《衍射核磁质谱》PPT课件

质谱,圆二色谱,元素分析,核磁共振,紫外可见光谱,旋光光谱,红外和拉曼光谱,X-射线单晶衍射,化合物组成和结构的确定,研究化合物要经过以下几个步骤:,粗产品,分离提纯,定性分析,定量分析,除杂质,确定组成元素,质量分析,测定分子量,结构分析,实验式或最简式,分子式,结构式,元素分析,定性分析有机物的组成元素分析；定量分析分子内各元素原子的质量分数,现代元素分析法,数据经处理后即可确定有机物的实验式：,分析方法:,例如：从刺果甘草根中分得某白色晶体，元素定性分析表明该白色晶体只含C、H、O三元素,元素定量分析的结果如下,C:79.35%;H:10.21%。,O元素的含量=(100-79.35-10.21)%=10.44%三种元素在分子结构中所占比例为：C：79.3512=6.61H:10.211=10.21O:10.4416=0.65化合物分子结构中原子个数比为：6.61:10.21:0.65=10.16:15.58:110：16：1,该化合物实验式为：C10H16O分子式为：(C10H16O)nn=1,2,3.,n的确定为:,n=,分子量的测定：质谱法（最常用）,进样系统,离子源,质量分析器,检测器,1.气体扩散2.直接进样3.气相色谱,1.电子轰击2.化学电离3.场致电离4.激光,1.单聚焦2.双聚焦3.飞行时间4.四极杆,质谱仪需要在高真空下工作：离子源（10-310-5Pa）质量分析器（10-6Pa）1大量氧会烧坏离子源的灯丝；2用作加速离子的几千伏高压会引起放电；3引起额外的离子分子反应，改变裂解模型，谱图复杂化。,质谱分析原理,在磁场存在下，带电离子按曲线轨迹飞行；离心力=向心力；m2/R=H0eV曲率半径：R=（m）/eH0质谱方程式：m/e=(H02R2)/2V离子在磁场中的轨道半径R取决于：m/e、H0、V改变加速电压V,可以使不同m/e的离子进入检测器。质谱分辨率=M/M（分辨率与选定分子质量有关）,加速后离子的动能:(1/2)m2=eV=(2V)/(m/e)1/2,质量分析器原理,四极杆质量分离器,仪器内部结构,联用仪器,M/Z,分子离子峰,分子电离一个电子形成的离子所产生的峰。分子离子的质量与化合物的分子量相等。,化合物分子离子峰的稳定性顺序：芳香化合物共轭链烯烯烃脂环化合物直链烷烃酮胺酯醚酸支链烷烃醇,质谱图是以质荷比(m/z)为横坐标、相对强度为纵坐标构成,一般将原始质谱图上最强的离子峰定为基峰并定为相对强度1O0%,其他离子峰以对基峰的相对百分值表示。,例如：采用电子轰击质谱（EI-MS）测得上述化合物的分子离子峰为456。那么，n=456152=3结合实验式C10H16O得上述化合物的分子式为：C30H48O3.（C30H48O3代表刺果甘草皂苷元）,分子离子峰的特点,一般质谱图上质荷比最大的峰为分子离子峰；有例外。形成分子离子需要的能量最低，一般约电子伏特。,质谱图上质荷比最大的峰一定为分子离子峰吗？如何确定分子离子峰？,高分辨率质谱仪可将物质的质量精确到小数点后第三位。例如：C8H12N4、C9H12N2O、C10H12O2、C10H16N2四个化合物的分子量同为164，但精确质量则并不相同，在高分辨率质谱仪中很容易进行区别。,高分辨率质谱,同位素离子峰,由于同位素的存在，可以看到比分子离子峰大一个质量单位的峰；有时还可以观察到M+1,M+2，M+3。；,组成有机化合物的主要元素C、H、O、N等均由相对丰度比一定的同位素所组成。大多数MS图中，如能见到稳定的分子离子峰M+，则在高出其1-2个质荷比处可见到M+1+与M+2+的同位素峰。对于一定的化合物，分子离子峰与其同位素峰的相对强度为一确定值。,同位素丰度比法,碎片离子峰,一般有机化合物的电离能为713电子伏特，质谱中常用的电离电压为70电子伏特，使结构裂解，产生各种“碎片”离子。,正己烷,碎片离子峰,正癸烷,直链烷烃饱合烃的质谱图,支链烷烃,环烷烃,醚的质谱图,光谱区与能量相关图,1924年泡利提出核自旋的假设-实验证实。1932年，发现中子后，认识到：核自旋是质子自旋与中子自旋之和。