自动化方法验证

,自动化方法验证2004年7月林振贤博士,Ph.D.加拿大CVG协会,百万个机会,数据自动化,LIMS,数据备份/存档,数据采掘,物理自动化,样品制备/分析,筛选,合成,实验室自动化总况,实验室自动化的益处,增加产出改进员工和仪器的使用情况更少制备工作,更多灵活机动每时每刻都可以运转改进结果质量更好的精度和准确度降低误差方法转换容易安全性减少在有毒环境的中的暴露降低所有溶剂的数量,自动化系统,含量测定片剂处理工作站-Caliper前置工作站-Caliper溶出AT70溶出系统-Sotax多剂量工作站-Caliper,自动化工作站,片剂处理工作站图示,自动化工作站,溶出工作站图示,系统性能是自动化分析成功的关键从分析员到工作站建立该系统的可靠性和功效提供该系统可以准确地、精确地和可靠地执行任务的书面说明,系统合格化,状况,2个可能的状况：1.有手动方法且已经过验证2.没有手动方法,典型的分析程序包括:样品制备测量数据处理把手动制备步骤转化成自动步骤保持相同的浓度(相同的LC浓度)单个自动步骤代替多重稀释步骤顺序处理代替批量处理恒器或者超声处理代替晃动,自动化方法建立,自动化方法建立,方法建立包括：密度确定体积转移系统兼容性过滤研究温度研究残存度研究溶液稳定性萃取研究,溶液密度重量法溶剂配分或稀释如果要求二次稀释，准备好稀释液和过滤液体积转移剂型占有体积如果转移的体积很大，手动和自动的结果将会不一样,自动化方法建立,使系统单元的影响最小化可以从系统单元和过滤器中萃取的把溶剂通过过滤器或液体通道与没有经过过滤的溶剂比较系统单元和过滤器活性保留把被分析物或样品通过过滤器或液体通道没有经过过滤的样品比较处理过的没有经过过滤的样品之间的差别不应该超出公称浓度的1%。,自动化方法建立,过滤研究过滤预湿体积分析与过滤之间的平衡最佳流速高流速会造成过滤器堵塞（回流压力）低流速会造成精细颗粒穿过过滤器的容积可以有效过滤的溶液体积,自动化方法建立,温度研究萃取过程会造成萃取溶剂温度的显著上升温度上升会造成因溶剂密度的改变导致稀释误差要妥善选择溶剂和过程以使溶剂热效应最小能够在计算中纠正上述问题，或需要在方法中附加浸泡/澄清时间来允许溶液降温到室温,自动方法建立,转接同样的液体通道每次都要使用每分析一个样品后(最浓的)就分析一个空白样品标准稳定性蒸发和降解样品稳定性通常不是一个问题在重新测试稳定性前，在典型的环境条件下，存放这些溶液一段可以达到希望的稳定性的时间。,自动化方法建立,优化从基质中回收药物崩解单元的速度萃取步骤时段萃取步骤数目浸泡时间和澄清时间,自动化方法建立,验证的目标和范围自动系统描述验证参数实验程序接受标准论证极限偏差与修正,验证方案,基本假设通过IQ、OQ、PQ和规范的性能核实建立起来的系统基本效能验证参数等价性(如果存在有验证过的手动方法）回收率(选项，如果存在有验证过的手动方法）残存度(积累性残存度)重复性程式化,自动化放方法建立,等价性,与验证过的手动方法一致比较手动与自动结果分析上还是统计上的差别?设置合理的判据,等价性,含量均匀性/多重剂型含量均匀性：在全浓度（100%公称浓度）范围内10个确测点（理想情况测3批总共30个样品）批量含量：在全浓度（100%公称浓度）范围内6个确测点（理想情况测3批总共18个样品）通过手动方法获得相同批号样品的数据手动和自动方法平均差要满足3%,等价性,降解与杂质比较数据；大致情况应该类似;所有超出定量极限的杂质或降解产物应该存在，并且满足以下限度：1.0%+0.3%确定一个具有代表性的剂型，理想情况需要两批不同样品，还要与手动方法对这相同两批样品进行比较,等价性,溶出每一个溶出需要6个全浓度范围的确测量来确定(理想情况测3批总共18个样品)通过手动方法获得相同批号样品的数据在样品从同一次实验中获得的情况下,手动方法和自动方法之间的平均差异在Q时间点要求3%,否则if则要求满足