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文档简介
实验室纯水系统的技术与发展,成立于1954年,总部位于美国麻省是一家以生物科学为主要目标市场的的高科技专业公司第一家将精密膜过滤技术投入商业化应用,也是世界上第一台实验室超纯水系统的制造商其业务分三大块:实验室纯水、生命科学、生物制药1973:Millipore推出Milli-Q超纯水系统,是世界上第一个实验室标准水纯化系统。1987:Millipore在美国纽约证券交易所上市。1994:Millipore出售了其Waters液相色谱部门,而将滤膜生产作为公司业务重点。密理博公司是标准普尔500指数的成份股之一,MILLIPORE简介,水:H2O.其中还有许多别的东西,杂质包括:颗粒物气体微生物离子有机物,水中的杂质,水中五大污染物质,颗粒离子有机物微生物气体,颗粒,阻塞过滤系统损坏泵系统吸附电荷影响离子浓度折射光线影响判读提供细菌滋生载体,离子,水的硬度与结垢问题影响溶液PH值带电基团与反应物结合对无机分析产生严重干扰特殊实验会产生影响,Na+,Ca2+,Al3+,Mn2+,Fe2+,Pb+,有机物,干扰有机分析的背景微生物滋生的营养物质包住去离子用的树脂两类特殊有机物热原、RNA酶,自然的和人造的,热原与RNA酶,热原也称为内毒素革兰氏阴性菌细胞壁分泌多糖刺激免疫系统产生发热高压灭菌180度4小时去除RNA酶主要作用是裂解RNARNA酶无处不在对高温酸碱都有耐受性可保持活性数周,细胞培养,分子生物学实验非常容易受到影响,细菌,活的细胞并有生长繁殖能力直径0.27m到3.0m(病毒0.04m到0.1m)水源,空气,人体都带菌细菌本身影响生物学实验裂解释放热原,酶等多种物质产生菌膜持续释放污染物堵塞仪器通道,Pseudomonasaeruginosa,Streptococcuspyogenes,气体,影响水的离子浓度和PH值直接参与反应影响水有效体积影响光学测定结果损耗仪器,氧气,氯气,二氧化碳,氡,纯化技术纯化效率,2311BD10,无机物,有机物,细菌,颗粒,反渗透,反渗透技术(膜孔径为埃级10-10m)可以去除大部分的杂质(离子,有机物,颗粒物,胶体,),离子交换树脂,固定阴离子阳离子聚苯乙烯骨架交联剂水,Ion-ExchangeResinBead,Beaddiameter:300to1200mBeadspores:1to100nmBeaddryweight40to60%T:-40to+40C,SEM*ofIon-ExchangeResinBead,*ScanningElectronicMicroscopy,ResinBeadStructure,FixedAnionCounterCationPolystyreneCrosslinkingAgent(DiVinylBenzene)HydratingWater,+,Example:thecation-exchangemodel,Polystyrene-DVB,DVB,PolystyreneCross-LinkedDivinylBenzene,Ion-ExchangeProcesses:MixedBed,Na+Cl-,IonsRemoval99.9%,MixedBed=theanionicandcationicresinsaremixedtogetherinasinglecylinder.Ion-exchangeprocess:,紫外光氧化有机分子,有机碳变为无机碳,-低压蒸汽汞灯-31cm长-36V直流电电子镇流器,紫外灯对TOC(有机物)的降低效果,UV185/254nm,反渗透水,人工合成活性碳:去除TOC(有机物),来源:高温裂解苯乙烯微球孔径小,相对均一(150)表面积:1100m2/g对小分子量的有机物能够快速吸收矿物离子溶出极低,建立一个水纯化链,自来水,各种纯化技术组合电阻率18.2MW.cmTOC5ppb,水箱,超纯水,纯水设备的水质监测,水温、水压电阻率、TOCRO膜截留率,两个重要概念补充,电导率值与电阻率值-水中的离子含量总有机碳值(TOC:totalorganiccarbon)-水中可氧化有机物含量,水的电导率值与电阻率值(Conductivity30/70methanol/water;pH4.8,HigherTOCWaterLowerTOCWater,对基线的影响,TOC的大小直接影响到液相检测时的基线水平,LC-MSTICprofileofreagentwatersources,BottledHPLC-gradereagentwaterversuspolishedwater,TOCofbottledandpolishedreagentwaters,UsingaSievers800TOCanalyzer:off-linesampleaspiration,在低检测波长处容易形成鬼峰,BottledHPLC-gradereagentwaterversusnewlypolishedwater,对色谱柱的影响,流动相TOC的重要性,最常用的色谱柱4.6mm200mmC18进样量20ul假设样品中TOC为10000ppb流动相流速通常为1ml/min,假设平均50为水相,即流速为500ul/min假设我们以TOC为30ppb的水相做流动相201000050030XX40/3min13.3min,色谱柱使用寿命和TOC的关系,DNASep,色谱柱,1,2,3,4,5,6,7,用瓶装HPLC水进样1950次后,DNASep色谱柱效,Initialrun,用Milli-Q水进样6400次后,DNASep色谱柱效,Initialrun,总结:TOC值高的水质对色谱的影响,溶剂导致的杂峰峰面积影响TOC值和LC基线的关系包覆色谱介质,降低柱子使用寿命分离和检测精度降低,其他污染物对HPLC的影响,离子:盐类:损坏泵细菌:形成菌膜,损坏分离柱颗粒:损坏泵头,堵塞系统,超纯水,“TypeI”一级水离子含量:1ppb(1g/L)离子存在于水中电导率18.2MW.cm25C有机物:TOC5ppb细菌1cfu/mL颗粒0.2m:1/mL,HPLC我们需要什么水质?,Milli-QAdvantageA10,Elix+Tank+Milli-QAdvantageA10,超纯水的精细再分级,RegularLabApplications,ChromatographyApplications,CellCultureApplications,MolecularBiologyApplications,EDSfreewater,Milli-pak,Bio-pak,EDS-pak,TypeIIWaterRinsing®ularapplication,适应现代实验室多样化趋势,VOC-Pak,VOCfreewater,超纯水使用注意事项,1要监测超纯水的所有指标的含量,电阻率指标代表了水中的离子含量,需要密切关注TOC指标代表了水中的有机物指标,而TOC值和电阻率指标的好坏基本关系不大。,2水即取即用,随时间变化,超纯水水质迅速下降电阻率指标下降如图所示,resistivity(M.cm),10-,20-,4-,0-,20,40,60,80,100,Time(min),3盛水容器(清洁,材质好),在玻璃容器中储存,PE容器,4排掉初期产水的0.5-1L,停止运作24H的初期与排水1L后的HPLC比较,5取水口的管理(避免添加软管),添加软管与直接取水的HPLC比较,6取水环境(灰尘,颗粒性物质),单位:ppt,7避免产生气泡,超纯水使用应注意事项,要监测超
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