胺类药物的分析

一、结构与性质,（一）芳伯氨基或潜在芳伯氨基特性具有芳伯氨基或潜在的芳伯氨基，可用重氮化偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量，可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。（二）水解特性酯键或酰胺键易水解（三）弱碱性具脂烃胺侧链，弱碱性，可与生物碱沉淀试剂发生沉淀反应进行鉴别或非水碱量法测定含量。,（四）溶解性游离碱易溶于有机溶剂，其盐可溶于水。（五）酚羟基特性对乙酰氨基酚(FeCl3)。（六）与重金属离子发生沉淀反应盐酸利多卡因和盐酸布比卡因酰氨基上的氮可在水溶液中与铜离子或钴离子络合，生成有色的配位化合物沉淀。此沉淀可溶于氯仿等有机溶剂后呈色。（七）UV（八）IR,二、鉴别试验,（一）重氮化偶合反应,芳香第一胺类鉴别反应,直接：盐酸普鲁卡因、苯佐卡因、,间接：对乙酰氨基酚、非那西丁、醋氨苯砜、,盐酸普鲁卡因ChP（2000）鉴别（1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应（附录）取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。,对乙酰氨基酚ChP（2000）鉴别（2）取本品约0.1g，加稀盐酸5m1，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5m1，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性-萘酚试液2m1，振摇，即显红色。,（二）三氯化铁反应对乙酰氨基酚,（三）与重金属离子反应1.与铜和钴离子反应,2与汞离子的反应,（四）水解产物的反应,1.盐酸普鲁卡因ChP（2000）,鉴别（2）取本品约0.1g，加水2ml溶解后，加10氢氧化钠溶液1ml，即生成白色沉淀；加热，变为油状物；继续加热，产生的蒸气，能使湿润的红色石蕊试纸变为蓝色；热至油状物消失后，放冷，加盐酸酸化，即析出白色沉淀。,2.苯佐卡因ChP（2000）,鉴别（2）取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。,（五）制备衍生物测熔点,1三硝基苯酚衍生物,盐酸利多卡因ChP（2000）鉴别取本品0.2g，加水20ml溶解。（1）取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定（附录C），熔点为228232，熔融时同时分解。盐酸布比卡因ChP（2000）,2.硫氰酸盐衍生物,盐酸丁卡因ChP（2000）鉴别（1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80干燥，依法测定（附录C），熔点约为131。,盐酸布比卡因ChP（2000）鉴别（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录A）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.530.58与0.430.48。,（六）UV,（七）IR,盐酸布比卡因ChP（2000）鉴别（3）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集324图）一致。,三、杂质检查,（一）对乙酰氨基酚,1.有关物质,杂质来源中间体、副产物及分解产物,对氯乙酰苯胺杂质对照品法,检查方法TLC,其他杂质参比杂质对照品法,2.对氨基酚,杂质来源中间体、水解产物,反应原理,检查方法对照法,取本品1.0g，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1m1，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50g用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005）。,2.盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,检查方法TLC杂质对照品法,杂质来源水解产生,（一）亚硝酸钠滴定法1.原理具芳伯氨基的药物,四、含量测定,具游离芳伯氨基的药物可用本法直接测定。具潜在芳伯氨基的药物，如具酰胺基药物（对乙酰氨基酚等）经水解，芳香族硝基化合物（如无味氯霉素）经还原，也可用本法测定。,2.主要测定条件（1）加入适量KBr加速反应KBr为催化剂,NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2O,在盐酸存在下，重氮化反应的机理为：,（1）K1,（2）K2,K1300K2加入KBr，可增大被测溶液中NO+的浓度，所以能加快重氮化反应速度,（2）酸的种类及其浓度,在不同酸中重氮化反应的速度为：HBrHClH2SO4HNO3,芳胺：盐酸1:2.56；加入盐酸：重氮化反应速度加快；重氮盐在酸性溶液中稳定；防止生成偶氮氨基化合物，而影响测定结果,（3）室温条件下滴定1030（4）滴定速度：先快后慢滴定管尖端插入液面下2/3处，滴定液一次大部分放下，近终点时方改为慢速滴定,标准溶液在液面下加入，可避免NaNO2挥发。,3.指示终点的方法（1）永停滴定法ChP（2000）、BP（1998）,永停滴定法（附录A）用作重氮化法的终点指示时，调节R1使加于电极上的电压约为50mV。取供试品适量，精密称定，置烧杯中，除另有规定外，可加水40ml与盐酸溶液（12）15ml，而后置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾2g，插入铂铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约2/3处，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L或0.05mol/L）迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。