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这些年检验圈那点事儿,医大总医院付红伟2016-04-29,自己圈内的事您知多少?,检验牛人知多少?潘柏申、丛玉隆、尚红、王辉、王兰兰、崔巍、张婕检验组织/协会知多少?中华医学会检验分会卫生部临检中心CNAS检验期刊/网站/论坛知多少?Clinicalchemistry,CCLM,丁香园检验领域知名企业知多少?Roche,Abott,Beckman,Hitachi第三方实验室/医学实验室托管金域,迪安,艾迪康,CompanyLogo,检验圈“门事件”,茶水门事件风扇门事件太阳门事件吃药门事件,CompanyLogo,CompanyLogo,检验医学大事记,改革步伐风起云涌医学检验-检验医学5年制?-4年制?7年制?检验技师-检验医师?技术创新此起彼伏PCR-芯片-质谱-高通量测序商业化浪潮推波助澜罗氏贝克曼西门子雅培手工半自动单机全自动-全实验室自动化,检验人的地位,六档:我们不是辅助科室,我们只是不那么主流而已病理:最喜欢宣称”你看看我们科在美国多NB“的科室没有之一影像(无介入)及核医学:请不要叫我放射科,伦家是医学影像科检验:领导们的低学历亲戚聚集地超声:妹妹乖乖躺下不要怕,哥哥只是往这个粗粗的东西头上抹点润滑液而已哦嘿嘿嘿嘿嘿嘿嘿心电图:我那么认真出报告干嘛,反正这帮临床废柴肯定要请心内科会诊的七档:不作死就不会死急诊:今天又没被打我好开心ICU(包括各个科室自己的ICU):今天又没收烂病人我好开心儿科:你们聊,我先走了。八档:咦这些家伙是怎么混进这个排名的所有行政科室,CompanyLogo,一档:人生赢家肿瘤:钱多事少医患和谐,上可申973发新英格兰下可各类小基金灌水文。二档:我是高富帅,我不和你做朋友心内(有介入):我很忙,我吃射线很受伤,但老子钱多,你咬我啊哈哈哈哈哈骨科(除了手足外):上至帝都积水潭下到街道黑诊所都无比滋润消化(有腔镜):老子见过的翔比你吃过的饭都多三档:事多闲少死得早,你,值得拥有泌尿:我好累。普外:楼上,呵呵。妇产:楼上,呵呵。心胸:楼上,呵呵。(大医院)神外:楼上,呵呵。(大医院)四档:闷声发大财,低调作大死整形:老子潜伏在医院就等着跳槽单干的那一刻口腔:老子潜伏在医院就等着跳槽单干的那一刻+1眼科:老子潜伏在医院就等着跳槽单干的那一刻+2皮肤:老子潜伏在医院就等着跳槽单干的那一刻+3,CompanyLogo,CompanyLogop-,如何做个好实习生,实验室自动化背景下人的作用和意义,掌握自动化仪器核心原理和质量保障体系,1.实习中常见的几点误区,感性认识VS理性认识以偏概全先入为主被动学习VS主动求知书本知识VS临床实践,CompanyLogo,国内检验科发展状况,CompanyLogo,CompanyLogo,国内检验人的生存状况,CompanyLogo,总医院检验人的一天,自动化给检验科带来的改变,传统分工协作模式的改变质量和效率的提高对管理模式提出了新的要求和挑战人被解放出来,对知识结构提出新的要求,CompanyLogo,CompanyLogo,临床生化自动化发展历程,CompanyLogo,手工定性检测时代,潘氏试验,磺基水杨酸酸法测定尿蛋白,CompanyLogo,手工定量检测时代,1958年581光电比色计问世1960年62型分光光度计问世,突破:定量检测,朗伯比尔定律,分别在1729年和1760年阐明了物质对光的吸收程度和吸收介质厚度之间的关系;1852年奥古斯特比尔,提出光的吸收程度和吸光物质浓度也具有类似关系。,CompanyLogo,17,光路和检测系统,自动生化分析仪以紫外可见分光光度法为其中心和主要的检测手段,与一般分光光度计一样,其光路和检测系统由光源、单色器和检测器组成。,18,单色器(monochromato),干涉滤光片(interferencefilter)分光系统:常带有340、380、405、500、550、600、660nm等几种滤光片。光栅(raster)分光系统:常在340(或293)800nm范围内选择1013种固定的单色光。,19,前分光和后分光方式,光栅分光有前分光和后分光两种方式,光源首先经过单色器分光,然后透射到比色溶液的方式为前分光。目前以后分光方式为多见,其优点是单色器中没有转动部分,双波长在同一时刻检测,因而提高了检测的精度和速度。,20,后分光方式,CompanyLogo,半自动检测时代,加样、加试剂、保温反应、自动监测、报告打印、清洗流动式VS分离式,突破:简单程序控制,CompanyLogo,单机全自动生化分析仪,CompanyLogo,连续加样软件操作系统智能预警系统,开放式VS封闭式,全自动生化分析仪组成,加样系统检测分析系统清洗保养系统数据处理及传输系统监控错误及报警系统,24,25,(1)取样和加试剂装置,1取样装置(samplingassembly):由取样针、取样臂、取样管路、取样注射器和阀门组成,能定量吸取样品并加入到反应杯。