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文档简介
体外受精和早期胚胎培养,第二节体外受精和早期胚胎培养,榜山中学杨美山2013.5.14,1988年3月10日我国首例试管婴儿“神州试管婴儿之母”张丽珠教授和我国大陆首例试管婴儿郑萌珠,试管婴儿,1978年7月26日,世界首例试管婴儿“路易斯布朗”在英国诞生,现已成为母亲。,根据资料回答下列问题:1.资料上用到了什么生物技术?试管婴儿技术(包括体外受精、胚胎体外培养)和胚胎移植技术。2.试管婴儿和母亲正常怀孕,生产的过程有何异同?相同之处:都通过有性生殖产生,在母体子宫内发育形成胎儿。不同之处:受精作用在体外,并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。,存在困难:1、引进一头良种成年奶牛需要3万5万元。2、牛的生育率低,一头牛一胎只一个,一生只能生育四五次。(牛的妊娠期约280天),讨论1:是否有可能让引进的良种牛快速大量的繁殖?为什么?,牛的生育率虽然很低,但是牛的卵母细胞却相当的多,其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右。公牛产生的精子数目就更多了(精子数:50亿/mL),理论基础:,讨论2:如何让引进的良种牛快速大量的繁殖?,试管动物技术,是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。,快速繁殖动物优良品种,目的:,技术手段:,体外受精和早期胚胎培养,试管动物技术的三个基本操作环节:,第一步:体外受精,第二步:胚胎的早期培养,第三步:胚胎移植,精子,卵子,受精卵,早期胚胎,幼体,新个体,哺乳动物个体发育过程,试管动物,思考:子代数目的多少取决于精子数还是卵子数?,方法1:给供体注射促性腺激素,使一头母畜的卵巢一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子(超数排卵),之后从输卵管中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。,方法2-1:从屠宰场得到的废弃牛卵巢中采集卵母细胞,借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等的引导,从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和吸卵针的采卵器通过生殖道插入子宫,同时将探头贴在卵巢上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置,利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。,方法2-2:从活体卵巢中采集卵母细胞,比较两种方法采集的卵母细胞在体外受精前的处理有所不同,为什么?,比较两种方法采集的卵母细胞在体外受精前的处理有所不同,为什么?,2.精子的收集和获能,1)收集的方法:假阴道法,手握法和电刺激等2)获能处理:培养法:把精子放入获能液中。(啮齿动物、家兔和猪)化学法:把精子放入一定浓度肝素等溶液中。(牛、羊),3.受精,在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程,离心的目的是什么?,卵母细胞的培养的目的是什么?,CO2培养箱,二、胚胎的早期培养,复习:动物细胞培养的条件是什么?,二、胚胎的早期培养,发育培养液成分:,水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等.,牛、羊:桑椹胚或囊胚小鼠、家兔:卵裂期或囊胚试管婴儿:8个或16个细胞阶段,胚胎培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植。注意:不同动物胚胎移植的时间不同,为充分利用屠宰母畜卵巢上的卵母细胞,不妨将屠宰场和“胚胎工厂”合建。这样屠宰场的产品就不仅是鲜肉,还会生产出大量的胚胎和胚胎工程所需的原材料,你看这个想法可行吗?,奇思妙想,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛体外受精胚胎,胚胎移植,受体牛,良种犊牛,成熟期牛,屠宰加工厂,市场,采集卵巢中的卵母细胞,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,保存剩余的卵子和精子的方法是什么?,试管动物与克隆动物相比生殖方式:技术手段:遗传规律:,有性生殖无性生殖,核移植技术、胚胎移植,遵循无,体外受精胚胎移植,胚胎移植,采集良种母牛的卵母细胞,卵母细胞的体外培养,采集良种公牛精子,精子体外获能,体外受精,良种牛体外受精胚胎,受体牛,良种犊牛,成熟期牛,屠宰加工厂,市场,采集卵巢中的卵母细胞,“试管牛”工厂化生产的技术流程图,1哺乳动物的体外受精主要包括_,_和_等主要步骤。,卵母细胞的采集,精子的获取,受精,2收集精子的方法_:_:_:,假阴道法,手握法,电刺激法,3对家畜进行卵母细胞采集时,可用()处理促性腺激素B.促性腺激素释放激素C.肝素D.性激素,4从活体动物的卵巢中直接采卵时,不正确的方法是超声波探测仪B.内窥镜C.腹腔镜D.阴道镜,5体外受精的场所A.在水溶液中B.在盐溶液中C.在获能溶液或专用的受精溶液中D.在酒精溶液中,3.2体外受精和早
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