5%,等价性,溶出情况比较,回收率(准确率),含量基质的活性成分回收率等价实验显示回收率接近公称浓度的100%在公称浓度80%-120%之间优化操作显示较好回收率每个水平+2%溶出在公称浓度0%-120%之间优化操作显示较好回收率每个水平+3%,含量均匀性样品基质的活性成分回收率是公称浓度的70130%中的最小范围(3个浓度/3次复测=9个样品)所有回收率应该是目标浓度的2%批量测试样品基质的活性成分回收率是公称浓度的80120%中的最小范围(3个浓度/3次复测=9个样品)所有回收率应该是目标浓度的2%,回收率(准确率),降解与杂质比较数据；大致情况应该类似;所有超出定量极限的杂质或降解产物应该存在，并且满足在前面列出的限度.在安慰剂中掺入可以得到的杂质/降解产物，涵盖公称浓度的定量极限至130%(3个浓度/3次复测=9个样品)所有回收率应该是目标浓度的10%,回收率(准确率),溶出样品基质的活性成分回收率是在Q时间点属性的20%中的最小范围(3个浓度/3次复测=9个样品)所有回收率应该是目标浓度的3%准确率可以通过满意的专属性、线性和精度来保证,回收率(准确率),残存度,所有样品使用相同的液体通道显示系统有效的清洗和最小的交叉污染程序操作典型的样品，接着做空白样品分析在空白中残留的活性成分在空白中活性成分的浓度小于前面分析样品的1%或小于公称浓度的1%,残存度,片剂含量分析三个典型样品，每一个样品后分析一个空白计算观察到的残存度水平,残存度,溶出分离每个容器的取样线一般来说，一次活性测试紧跟一次空白测试所以容器都具有共同的取样线在三个溶出容器中每一个都放入一片药片进行溶出操作接着进行一次容器中没有药片的操作对其它两个容器重复上面的步骤计算观察到的残存度水平,精度,精度精度说明产生一致性数据的能力可以比较两个独立操作的相对标准偏差百分比和平均值典型的接受标准含量测试:+2%（平均值）,+2%（相对标准偏差百分比的差值）溶出操作:+3%fo（平均值）+3%（相对标准偏差百分比的差值）,含量均匀性100%公称浓度范围需要10个确测点自动方法相对标准偏差（RSD）在手动方法RSD2%范围，且不得超过6%没有手动方法存在，自动方法的RSD要满足6%批量测试100%公称浓度范围需要6个确测点自动方法的RSD在手动方法RSD的2%范围没有手动方法存在，自动方法的RSD要满足3%,精度,降解物和杂质对于已知杂质数量的单批样品或掺杂样品的制剂需要6个确测点对于单个杂质：RSD15%对于杂质总量：RSD10%,精度,溶出100%公称浓度范围需要6个确测点自动方法的RSD不超过手动方法RSD的2%没有手动方法存在，自动方法的RSD要满足3%,精度,重现性实验室之内：如果有一个以上系统实验室之间：一般作为方法转让进行稳定性:样品制备步骤的程式化在大量的方法建立中都有描述分析测量的程式化将类似于一般的程式化评价,重现性和程式化,参考文献,Chapter5:DevelopmentandValidationofAutomatedMethods,ChantalIncledonandHermanLam;AnalytcialMethodValidationandInstrumentPerformanceverification,ChungChowChan,Y.C.Lee,HermanLamandXueMingZhang,WileyInterScience,2004.DevelopmentandValidationofAutomatedMethodsforFinishedProductTesting,AWalshetal,PharmaceuticalTechnologyEurope,p44May,2000.DevelopmentandValidationofAnalyticalMethodsChristopherRileyandThomasRosanke,Perga