,26,27,28,取样针防交叉污染措施,绝大多数采用水洗方式(又有瀑布式和涌泉式之分),在吸取另一个样品前对接触样品的样品针内外壁进行冲洗;也有采用化学惰性液(chemicalinertiafluid)膜的方式来隔绝样品与取样针内外壁之间的接触。,29,混匀与搅拌装置,工作方式大多为旋转式搅拌,也有震动式搅拌方式。也设置了防止搅拌棒在不同反应液之间携带交叉污染的清洗措施。,30,温控系统,温控系统使反应杯浸浴在恒温环境:恒温循环水浴方式:温度传递速度快,保养要求较高。恒温空气浴方式:温度传递速度不如恒温水浴循环方式,保养简单。,CompanyLogo,干化学全自动生化分析仪,发展历史,CompanyLogo,1970年:化学干片技术起源于1970年的伊斯特曼-柯达公司1971年:借鉴普通临床生化反应序列生产出葡萄糖分析干片1976年:干片获得专利1978年:推出专利的干片生化技术1980年:FDA批准五个分析产品可以进入市场1995年:推出一些免疫产品,指示剂层支持层,均匀分布标本过滤大分子标本预处理提供反射测定的背景,扩散层试剂层,扩散层,包含干性试剂多层试剂,控制反应顺序,包含染料以产生显色复合物驱使反应完成,支持层,提供反应支持基垫允许光路自由通过,均匀分布标本,标本进入扩散层,标本迅速向四周扩散,标本均匀向下层渗透,标本与试剂反应,反应物在指示剂层被固定,干扰物质,反光背景,指示剂层,生成纯净的反射光,光源,滤光片,接收器,透射与反射,湿化学:采用透射光度法遵循朗勃比尔定律干化学:采用反射光度法遵循WilliamsClapper定律,吸光度,浓度,反射光,浓度,透射与反射,模块化全自动生化分析系统,生化+免疫,CompanyLogo,全实验室自动化,CompanyLogo,控制中心进样工作站条码阅读器自动化离心机开盖器分杯器生化分析仪免疫分析仪储存器输出工作站,2自动化设备的掌握要点,血球分析仪/凝血分析仪全自动生化分析仪(干化学/湿化学)全自动免疫分析仪全自动微生物鉴定及药敏分析系统,CompanyLogo,2-1血细胞分析仪,国际血液学专家组推荐的41条复检规则血细胞分析仪的各通道检测原理常见机器报警语言与对策标本质量对检测结果的影响,CompanyLogo,52,XE系列vsXN系列,改变检测通道和试剂。,染色液改变,无改变,无改变,New,New,New,FCM,RF/DC,DC,吸光度,FCM,数据分析系统的改良和溶血剂改变,New,FCM,DC,吸光度,1-1.规格:检测通道,1-2.基本原理:鞘流法,RBC/PLT通道,鞘液,试剂喷头,小孔,回收管,计数粒子较多,重复性好正确测定体积信息,电阻法的优点,血细胞通过电阻值发生变化脉冲被检测当血细胞通过检测部小孔时,电阻信号信号的大小与通过的细胞体积呈正比电阻变化的次数细胞数,感应区域(感应电阻变化的区域),时间,电阻值,红细胞,血小板,原理:电阻法,时间,电阻值,1-2.基本原理:SLS-血红蛋白法,HGB通道,1-2.基本原理:流式细胞术,WNRWDFWPCRETPLT-F通道,激光,分色镜,侧向荧光核酸和细胞器的种类和多少,侧向散射光细胞内部信息,前向散射光细胞的大小信息,XE系列,WBC/BASO,NRBC,FSC,FSC,SFL,SSC,XN系列,NRBC,BASO,SFL,NRBC,BASO,WBC,FSC,WBC,WBC,1-3.原理:WNR通道,凝血分析仪,各主要指标的临床意义阴性预测值/阳性预测值结果易受干扰的常见因素抗凝药物的影响凝固曲线的解读,CompanyLogo,全自动生化分析仪,质量控制体系(规范化流程控制)定标及质控策略主要指标的临床意义机器报警信息与应对策略,CompanyLogo,全自动免疫分析仪,抗原抗体反应的基本特点特异性可逆性比例性(钩状效应)免疫比浊/化学发光/电化学发光/ELISA/放免/胶体金/免疫组化等各自应用领域及主要优势标记免疫技术/分离技术的发展进程同位素荧光素酶化学发光素金属微粒磁珠法微粒子法量子点等等分离技术的应用不同免疫检测系统可比吗?,CompanyLogo,全自动微生物鉴定及药敏分析系统,细菌鉴定流程不同标本类型培养皿的选择全自动血培养系统的原理及质量控制药敏测定结果的解读生物安全理念及无菌操作意识科赫(koch)法则,CompanyLogo,新技术在检验科中的应用,PCR技术质谱技术第二代测序技术循环肿瘤细胞检测循环DNA检测芯片技术,CompanyLogo,3.实验室自动化背景下人的作用和意义,质量控制体系建设风险管理与预估自我再教育,CompanyLogo,质量控制体系建设,实验室认可CAP,ISO15189,核心理念通过规范化的管理,使结果可监控、有依据、对风险有效管理。室间质评/室内质控/正确度验证定标周期与方式可溯源性定期仪器和试剂性能验证及比对计划,Company
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