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文档简介

.,任务二培养基母液配制,主题二培养基及其制备,.,任务二培养基母液配制,知识回顾,培养基的成分有哪些?,.,琼脂或卡拉胶,介质和溶媒,.,任务二培养基母液配制中浓度问题及相关计算,知识回顾,培养基的作用是?,相当于土壤,提供离体器官生长所需要的营养、环境和活性物质与土壤相比较,培养基缓冲性能很小,所以要求培养基各成分浓度精确,.,培养基各成分的浓度用什么表示可以既方便又精确地配制培养基呢?,质量体积浓度,.,任务二培养基母液配制,质量体积浓度:用单位体积(1升或1毫升)溶液中所含的溶质质量数来表示的浓度叫质量-体积浓度,单位常用:g/L或g/mL或mg/mL如:0.9g/L的NaCl溶液即每一升水中含有0.9克的氯化钠.或微克毫升表示或ppm、ppb表示。(ppm称为百万分率,lppm就是说百万之一或者是1微克毫升,ppb称为十亿分率,lppb就是说十亿分之一或0.001微克毫升)。表2-1(P20)大量元素20倍浓缩液NH4NO3浓度为33000mg/L表示1L培养基中质量为33000mg,即33g.CuSO4.5H2O0.05mg/L表示1L培养基中质量为0.05mg,即105g。,.,培养基配制时先配制母液的必要性?,.,什么是培养基母液?,母液:即贮备液,指培养基配制时欲配制液的浓缩液,一般母液配成比所需浓度放大10-100倍。这样不但可以保证各物质成分称量的精准性及配制时的快速移取,而且浓缩液体积小便于低温保藏。母液配制时比所需浓度放大X倍,在配制培养基时按配制培养基的体积(V升)的V/X吸取母液即可。,.,.,.,培养基母液配制,如何配制母液?,.,培养基母液配制步骤,计算,称量,溶解,定容,写标签,保存,按下表进行计算,电子天平(百分之一、万分方一)烧杯、药匙,蒸馏水、量筒、玻棒、可调式电炉、洗瓶,容量瓶(1000ml、500ml、100ml),母液名称、浓缩倍数、配制人员姓名、时间,冰箱,.,.,培养基母液配制计算,.,电子天平的使用方法,(1)开机开机前应检查天平的水平仪,确定天平处于水平状态。天平的水平调整可通过其底部调整螺丝完成。天平接通电源预热至指定时间。(2)校准天平使用前要进行校准工作,校准程序可按说明书进行。用内装校准砝码或外置砝码校准。当天平较长时间(5d以上)放置不用、天平位置发生移动、测试环境不理想或为获得精确称量等,均应在使用前进行天平的校准工作。(3)称量按下显示屏的开关键,待显示稳定的零点后,将被称量物体置于秤盘上,待数字稳定后,该数字即为被称量物的质量,按动相关的按键可以实现“去皮”,“增重”,“减重”等称量功能。(4)称量结束后,应及时清理秤盘,关好天平门。,.,母液1中CaCl2.2H2O溶解时需加热溶解。母液3FeSO4.7H2O和Na2EDTA需分别加热溶解后混合。加热溶解的成分需冷却至室温后再转移至容量瓶定容。,.,容量瓶的定容方法,.,.,本课小结,培养基母液如何配制?,.,.,作业:1.培养基配制中所需要的仪器和用具有哪些?2.培养基配制的

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