核磁矩：质子数和中子数两者或其一为奇数时，核才有非零的核磁矩产生核磁共振.核磁共振(nuclearmagneticresonance，NMR)是指自旋磁矩不为零的原子核，在外磁场中，其核能级将发生分裂。若再有一定频率的电磁波作用于它，分裂后的核能级之间将发生共振跃迁的现象。,核磁共振,核磁共振是1946年由美国斯坦福大学布洛赫(F.Block)和哈佛大学珀赛尔(E.M.Purcell)各自独立发现的，两人因此获得1952年诺贝尔物理学奖。50多年来，核磁共振已形成为一门有完整理论的新学科。核磁共振的方法与技术作为分析物质的手段，由于其可深入物质内部而不破坏样品，并具有迅速、准确、分辨率高等优点而得以迅速发展和广泛应用，已经从物理学渗透到化学、生物、地质、医疗以及材料等学科，在科研和生产中发挥了巨大作用。,1952年诺贝尔物理学奖：布洛赫(FelixBloch)共振条件：0=H0/(2),共振条件,(1)核有自旋(磁性核)(2)外磁场,能级裂分;(3)照射频率与外磁场的比值0/H0=/(2),I=0无自旋现象I0有自旋现象。,核磁共振基本原理,原子核的自旋与磁距,=（h/2)I（I）,自旋核在H0中的自旋取向：2I+1,1H：I=1/2m=+1/2（顺磁排列）E=-H0（低能态）m=-1/2（反磁排列）E=+H0（高能态）两者能量差：E=2H0,N,S,Bo,B1,Detector,FrequencyGenerator,Recorder,Magnet,核磁共振原理图,核磁共振仪,1永久磁铁：提供外磁场，要求稳定性好，均匀，不均匀性小于六千万分之一。扫场线圈。2射频振荡器：线圈垂直于外磁场，发射一定频率的电磁辐射信号。3射频信号接受器（检测器）：当质子的进动频率与辐射频率相匹配时，发生能级跃迁，吸收能量，在感应线圈中产生毫伏级信号。,4样品管：外径5mm的玻璃管,测量过程中旋转,磁场作用均匀。,观察共振现象通常有两种方法：,一：调频,二：调场,聚四氟乙烯样品的共振曲线,水样品的共振曲线,扫描过程中的共振吸收图：,核磁共振波谱,所谓核磁共振波谱，实际上是吸收率（纵坐标）对化学位移（横坐标）的关系曲线。,乙醇中三个核磁共振吸收谱,屏蔽效应和化学位移:,核外电子在外磁场作用下,在与外磁场垂直的平面上绕核环流,形成环电流同时产生与外加磁场相对抗的感应磁场.感应磁场减弱外磁场对磁核的作用。1H有效=H0(1-)=H0-H0=H0-H感应处于不同化学环境的质子,核外电子云分布不同,值不同。,1H氢谱(PMR)提供的结构信息：,化学位移、峰的裂分情况与偶合常数、峰面积(积分曲线),1.屏蔽效应(shieldingeffect),核磁共振技术应用,核磁共振方法适合于液体、固体。如今的高分辨技术，还将核磁用于了半固体及微量样品的研究。核磁谱图已经从过去的一维谱图（1D）发展到如今的二维（2D）、三维（3D）甚至四维（4D）谱图，陈旧的实验方法被放弃，新的实验方法迅速发展，它们将分子结构和分子间的关系表现得更加清晰。在世界的许多大学、研究机构和企业集团，都可以听到核磁共振这个名词。而且它在化工、石油、建材、食品、冶金、地质、国防、环保及其它工业部门用途日益广泛。在我国，其主要应用在基础研究，企业和商业应用普及率不高，主要原因是产品开发不够、使用成本较高。但在石油化工、医疗诊断方法应用较多。,1）双键与三键化合物的磁各向异性效应,如果邻近不同的核与所研究的核之间有着接近或相同的偶合常数,那么谱线分裂的数目为(n+n+1)。,MRIisusedforimagingofallorgansinthebody.,人体不同组织水的弛豫时间T1和T2,常见有机化合物的化学位移范围,NaCl晶体的三维空间点阵,X射线的应用,单晶:基本由同一空间点阵所贯穿形成的晶块.多晶:由许多很小的单晶体按不同取向聚集而成的晶块.微晶:只有几百个或几千个晶胞并置而成的微小晶粒(粉末).,晶体,这规定了X衍射分析的下限：对于一定波长的X射线而言，晶体中能产生衍射的晶面数是有限的。对于一定晶体而言，在不同波长的X射线下，能产生衍射的晶面数是不同的。