贴壁细胞和悬浮细胞PPT课件

贴壁细胞和悬浮细胞,悬浮细胞,英文名：SuspensionCell定义：细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，这类细胞称为悬浮细胞。,悬浮培养的细胞一般为淋巴细胞等血液系统来源的细胞，这种细胞体积小，它们天生就生活在悬液（血液中）。由于缺乏粘附分子的表达，在培养基中便自然呈现悬浮状态，细胞大体呈球形或椭球形。思考：如果这些血液中的细胞表达粘附分子会怎么样？,2,.,贴壁细胞,英文名：AdherentCell,定义：细胞生长必须有可以贴附的支持物表面，其依靠自身分泌的或培养基中提供的粘附因子才能在该表面上生长和繁殖，这类细胞成为贴壁细胞。,大多数的哺乳动物细胞在体内本身就附着于一定的底物而生长，而不是孤立存在的，其细胞表面表达有丰富的粘附分子。细胞在未贴附于底物之前一般均似球体样，当与底物贴附后，细胞将逐渐伸展而形成一定的形态，呈成纤维细胞样或上皮细胞样等。,3,.,贴壁细胞在体外培养为什么要贴壁？,重力作用,细胞下沉至瓶底,分泌细胞外基质和粘附分子,贴壁,贴壁过程,自然属性,主要原因,4,.,细胞外基质和粘附分子,英文名：extracellularmatrix&celladhesionmolecules,ECM&CAM定义：细胞粘附分子是众多介导细胞间或细胞与细胞外间相互接触和结合分子的统称；细胞外基质：是由动物细胞合成并分泌到胞外、分布在细胞表面或细胞之间的大分子。二者大多数均为糖蛋白，因此具有较强的亲水性因此能不能贴壁不仅仅关乎细胞是否有这种能力，也与有无合适的底物（培养瓶）相关。,5,.,培养瓶的材质,最早的细胞培养器皿是由玻璃制作的，由于玻璃的表面是亲水的，不经过特殊的处理，普通的细胞就可以贴附生长。思考：玻璃的培养瓶有哪些缺点？随着有机化学工业的发展，人们合成了聚苯乙烯（Polystyrene），简称PS。此后每次看到别人说PS，我都会想到聚苯乙烯，o()o。PS：PS透光性能好，具有较好的强度和易塑性，并且没有毒性。因此有一天一个学生物的孩子突发奇想，这聚苯乙烯做成培养瓶岂不刚好？化学帝：你有机化学是体育老师教的吧。,6,.,聚苯乙烯,聚苯乙烯结构表明了它是疏水的，即不具有亲水性，所以未经过特殊处理的聚苯乙烯培养瓶不能使贴壁细胞正常贴壁。生物控表示很伤心，化学帝很淡定的笑了笑：哥可以改造它。于是就有了今天广泛使用的聚苯乙烯培养瓶。TC处理（TissueCultureTreated）：TC处理表示该器皿经过表面的改性处理，适合贴壁细胞的培养。而悬浮生长的细胞，就不一定需要这样经过特殊处理过的器皿。但经过表面的改性处理后的细胞培养皿等一般也适合悬浮细胞的培养。,聚苯乙烯结构式,7,.,每个单位生产的培养瓶的处理方法均不同，左图为Coning公司的处理方法。图中的很多氢被加氧变成了羟基一种亲水基团，从而完美解决了贴壁细胞培养的问题。,8,.,贴壁细胞的单层生长,贴壁细胞（肿瘤细胞除外）在体外培养条件下，完成贴壁后均为单层生长，原因是贴壁细胞有接触性抑制的特点接触性抑制：1954年，由艾伯克龙比发现，一些细胞在生长过程中达到相互接触时停止分裂的现象，将其命名为接触性抑制（contactinhibition），后来证实了接触性抑制普遍存在于贴壁细胞之间。接触抑制的原理：细胞膜上有糖类和蛋白质共同构成的糖蛋白,也叫做糖被,它在细胞上起识别作用.当细胞增殖到一定程度,也就是互相挨在一起的时候,糖蛋白识别了这种信息,就会使细胞停止继续繁殖。,9,.,贴壁细胞的单层生长,一般认为接触抑制是细胞间的一种识别作用，对多细胞动物的形态形成与稳定具有重要性的作用。关于细胞的增殖，也有接触抑制的问题，进行单层培养的细胞，在培养器的底部形成一层后，在它的上面就会看到增殖停止，而不会形成多层。事实上，由于贴壁细胞的一面是紧贴在培养瓶上