品:20%磺胺嘧啶钠30mg%磺胺嘧啶钠（标准液）5%三氯醋酸0.5%麝香草酚（用20%NaOH溶液配制）0.5%亚硝酸钠6.2N盐酸7.1%肝素（1ml/kg）8.20%乌拉坦（5ml/kg）,.实验动物家兔，2.02.5kg.,.实验设备家兔操作台手术器械,手术刀大镊子止血钳弯头小镊子眼科剪刀玻璃钩,.实验设备：3.动脉插管4.722型可见光分光光度计,.实验设备：5.离心机,.实验步骤：1.取家兔，称重，通过耳缘静脉给20%乌拉坦(5ml/kg).,耳缘静脉注射,如何确定家兔已经被完全麻醉呢?家兔同时出现以下三种体征:1.肌张力减弱；2.呼吸速率逐渐减慢；3.角膜反射消失。,2.颈动脉剖开固定家兔头部、绑四肢；用弯剪清理颈部毛发；沿家兔解剖学正中线摸到颈部甲状软骨，用手术刀沿甲状软骨向下切开颈部皮肤5-7cm，血管钳钝性分离，暴露气管；游离气管一侧的颈总动脉，与周围组织及迷走、交感神经分离；为了防止凝血，由耳缘静脉注射1%肝素（1ml/kg）；颈总动脉下穿过两根手术线，一根线头端结扎，另一根线备用，心端用动脉夹夹住。眼科小剪刀近头侧结扎处下剪小口，插动脉插管，结扎，固定。,3.空白血样品收集：从动脉插管放空白血0.5ml，用离心管收集，并摇匀。4.给药：向一侧耳缘静脉内注入20%的磺胺嘧啶钠（1ml/kg）5.血样品收集：在给药后每个时间点收集0.5ml血样。时间点：1、3、5、15、30、60、90、120min。每次取血前，要先放2滴血再取，以免不同时间点的血样间产生污染。,注意事项,动脉插管后，由耳缘静脉注射肝素（1ml/kg）。采血试管取血前一定要用肝素浸润；每次取血之前要先将残血放掉。每吸取一个血样时，必须更换枪头；加样时枪头不要碰到三氯醋酸液面。将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀，否则易出现血凝块。加亚硝酸钠和麝香草酚的顺序不要混乱。注意各比色杯要清洗干净、擦干并匹配、取药液要准确。离心时要注意离心管的配平。注意严格按照722型分光光度计操作方法进行操作。,.试管实验本实验测定磺胺嘧啶钠的原理：显色原理：磺胺类药物在酸性溶液中，可使苯环上的氨基（-NH2）离子化生成铵类化合物（-NH3+），进而与亚硝酸钠起重氮反应，产生重氮盐（-N=N+-）。此重氮盐在碱性溶液中与酚类化合物如麝香草酚起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合物。偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关。可用光度计测出其吸光度，通过与标准品吸光度的比较及运算，即可推算出磺胺的浓度。计算公式如下：,脱蛋白取空白血样与各时间点血样0.2ml，放入各离心管中并标记，每个离心管分别加水1.8ml(标准管加水1.6ml)；另取30mg%磺胺嘧啶钠标准液0.2ml加入到标准管中，以配置标准血样品；各试管分别加入5%三氯醋酸4ml，并摇匀，然后1000rpm离心5min。,2.重氮化及偶联呈色从各离心管提取上清2.0ml并转移至玻璃试管中试剂按照如下顺序添加：0.5ml2NHCl0.5ml0.5%NaNO21.0ml0.5%麝香草酚，然后摇匀。注意：加亚硝酸钠和加麝香草酚的顺序不要颠倒！,3.分光光度计分析：每个样品的吸光度值由722型分光光度计测定，最大吸收波长设定于480nm.以空白血样品作为空白对照进行分光光度计调零。,计算血药浓度偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关。可用光度计测出其吸光度值，通过与标准品吸光度值的比较及运算，即可推算出磺胺的浓度。计算公式如下：,实验结果,Table1.结果记录表,实验结果1.以时间为横坐标，浓度的对数为纵坐标，在半对数图上绘制磺胺嘧啶钠的药时曲线，以lgC对t做直线回归，得方程:lgC=a+bt。按lgC-t图判断房室数，如果基本