,（2）外指示剂法KI淀粉糊剂或试纸2NaNO2+2KI+4HCl2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2O,4.测定方法盐酸普鲁卡因ChP（2000）取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录A），在1525，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2HCl,阳极,阴极：,（三）紫外分光光度法对乙酰氨基酚在0.4氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。,（二）非水溶液滴定法脂烃胺侧链，具弱碱性,对乙酰氨基酚ChP（2000）取本品约40mg，精密称定，置25ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5m1，置100ml量瓶中，加0.4氢氧化钠溶液10m1，加水至刻度，摇匀，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数为715计算，即得。,原料药吸收系数法,USP（24）对照法,（六）HPLC法盐酸普鲁卡因注射液ChP（2000）,可同时测定盐酸普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸离子抑制色谱法内标法定量,97：137采用亚硝酸钠法测定含量的药物有（）A.苯巴比妥B.盐酸丁卡因C苯佐卡因D.醋氨苯砜E.盐酸去氧肾上腺素,95：85下列药物中不能用亚硝酸钠滴定法测定含量者（）A.乙酰水杨酸B.对氨基水杨酸钠C.对乙酰氨基酚D.普鲁卡因E.苯佐卡因,96：81（99：72）.亚硝酸钠滴定法中，加KBr的作用是（）A.添加BrB.生成NO+BrC生成HBrD.生成Br2E.抑制反应进行,例1.ChP（2000）亚硝酸钠滴定法测定对氨基水杨酸钠的含量时，指示滴定终点的方法为（）A.自身指示终点法B.电位法指示终点C.永停滴定法D.氧化还原指示剂法E.酸碱指示剂法,例2.盐酸普鲁卡因采用亚硝酸钠滴定法测定含量时的反应条件是（）A.强酸B.加入适量溴化钾C.室温（1030）下滴定D.滴定管尖端深入液面E.永停法指示终点,96：127亚硝酸钠滴定法中，可用于指示终点的方法有（）A.自身指示剂法B.内指示剂法C.永停法D.外指示剂法E.电位法,苯乙胺类药物的基本结构,*,第二节苯乙胺类药物的分析BenzeneEthylamines,一、结构与性质,1.脂烃胺基侧链，显弱碱性2.酚羟基，易氧化变色，可发生三氯化铁反应3.具手性碳原子，具旋光性,4.溶解性游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水5.UV6.IR7.取代基：具芳伯氨基的盐酸克仑特罗可用重氮化偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量。,二、鉴别试验,1.三氯化铁反应2.氧化反应3.与甲醛硫酸反应4.UV与IR,5.与亚硝基铁氰化钠反应脂肪族伯胺的专属反应,三、杂质检查,杂质来源原料残存检查方法比较法（含量测定法）,（一）酮体的检查,检查原理利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量。,（二）有关物质检查盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇等药物检查方法：TLC,（二）溴量法盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺反应摩尔比为16,四、含量测定,（一）非水溶液滴定法原料药脂烃胺基侧链，显弱碱性,（三）比色法盐酸克仑特罗栓具芳伯氨基，可发生重氮化偶合反应,对照法定量,偶合剂N-（1-萘基）-乙二胺遇亚硝酸也能显色，干扰比色测定，所以在重氮化后，应加氨基磺酸铵将剩余的亚硝酸分解除去，再加偶合试剂N-（1-萘基）-乙二胺。,（五）荧光分光光度法,ex410nm、em520nm处测定荧光强度，对照法定量。,（六）HPLC法,重酒石酸去甲肾上腺素注射液离子对反相高效液相色谱法内标法定量调节溶液pH为3.8，加入离子对试剂十二烷基磺酸钠,例1.能和重酒石酸去甲肾上腺素发生颜色反应的试液为A.浓硫酸B.甲醛试液C.氨试液D.甲醛硫酸试液E.茚三酮试液,例2.盐酸异丙肾上腺素的检查项目是（）A.有关物质B.二苯酮C.盐酸D.醛E.酮体,第三节氨基醚衍生物类药物的分析DerivatesofAmino-ethers,茶苯海明,一、结构与性质,1.脂烃胺基侧链，显弱碱性2.UV和IR3.茶苯海明含卤素,二、鉴别试验,1.与硫酸反应呈色2.制备三硝基苯酚衍生物测熔点2.水解反应3.与AgNO3反应形成沉淀4.UV和IR,三、含量测定,（一）非水溶液滴定法原料（二）银量法茶苯海明中8-氯茶碱的测定,（三）酸性染料比色法盐酸苯海拉明片剂及片剂溶出度测定（四）阴离子表面活性剂滴定法（双相滴定法）盐酸苯海拉明注射液,1.原理滴定反应RX+MNaRM+NaXK1（可溶于有机溶剂）终点指示MNa+碱性染料有色物K2（可溶于有机溶剂）,2.测定对象有机碱性药物,3.测定条件,（1）酸性溶液,（2）本法应用前提：药物与滴定剂的反应优于滴定剂与指示剂的反应。若滴定剂不能先与药物作用而先与指示剂作用，则滴定无法进行。即使药物与滴定剂先反应，若滴定剂不在反应完成的等当点稍后与指示剂反应，则纵使可以滴定，也会造成误差。K1K2，但也不能相差太大，相差2个数量级以下，即K100。,（3）滴定剂阴离子表面活性剂,（4）指示剂碱性染料,二甲基黄或二甲基黄+亚甲兰（混合指示剂可提高灵敏度）,例1.氨基醚衍生物类药物的鉴别反应是（）A.硫酸呈色反应B.水解反应C.与硝酸银反应D.吸收光谱法E.三氯化铁反应,例2.盐酸苯海拉