中药材农药残留检测方法与标准研究

2011年6月第13卷第6期中国现代中药MODERNCHINESEMEDICINEJUN2011VO113NO6。落中药材农药残留检测方法与标准研究佟鹤芳，薛健，吴晓波中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所，北京100193摘要通过阅读近期文献，对中药材农药残留检测、限量标准以及脱除等方面的相关研究进行综述和分析，提出应加快检测方法和中药材农药残留限量标准的研究、开发中药材残留农药脱除技术、从源头控制农药施用、提倡绿色药材种植的建议。关键词中药；农药残留；检测；脱除中药作为防病、治病、保健的特殊用品，为国内患者或体弱者服用，并以食品补充剂的身份出口国外，随着国内外对中药认识的加深以及需求量的增长，人们对中药安全性要求不断提高，中药材中农药残留问题成为人们关注的焦点。由于某些农药具有残留周期长、污染范围广的特点，为保护消费者健康，针对不同药材类型中农药残留特点制定限量标准显得至关重要。建立高灵敏度、高选择性、简便快速的多残留检测方法，是农药残留检测技术的发展趋势。同时，提倡绿色种植、建立科学的管理的体系、从源头减少农药污染是保证中药用药安全和人体健康的有效手段。1中药材农药污染现状11中药材农药污染途径中药从种植到最后成为成品的过程中极易被外源性有害物质污染，其污染途径包括以下几点第一，来源于环境污染，主要是有机氯农药如六六六、滴滴涕等，在外界环境或有机体内均不易被破坏、分解，长期残留在自然界土壤、水源中，药材植物体在生长期中吸收土壤或水中的有机氯农药，并在体内细胞中蓄积，致使中药材被农药污染；第二，药材在加工、储藏过程中的污染，主要是为防止生虫变质用农药对库存药材进行熏蒸，或药材炮制过程中辅料引入的污染；第三，是由于在种植过程中农药不合理的使用，或药材植株通过喷洒在土壤或叶面上的过量农药直接吸收。12中药农药污染现状在中药材生产中，由于缺乏药材专用农药，农民为防治病虫危害随意使用农药。某些品种药材时有残留农药检出J，其中检出率较高的是有机氯类农药，有机磷和氨基甲酸酯类农药检出率较低，主要与农药本身性质有关；一般野生中药材中农药残留检出量较人工种植的中药材低；中成药等经适当加工后农药检出量较低；也有一些中药加工工艺过程中引人含有农药残留的辅料致使炮制后的中药农药残留量升高OJ。2中药材农药残留检测方法研究21中药农药残留检测前处理技术中药材农药残留量分析过程具有以下特点，一是农药残留含量较低，在进行检测前，需经过农药残留的提取、分离和富集等前处理过程。二是中药材的质地差异大，对于植物根、茎、叶、花等不同质地的样品要采取不同的前处理方法剖。中药材农残分析的前处理过程是进行农残分析检测的重要环节，一般包括提取和净化过程。传统的提取方法有浸渍法、匀浆捣碎法、索氏提取法、震荡法、超声提取法、微波辅助提取法和消解法等。常见的净化法有液液分配法、吸附色谱法、同相萃取法、凝胶渗透色谱法、磺化法、凝结剂沉淀法、薄层色谱法、冷冻法、氢氧化钾净化法等。目前，用于农药残留分析的较新前处理技术有固相微萃取技术SPMEE71、超临界流体萃取技术SFE、加速溶剂萃取技术ASE、免疫亲和色谱技术IAC、基金项目国家重大创新药专项中药中农药残留、重金属检测与分析关键技术研究2009ZX09502027，2009ZX09308006，2009ZX0930800115通讯作者薛健，EMAILXUEJIAN200SINASON492011年6月第13卷第6期中国现代中药MODEMCHINESEMEDICINE基质固相分散萃取技术MSPDE、分子印迹技术MITS等。这些新技术在环境样品和食品的农药残留分析中应用广泛，在巾药材农残分析中应用较少，但其方法在理论上是可以通用借鉴的。超临界萃取SFE是目前分析复杂基质中农药残留的新技术，能有效、快速、少污染地分离出有害物质，特别是以二氧化碳CO，为萃取剂的超临界萃取技术，对多种杀虫剂、杀菌剂和除草剂的提取方面显示出独特优势。