紫外可见分光光度法概述（2课时）

武汉软件工程职业学院教案（附页）章节名 称第二章、紫外可见分光光度法授 课安 排授 课时 数2授 课时 间授 课方 法讲授授 课 教 具教 学目 的1、了解紫外可见吸收光谱法基本原理2、了解物质产生颜色的原因3、朗伯-比尔定律教 学重 点朗伯-比尔定律教 学难 点物质产生颜色的原因紫外可见吸收光谱法（UV-Vis）是利用某些物质的分子或离子对紫外和可见光谱区辐射能的吸收来研究物质的组成和结构的方法，它包括比色分析法和紫外可见分光光度法。这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁，广泛用于无机和有机物质的定性和定量测定。紫外-可见光谱区域的详细划分如图4-1所示。紫外-可见光区一般用波长（nm）表示。紫外光是波长为10400 nm的电磁辐射，分为远紫外光（10200nm）和近紫外光（200380 nm）。远紫外光可被大气中的水气、氮、氧和二氧化碳等所吸收，只能在真空中研究，故又称真空紫外光。本章仅讨论近紫外光谱。 图31 紫外可见光谱区域可见光是指波长为380780nm的电磁辐射，它可被人的眼睛所感觉。溶液中物质选择性地吸收可见光中某种颜色的光，溶液就会呈现出一定的颜色。表41列出了物质的颜色与吸收光颜色之间的互补关系。表4-1 物质颜色与吸收光颜色的关系物 质 颜 色吸 收 光颜 色波 长/nm黄绿紫400450黄蓝450480橙绿蓝480490红蓝绿490500红紫绿500560紫黄绿560580蓝黄580610绿蓝橙610650蓝绿红650780第一节 紫外可见吸收光谱原理 不同物质具有不同的分子结构，对不同波长的光会产生选择性吸收，因而具有不同的吸收光谱。无机化合物和有机化合物吸收光谱的产生在本质上是相同的，都是外层电子跃迁的结果，但二者在电子跃迁类型上有一定的区别。二、光谱吸收曲线 （一）Lambert-Beer定律 Lambert-Beer定律是光吸收的基本定律，也是分光光度分析法的依据和基础。当入射波长一定时，溶液的吸光度A是待测物质浓度和液层厚度的函数。 Lambert-Beer定律的数学表达式为： (4-1)e 为摩尔吸光系数，单位 。其物理意义是吸光物质的浓度为1，液层厚度为1cm时溶液的吸光度。b是液层厚度，单位为cm ，c是物质的浓度，单位为 。（二）光谱曲线的表示方法将不同波长的单色光依次通过被分析物质，分别测得不同波长下的吸光度或透光率，然后绘制吸收强度参数波长曲线，即为物质的吸收光谱(图43)。在紫外可见光谱中，横波长用nm为单位，纵坐标为吸光度，具有最大吸收值的波长称为最大吸收波长，一般用表示。物质的吸收曲线包含如下信息： 1同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长max。 2浓度不影响吸收曲线形状和max。 3不同物质，它们的吸收曲线形状和max则不同。所以吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。 4不同浓度的同一种物质，在max处吸光度A的差异最大，测定最灵敏。 5吸光度具有加和性，A = A1 + A2 + A3 + 。在最大