,入射线波长与面间距关系,所以要产生衍射，必须有,d/2,采用单晶体,特征x射线.回转法的摄取情况如下图所示.,回转法,图中R为相机的半径,Hl为l层线与中央层线的距离,由图可得,故有,同样,若使晶体分别绕a或b轴旋转,则有,l=0,l,Hl,转动,R,l,x射线,底片,分别求得晶胞参数a,b,c后,便可计算晶胞的体积,普遍的计算公式为,在此基础上可进一步计算晶胞中所含原子或“分子”数,式中为密度,M为分子量,N0为阿弗加得罗常数.,目前使用最为广泛的方法是CCD面探法.测定物质结构最为有效的方法是生长出单晶,测定其结构.CCD面探法在数小时内可测出晶体结构（四圆衍射法可能需要数天完成,而更早时期的照相法可能需要数年才能完成的工作）.应特别指出的是X射线衍射不能定出化合物中H原子的位置.因H的核外只有一个电子,对X射线的衍射非常微弱.H原子的位置要用中子,电子等衍射来确定.,CCD面探法(或四圆衍射法),多晶粉末;使用特征X射线;测定时使晶体保持转动,单晶(a)和多晶(b)产生衍射情况,多晶衍射法（也称多晶粉末衍射法）,(a),(b),当用照相法时,粉末法原理示意图,衍射仪主要由X射线机、测角仪、X射线探测器、信息记录与处理装置组成。,X射线,样品台,探测器,2,测角仪,样品转过角，其某组晶面满足Bragg条件，探测器必须转动2才能感受到衍射线，所以两者转动角速度之比为1:2,X射线管发出单色X射线照射在样品上，所产生的衍射由探测器测定衍强度，由测角仪确定角度2，得到衍射强度随2变化的图形。,强度,111,200,220,311,222,400,331,420,422,511,333,440,531,600,442,2030405060708090100110,2,NaCl的粉末衍射图,定性分析-材料种类、晶型的确定,每种物质都有特定的晶格类型和晶胞尺寸，而这些又都与衍射角和衍射强度有着对应关系，所以可以象根据指纹来鉴别人一样用衍射图像来鉴别晶体物质，即将未知物相的衍射花样与已知物相的衍射花样相比较。如样品为几种物相的混合物，则其衍射图形为这几种晶体的衍射线的加和。一般各物相衍射线的强度与其含量成正比。,强度,111,200,220,311,222,400,331,420,422,311,333,440,531,600,442,2030405060708090100110,2,平面偏振光(Planepolarizedlight),E,M,平面偏振光振动方向保持不变振幅发生周期性变化,旋光色散(Opticalrotatorydispersion),一束平面偏振光通过光学活性分子后，由于左、右圆偏振光的折射率不同，偏振面将旋转一定的角度，这种现象称为旋光(Opticalrotation)，偏振面旋转的角度称为旋光度。朝光源看，偏振面按顺时针方向旋转的，称为右旋，用“+”号表示；偏振面按逆时针方向旋转的，称为左旋，用“-”号表示,旋光度,=lc是旋光物质的比旋光率，单位是度厘米210克-1对同一物质，值与波长有关旋光率与波长的关系称为旋光色散(Opticalrotatorydispersion,ORD),旋光色散,旋光色散常用摩尔比旋表示。=*M/100M为旋光介质的分子量,.旋光光谱（ORD）用不同波长的偏振光照射光学活性化合物，并用波长对比旋10-2或分子比旋10-2作图，得到的曲线即为旋光光谱。,圆偏振光(Circularpolarizedlight),振幅保持不变，而方向周期变化，电场矢量绕传播方向螺旋前进,圆偏振光,朝光源看，电场矢量方向按顺时针方向旋转的，称为右圆偏振光；电场矢量方向按逆时针方向旋转的，称为左圆偏振光。,圆二色性(circulardichroism,CD),光学活性分子对左、右圆偏振光的吸收也不同，使左、右圆偏振光透过后变成椭圆偏振光，这种现象称为圆二色性。,圆二色性的表示,吸收(率)差=L-RA=ALAR椭圆度，摩尔椭圆度=2.303(ALAR)/4=3298(L-R)3300(L-R)在蛋白质研究中，常用平均残基摩尔椭圆度,叠加原理,一束自然光可以分解或看作两束相互垂直而没有相位关系的平面偏振