例如，将SFEGCFPD技术应用于研究小麦粉样品中甲基毒死蜱和马拉硫磷等有机磷农药残留，此方法不使用有毒有机溶剂，与传统的液相萃取一凝胶渗透色谱净化LEGPC的样品前处理方法得到的结果相似。同时，超临界CO流体还可以用于有机氯、有机磷和有机氮等多类农药残留的同时测定”。另外，加速溶剂萃取ASE作为提取新技术，主要是具有机溶剂消耗少、萃取效率良好、提取时间短等优点，可以提高农药提取率，目前ASE研究较多的是与凝胶渗透色谱GPC或固相萃取净化技术联用，结合气相或液相分离，检测样品农药残留量情况。如刘忠指出可将样品茶叶用环己烷一醋酸乙酯11加速溶剂萃取，FLORISIL固相萃取柱净化，气相色谱一电子捕获检测器GCECD进行检测，测定氯杀螨醇有机氯与多种除虫菊酯类农药残留量，平均回收率都在90以上，RSD在0338，方法快速、溶剂用量少、重现性好；王耀建立以ASE萃取，凝胶渗透色谱法除去脂类、蛋白质等，再经CARBPSA小柱净化，以GCMS定性分析咸鱼中的残留有机磷农药。固相微萃取技术作为一种新型前处理净化技术，是在同相萃取的基础上发展起来的，本身集采集、浓缩于一体，可与气相色谱和液相色谱联用，具有操作时间短、样品用量少、重复性好等优点。例如有文献指出可采用100M聚二甲基硅氧烷萃取头，顶空一同相微萃取HSSPME方式，GCMS测定草莓和樱桃中的乙硫磷、对硫磷、倍硫磷等7种有机磷农药残留量，或采用85M聚丙烯醋酸萃取头、顶空一同相微萃取测定水中158种农药残留量的GCMS方法。22中药材农药残留检测方法对中药材农药残留污染测定方法的研究，近几年气相色谱法GC、高效液相色谱法HPLC、气质联用法GCMS和液质联用法LCMS在多种类型农药的多残留分析方法、同类型农药的多残留分析方法以及新的单个农药在多种试样中的分析等50研究领域均发挥重要作川。前H1人J比较权威的FF1药农药残留分析方法足巾罔药2010版R11收录的方法，用气相色谱测定药材、饮片及制制R1仃机氯六六六、滴滴涕及五氯硝基莽、仃机磷埘硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、胺磷、久效磷、二嗪农、乙硫磷、屿托硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷、菊酯类氯氰菊酯、氰戊钓酯、溴氯菊酯共24种农药残，但药材巾仪_R、美芪中明确规定了农药残留限量。农药残留检出率较高的是有机氯类农约。，针对不同药材建立起的有机氯类农约的检测法是中药材农残检测领域的主要向，同时，刈于蔷性较强的有机磷类、氨基甲酸酯类以及菊酯类农约也是目前中药材中农药残研究较多的内，詹雁用超声波提取、FLORISIL一活性炭相性净化，用毛细管气相色谱分离ECD检测时测定白芷、坩参、三七、金银花12种有机氯和拟除虫菊晰类农药；赵瑛博采用乙腈提取，同相举取柱净化，以HPLC分离电喷雾正离子模式质瞒HPCMSMS测定黄芩中6种氨基甲酸酯农约残，检为00020004MGKG一；载荣华等建J穿1LJ坨中有机氯、有机磷、拟除虫菊酉旨类等23种农约残的QUECHERS提取及其气相色谱质谱分析法；陆继伟等选用代表性的白果、人参、肉杜、红化、银杏叶、广藿香等中药材，经高速均质器均质提取，C同相萃取柱、石墨化碳氨基串联同丰苹圾佳SPE净化后，气相色谱双塔舣住进样，舣火焰光度检测器同时测定53种有机磷农药残量，敏度高，重现性好。3中药材农药残留限量标准研究农药残留限量标准的制定是保障农产安个保护消费者健康的基础剐时也是提高我阳毙争力的有效手段。我国于2005年1门25F发布J食品中农药最大残留限量罔家标准，包括了136种农药的478项MRL【IS。相比之卜的我吲RF1药材农药残留的限量标准很少，我同现存执行的涉及TI药材农药残留限量的标准束源于RF1药2010版，其巾对黄芪币H草的自机氯六六六、滴滴涕、五氯硝基苯农药残留限量进行_R规定，其他标准还有人参NYT10432006、卡句杞GBT197422008、ILGB190862008、川参、白芍、金银化以及出口的绿色药材等。