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文档简介
医学微生物学,实验一细菌形态学,本次实验内容,一、实验室规则二、油镜的使用三、细菌的基本形态和特殊结构的观察四、革兰氏染色法五、自然界中细菌的分布,(一)实验前要做好实验预习,进实验室只带必要的文具、讲义,并穿工作服。(二)实验室内应保持清洁、安静,实验时要认真严肃,禁止抽烟、饮食和开玩笑。,一、实验室规则,(三)爱护实验器材,注意节约实验材料,实验室内任何物品不得带出室外。(四)注意安全,若带菌材料污染桌面、地板、书籍和衣物或误吸入口,应立即报告教师进行处理。,(五)实验中待培养的材料应放在培养区;实验用过的带菌材料如吸管、玻片等应放在消毒缸、消毒箱等消毒区,不得放在桌上或冲洗于水槽内。,(六)实验完毕,桌面应整理清洁,洗手后方可离室。值日同学负责湿性打扫实验室,并关好水、电、门窗。,二、油镜的使用(一)、油镜头的识别油镜头的下缘,一般刻有一黑圈,标有油90、100、oel、oil等字样。显微镜的接物镜有低倍镜头,高倍镜头和油镜头,其中油镜头的放大倍数最大。,(二)油镜的原理:,滴镜油后可以增加油镜视野的亮度。,(三)镜检要领把载玻片固定于载物台上,使油镜头对准镜筒。于载玻片上滴一小滴液体石腊,眼睛从镜筒侧面看,旋转粗调节器,使镜筒下降浸入镜油并贴近标本,但勿触及玻片。,镜检完毕后,把镜筒升高,用擦镜纸把油镜头上的镜油擦净。,(四)油镜的保护办法,细菌的基本形态可分为球菌、杆菌、螺形菌(包括弧菌)三类。,三、细菌基本形态的观察,1球菌:如葡萄球菌经结晶紫染色后为球状,常堆集成葡萄串状,呈紫色。,葡萄球菌,肺炎球菌,链球菌,2杆菌:如大肠杆菌经番红染色后呈淡红色杆状,两端钝圆,散在排列。,大肠杆菌,3螺形菌:如霍乱弧菌经稀释复红液染色后呈红色弧形,菌体微弯,如逗点状,或呈眉毛状,散在排列。幽门螺杆菌呈螺旋状、U状、S状及海鸥展翅状。,幽门螺杆菌,四、革兰氏染色,(一)细菌涂片的制作(二)染色:单染色法复染色法革兰氏染色法抗酸染色法,(一)细菌涂片标本的制作1涂片:取清洁无油载玻片一张,将接种环用火焰烧红灭菌,待冷后取一环菌液轻轻涂抹在玻片上,制成直径约1cm大小薄层,然后将接种环灭菌。,2干燥:涂片置室温自然干燥,必要时可将标本面朝上,放在离火焰较高处微微烘干,但切勿在火焰上直烤。,3固定:标本面朝上,用钟摆样速度来回通过火焰三次。,(二)革兰氏染色法步骤1初染:在上述已固定的涂片上,滴加结晶紫染液,染色1分钟,水洗。2媒染:滴加革兰氏碘液,作用13分钟,水洗。,3脱色:滴加95酒精,并频频摇动玻片,至无紫色脱出为止(约20秒),水洗。4复染:加番红染液,复染半分钟,水洗,用吸水纸印干后,油镜检查。,1初染:结晶紫染色液,1分钟媒染:革兰氏碘液,1分钟脱色:95%酒精,15-20秒复染:番红染色液,30秒,(三)革兰氏染色法1、结果观察:革兰氏阳性菌-兰紫色革兰氏阴性菌-红色2、原理3、意义,五、细菌的特殊构造:1、鞭毛2、荚膜3、芽胞4、菌毛,鞭毛,Flagellum,化学组成:,功能:,鞭毛蛋白,运动器官与致病有关鉴定分类细菌,变形杆菌(鞭毛),荚膜,化学组成:,功能:,产气荚膜杆菌,肺炎链球菌,Capsule,多糖或多肽,抗吞噬作用粘附作用抗有害物质损伤作用,芽胞,功能与医学上意义:,Spore,对外界的抵抗力增加可发芽成繁殖体有致病性,有鉴别作用应以杀死芽胞为灭菌效果的指标,目的要求1通过实验对细菌在自然界的分布有一感性认识。2初步建立无菌观念,认识到无菌操作技术在医疗实践和微生物学实验中的重要性。,六、自然界中细菌的分布,(一)、空气中细菌的检查(二)、鼻腔中及书籍上细菌的检查(三)、检查手指皮肤消毒前后的细菌,作业:1、请画图示意细菌的基本形态和特
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