4中药材农药残留脱除方法研究目前，为控制中药材农药残留情况，【IJJJ2011年6月第13卷第6期中国现代中药MODERNCHINESEMEDICINEJUN2011VO113NO6栽培阶段采用预防性措施，如在新开垦的荒地种植药材，选择不适于病虫害发生的季节栽种药材以避免农药的施用等，但短期内从源头解决中药材中农药残留超标问题存在一定难度。因此，为保障消费者的身心健康和生命安全，应采取有效的技术手段，针对不同受残留农药污染的药材和残留农药本身物理化学性质，加强对中药材残留农药的脱除方法研究。目前针对中药材残留农药去除的研究报道较少，已有研究主要是针对果蔬残留农药的去除，去除的方法包括有碱洗法、加热法、水洗法、炮制法、超临界流体萃取法以及生物降解法等，上述方法对于那些成分稳定的中药材具有一定的借鉴价值J。在中药材农药残留去除的研究中，以上方法的适用性有待进一步验证，主要是由于中药材成分复杂，很难在脱除中药材残留农药的同时，既不破坏中药材的有效成分又不会对中药材构成二次污染。目前用于农残去除较多的方法是超临界流体萃取法，如万绍晖等L2采用超临界CO，流体萃取法去除当归中有机氯农药，用毛细管气相色谱法测定除毒前后农药残留量，除毒率达951RSD26，用HPLC测定除毒前后当归中阿魏酸相对含量为1035RSD32，相关组分含量没有显著变化；李欢欣等J利用超临界CO，流体萃取法去除黄芪中残留的有机氯农药，残留农药的去除率达到876；李学洋等J用质量分数10或70乙醇对人参进行浸泡预处理，在30MPA、60C【条件下利用新型高效超I临界萃取去除有机氯农药，一次去除率可在91以上，而人参总皂苷损失量则小于3。比较新的去除技术有吸附树脂法以及生物降解法，具有高效、彻底、无二次污染的优势，如陈艳立等利用吸附树脂对芦丁和三七皂苷提取物中有机氯农药PCNB去除，一次去除率为975和100，而提取物中有效成分的保留率分别为985和989；刘建利在对有机磷农药残留微生物降解的研究综述中论述了利用生物作用将农药分解为小分子无毒或低毒化合物，并最终降解为水、CO，和矿物质的过程，如邻单胞菌、假单胞菌、黄杆菌属类微生物可降解有机磷农药甲基对硫磷，产物为二甲基硫代磷酸DMTP和对硝基苯酚PNP无毒、低毒化合物。5讨论农药残留问题已成为世界广泛关注的中药安全问题之一，与人类健康和贸易出口有直接联系。而中药作为我国优秀文化遗产的瑰宝，在治疗疑难杂症、养生调理等方面为世界注目。因此，中药材中农药残留的研究具有重要意义。目前中药材农药残留的主要研究方向在于开发简单、快速、有效的样品前处理技术，以及高灵敏度和高选择性的多残留同时检测方法。虽然针对农残超标中药材的检测和脱除研究已取得一定进展，但这些在残留农药污染发生后采取的补救措施毕竟是被动的。栽培绿色中草药，应是今后中药残留农药污染控制的发展方向。积极开发低毒、高效、低残留、易降解的农药，才能在保证中药栽培收益和保护环境、保护人体健康方面取得双重功效。匮圈参考文献1薛健，刘东静，陈士林，等中药外源污染物研究现状与分析J世界科学技术中医药现代化，2008，10191952薛健，金红宇，田金改，等中药农药残留问题研究与思考J中草药，2007，3810157815803薛健，杨世林，陈建民，等我国中药材农药残留污染现状与对策J中国中药杂志，2001，2696376394邢秋格农药污染的现状、原因及防止对策J河北林业科技，2010，446475高倩，花日茂，汤锋，等中药材农药残留研究现状J安徽农业科学，2008，362310147101516陈贤均，赵祖国我国农产品农药残留现状及农药遗传毒性研究进展J毒理学杂志，2010，2443243267刘浩中药农药残留分析中的固相萃取技术及其研究进展J时珍国医国药，2010，2182L1421168张焱灿农药残留检测的前处理技术J现代农业科技，2011，227289SAKAMOTOM，TSUTSUMITAPPLICABILITYOFHEADSPACESOLIDPHASEMICROEXTRACTIONTOTHEDETERMINATIONOFMULTICLASSPESTICIDESINWATERJJOURNALOFCHROMATOGRAPHYA，2004，10286310张艳，王松雪，孙长坡超临界流体萃取技术在粮食农药残留检测中的应用J食品科学，2010，31127427711刘忠加速溶剂萃取一气相色谱测定茶叶中多种农药残留J中国食品卫生杂志，2010，22651651712王耀加速溶剂萃取凝胶渗透色谱固相萃取净化气相色谱质谱法测定咸鱼中有机磷农药残留J分析化学研究报告，2011，391677113郝丽丽，薛健有机氯农药的多残留分析及其在中草药中的应用J中国中药杂志，2005，30640540914詹雁GC法测定中药材中有机氯及拟除虫菊酯类农药的残留J华西药学杂志，2010，25332332515赵瑛博HPLCMSMS法测定黄芩药材中氨基甲酸酯类农药残留J农药，2010，46643443816戴荣华，任雪冬，何潇分散固相萃取一气相色谱质谱联用法测定穿山龙中23种农药残留J中国药学杂下转第54页512011年6月第13卷第6期中国现代中药MODEMCHINESEMEDICINE织培养方面的研究；重视轮叶党参种植的科学性，保障产品品质；加强轮叶党参市场的宣传力度；轮叶党参的开发利用一定会产生其应有的社会和经济效益。匮圈参考文献1吕学泰，吕树芸点校泰山药物志点校M海洋大学出版社，19936714YOOHYEHYUN，BACKSEUNGHOIL，PARKYUNKYUNG，CTA1QUALITYCONTROLOFDRIEDROOTSOFCODONOPSISLANCEOLOATAJPHARMACOG，2002，332858715王德才，高丽君，高艳霞泰山轮叶党参多糖体外抗氧化活性的研究J中国生化药物杂志，2008，292104青岛青岛16王德才，陈美华，辛晓明泰山轮叶党参提取物对小鼠2苏义艳，张艳云，邹玉兰山胡萝卜的栽培及食用J农业与技术，2003，232553孙禄，周淑荣羊乳的开发利用价值J特种经济动植物，1999，2329304张志焱泰山四大名药及其驯化栽培J特种经济动植物，1998，1165孙紫阳泰山轮叶党参多糖的提取及含量测定J河北医学，2007，1311L2936王德才，冯蕾，吴从平泰山轮叶党参中总黄酮和多糖的含量测定_J医学研究杂志，2009，383867周茂金，王莉，苏关英不同生长年限泰山轮叶党参中多糖的含量测定J中国药房，2010，213533278杨月轮叶党参根总皂甙制备工艺研究J中草药，1993，2494699梁志敏，林结，原忠轮叶党参化学成分研究J中国中药杂志，2007，321313631O野崎和吉桔梗科羊乳的成分研究J国外医学中医中药分册，1987，92575811吉林省中医中药研究所长白山植物药志M长春吉林人民出版社，1982109512毛士龙，桑圣民，劳爱娜，等山海螺的化学成分研究J天然产物研究与开发，2000，1211313CHANGYOUNGKYUNG，KIMSANGYOL，HANBYUNGHOONCHEMICALSTUDIESONTHEALKALOIDALCONSTITUENTSOFCODONOPSISLANCEOLATAYAKHAKHOECHIJYAKHAKHOECHI，1986，30117耐缺氧及抗疲劳能力的影响J泰山医学院学报，2007，28640117李美子轮叶党参对鼠的抗疲劳作用的实验研究J_时珍国医国药，2010，21122718王德才，邱玉王，张显忠泰山轮叶党参多糖对幼年小鼠和免疫抑制小鼠的免疫调节作用J时珍国医国药，2009，2011288619韩春姬，李铉万，李莲姬，等轮叶党参多糖对小鼠S180肉瘤的抑制作用J延边大学医学学报，2000，23425025220韩春姬，王冬明，俞星轮叶党参乙醇提取液预防大鼠脂质代谢紊乱的机制J吉林大学学报医学版2005，31456421徐勤，陈晓军，刘布鸣轮叶党参乙醇提取物益气活血化